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文档简介

母液的制造,理论知识:培养基:植物组织培养的物质基础,也是组织培养能否成功的重要因素之一。培养基的主要成分是植物生长发育所需的各种营养素。(主要成分)无机盐类:大量元素,(铁盐有机营养成分):维生素,肌醇,氨基酸等植物生长调节剂:细胞分裂素类,生长素类:吲哚乙酸(IAA),萘乙酸(NAA),莫,根据培养材料的种类和目的选择合适的培养基,在所有情况下都没有适合组织培养的培养基。母液的制备,培养基的制备是植物组织培养的基本工作。培养基中含有很多化学成分,其数量有多种,其性质都不同。特别是微量元素、维生素等微量成分含量少,不仅有计量问题,而且容易产生误差,所以准备母液是科学方便的方法。使用母液可以保证培养基的个别成分和制造的便利性,容易低温保存,提高了工作效率。母液的制备,储备液体(母液)母液将培养基成分扩大几倍,一般是10倍、20倍、100倍或以上的浓缩溶液。按试剂的种类和性质分别计量,分别溶解,单独制造,单独保存,或混合保存,制造培养基时按比热摄取即可。制作母液和培养基时,要使用蒸馏水,这样杂物才不会对培养物产生不利影响。母液的制备,实验1MS培养基预备液体(母液)的制备,第一,实验目的熟悉MS培养基的组成,掌握制备液体(母液)的方法。第二,实验原理:为了培养基的制备、方便和准确使用,一般采用母液方法准备,即使用选定培养基配方的试剂,扩大数倍后用正确的计量,首先将一系列母液存放在冰箱中,使用时稀释比例吸收母液进行制作即可。以MS培养基为例,所需母液可分为MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液、MS有机化合物母液等。生长物质母液也准备在多种培养基中使用。母液的制造,第三,实验仪器和药品电子分析天平,托盘秤,烧杯(50ml,100ml,500ml,1000ml),量筒(1000ml,100ml,25ml),25ml,母液准备,4,母液准备流程图,按扩张倍数计量,母液分割,结晶培养基,溶解,固定容量,标签,存放在冰箱里,按顺序混合,母液准备,5,实验方法和步骤1。大量元素母液的制备,即包含n、p、k、Ca、Mg、s 6个元素的混合溶液,通常以浓度为10倍或20倍的母液配制。母液的制备,注意:(1)各化合物分别计量,分别溶解,充分溶解后才混合。(2)有些无机成分,例如Ca2,SO42 1,Mg2 10,H2PO4 1,会一起发生化学反应,产生沉淀物。(。为了避免这种现象,各种化学药品必须用少量蒸馏水充分溶解才能混合,混合时要注意先到先得。速度慢,搅拌一下。溶解第一个化合物后,加入第二个化合物,最后一个化合物完全溶解后,将溶液倒入1000毫升的量瓶,固定1000毫升的容量。母液的制备,(3)CaCl22H2O应最后单独添加(氯化钙容易形成磷酸二氢钾、磷酸三钙、磷酸钙等不溶性沉淀物)。(4)然后倒入细哑光试瓶,注明制造日期,扩大倍数,将作者姓名放入4 的冰箱保存。母液的制备,2 .微量元素母液的制备MS培养基配方中微量元素的无机盐量分别扩大1000倍,电子天平中分别增加MnSO44H2O22.3g、ZnSO47H2O8.6g、H3BO36.2g、KI0.83g、Na2MoO42H2O0.25g、CuSO45H2O0.025g,母液的制备,2,微量元素母液的制备,母液的制备,3。铁盐母液的制备Fe是更多量的微量元素,水溶液中铁离子不稳定,容易发生氢氧化物离子和2的沉淀,必须单独制造。只有那种螯合试剂容易被植物吸收和利用,所以必须单独制造铁盐螯合母液。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠螯合物,应作为母液单独配制。这种螯合物使用方便,比较稳定,不易发生沉淀。母液的制备,3,MS铁盐母液的制备,铁盐母液的制备方法是,在电子秤中分别用蒸馏水加热硫酸(FeSO4.7H2O)和乙二胺四乙酸钠(Na2-EDTA),将其融化,全部熔化,搅拌后继续煮几分钟(约5min为溶液),如果将母液的配制,新配制的铁盐母液立即放入冰箱。沉淀容易形成。母液的制备,4,有机母液的制备MS培养基中的有机成分是维生素,肌醇,氨基酸等,数量少,必须用母液配制。培养基中的有机成分原则上应单独制造。母液的制造,(1)维生素母液的制造,按照培养基配方的100倍使用电子分析天平,分别放入l燃烧器,放入蒸馏水直接融化,然后混入100毫升容量的瓶子,存放在4冰箱。母液的制备,(2)以100倍于肌醇母液的配方,分别用电子分析天平放入l燃烧器,加入蒸馏水直接溶解,然后放入100毫升容量的瓶子,保存在4冰箱。母液的制造,5。植物生长调节剂的制备,生长素、细胞分裂等常用母液制造的激素使用方便、准确。调制前要用适当的少量有机溶剂溶解后确定容量。贴上明确制造激素的浓度的标签,放在冰箱里保管。母液的制备,激素的使用比较灵活,应根据培养的植物种类和目的而定。辛料制造吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、母液的最终浓度为1mm/ml (1)辛料,制备萘酚酸(NAA)材料500mg,少量使用1mol/LNaOH生长素乙酸(IAA)物质的制造方法上动,母液的制造,注意:所有母液都要注明标签、名称、制造倍数、日期,所有母液都要保存在0 4 的冰箱里,如果母液有沉淀或霉菌,不能继续使用。母液的制造,工作:(a) MS培养基母液的制造分为几个部

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