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.DNA的结构,liaolu,2,DNA的结构,1。DNA的一级结构2。DNA的二级结构3。DNA的第三级结构4。真核生物DNA的第三级结构5。DNA的特性,DNA的一级结构,3,DNA分子中各脱氧核苷酸之间的连接方式(3-5磷酸二酯结合)和排序顺序称为DNA的一级结构,简称碱基序列。主结构的方向为53。DNA主要结构的表示,4,4。DNA一级结构的基本特性,5,1,2股相互平行,方向相反,2,脱氧核糖,磷酸交替连接,形成DNA骨架,碱基行内3,内碱基通过氢键形成碱基对(a: t,c: g) 4,DNA在碱基条件下坚固断裂PH=11.5仍然稳定,但RNA容易被碱水解。2.DNA的二次结构,6,1953沃森和克里克根据DNA纤维x射线晶体衍射,提出了DNA分子结构的双螺旋模型。FrancisCrickandJamesWatson(1962年诺贝尔生理医学奖),DNA双螺旋的基本特征,7,2条链在相反方向平行,围绕同一中轴形成右双螺旋。相碱对之间的距离为0.34nm,周节距为3.4nm(10bp),d为2nm。双螺旋有两条不同的沟渠(大沟和小沟)。多郎是蛋白质识别DNA碱基序列并与之交互的基础,因为分子识别信息。DNA双螺旋结构稳定性因素,8,1。基本对之间的氢键2。基本积累力(1)相邻基本对之间的范德华力(2)基本对之间的疏水性3。磷酸基的负电荷被细胞内的组蛋白或阳离子中和,降低静电张力。DNA双螺旋类型,9,A-DNA200.262.611右侧B-DNA60.342.010右侧Z-DNA70.371.812左侧,双螺旋基准倾斜/。)基本间距/nm螺旋直径/nm角度碱基数螺旋方向,3 .DNA第三级结构,10,DNA在细胞内围绕双螺旋进一步旋转,折叠成超螺旋结构。DNA超高效结构、11,DNA superhelix由DNA拓扑异构酶(拓扑异构酶)生成。环状DNA分子往往以超螺旋结构存在,以负超螺旋为主,有利于转录开始。4 .真核生物DNA的第三级结构,12,真核生物DNA和蛋白质形成非常致密的复合物存在于核内,是基本的核心核心核心。核小体的结构,核小体链(11nm,每个核小体200bp),纤维素(30nm,每个圆环6个核小体),突起环(150nm,每个石环约75000bp),核糖体缠绕染色体示意图,15,DNA的特性,16,DNA的变性定义:某些物理和化学因素使DNA双链互补碱基之间的氢键断开,将双链DNA分成单链。只改变DNA的二次结构,不改变核苷酸序列。变质因素:过酸、碱、加热、离子强度变化等。变质后物理和化学性质的主要变化:粘度比还原强度减少的OD260增色(增色效果),17,DNA变性的本质是双链间氢键的破坏,18,DNA的增色效果DNA变性时溶液OD260值增加,19,解离曲线(熔断曲线),解离温度(熔化温度,Tm)解离期间UV吸收值的变化达到最大变化值的一半时的对应温度,在此温度下打开50%DNA双链。Tm值和DNA均质化和长度、碱GC含量、溶液离子强度、相关性、GC含量越高,Tm值越高。20,Tm值的计算和应用Tm=69.3 0.41(G C)/(G C A T)升高20bp,低于100%,核苷酸片段Tm=4(G C) 2(A T),PCR退火温度比Tm值4,21,DNA的复性定义:DNA恢复为双股结构,称为复性。影响复性的因素:样品的特性、DNA片段大小、DNA浓
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