【创新设计】浙江专版2014届高三生物二轮冲刺专题查补-专题8第1讲-基因工程和克隆技术课件

基因工程的诞生()。2.基因工程原理与技术(二)。3.基因工程的应用()。4.植物克隆()。5.动物克隆(一)。限制性内切酶、载体、重组DNA分子、基因工程药物、基因疗法、细胞全能性、植物细胞杂交、新作物品种培养、细胞增殖、动物细胞核、动物个体克隆、细胞膜流动性、思维激活1。基因工程和克隆技术中涉及哪些工具酶？建议基因工程的参考酶为限制性内切酶和DNA连接酶，克隆技术的参考酶为纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。2.限制性内切酶、脱氧核糖核酸连接酶和载体的化学性质相同吗？脱氧核糖核酸连接酶和脱氧核糖核酸聚合酶有什么区别？提示：不一样。限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶的化学性质是蛋白质，载体的化学性质是核酸。脱氧核糖核酸连接酶连接两个脱氧核糖核酸片段，而脱氧核糖核酸聚合酶只能在脱氧核糖核酸链上添加一个脱氧核糖核酸。细胞系和细胞系之间的本质区别或联系是什么？建议细胞系一般指可传代细胞，细胞系是具有特殊性质的细胞系。基因工程的核心是。2.基因工程的三种工具是：和，例如，质粒。3.基因工程史上第一次成功的实验是培养具有相同特征的大肠杆菌，这标志着基因工程的诞生。4.通常有两种方法获得目标基因，即对于那些目标基因序列已知的人，它是可用的；如果基因序列未知，这是必需的。5、构建重组DNA分子、DNA连接酶、限制性内切酶、基因载体、四环素抗性和卡那霉素抗性，化学合成目标基因，从基因库中寻找目标基因。用酶和酶水解细胞壁，得到分离植物细胞原生质体。6.细胞克隆的基本要求是确保分离的细胞。7.提高细胞克隆形成率的措施包括选择合适的培养基、添加、细胞生长支持、刺激、使用酸碱度调节等。纤维素，果胶，一种但不多，血清，滋养层，激素，CO2培养箱，自我校正。1.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能复制。(安徽，2013，6B)(2)。重组质粒和探针可以杂交，因为脱氧核糖和磷酸是交替连接的。(安徽，2013，6C) () 3。哺乳动物细胞体外培养的简易性：乳腺癌细胞容易获得乳腺细胞；胚胎细胞倾向于脂肪细胞。(2011上海，15a)4。腺苷脱氨酶基因通过质粒pET28b导入大肠杆菌，并成功表达。每个限制性内切酶识别位点至少插入一个ada。(2011浙江，6C)()。5.利用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞。()6。脱氧核糖核酸连接酶可以在目标基因和载体的粘性末端之间形成氢键。()7。用氯化钙处理大肠杆菌可以增加其细胞膜的渗透性。()8。用不同限制性内切酶切割的DNA分子不能连接。()9。细胞核包含物种完整基因组的活细胞是生物克隆的重要条件之一。()，10。一般血清中的抗体是一组识别不同抗原位点的抗体混合物，而单克隆抗体以特异性识别抗原分子的特定位点。()答案1.2.3 4.5.6.7.8.9 10。浙江大学农学院俞景泉教授课题组发现，植物激素油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)的表达和酶活性得到了提高。在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶可以逐渐将农药转化为水溶性物质或低毒性甚至无毒的物质，而其他的则直接从体内排出。一个研究小组进一步开展了以下实验操作。请回答以下问题。(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。步骤(1)通过聚合酶链反应技术用于基因扩增的耐热酶通常指_ _ _ _ _ _；酶让我们(2)图中导入重组质粒的方法为_ _ _ _ _ _，导入前需用_ _ _ _ _ _处理受体菌。(3)在引入重组质粒2后，通常需要进行检测和筛选。可以用_ _ _ _ _ _制成探针来检测重组基因是否已经导入。通过向培养基中添加_ _ _ _ _ _ _ _，可以筛选出含有目标基因的细胞。(4)请说出主题：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。为了分析和进行基因工程操作，必须首先通过各种方法获得目标基因：从基因库获得、人工合成目标基因或聚合酶链反应合成等。在构建基因表达载体的过程中，所用的工具酶包括限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶。图中的受体细胞是细菌，因此表达载体是通过转化法引入的。引入后，需要进行测试和筛选。从图中可以看出，转基因细菌对土壤中残留农药的分解能力最终是通过对照实验来测试的。答(1)从基因库或聚合酶链反应获得合成目标基因，合成耐热的DNA聚合酶限制性内切酶和DNA连接酶(2)转化氯化钙溶液(3)红霉素抗性基因红霉素(4)油菜素内酯可促进土壤中农药的分解，诱导和提取 1。获得目标基因(1):从自然界现有物种中分离，如从基因库中分离。(2)人工合成目标基因的常用方法包括：(1)化学合成：具有已知核苷酸序列的基因通过化学方法(必需的，非必需的)模板直接合成。(2)人工合成：模板作用下的人工合成。通过技术获得。直接分离，小，脱氧核糖核酸合成，不需要，核糖核酸，逆转录酶，聚合酶链反应，2。将目标基因导入受体细胞、原核细胞或酵母、受精卵、受精卵、体细胞、受体细胞、感受态细胞法(用CA处理)、显微注射技术、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、常用方法、微生物细胞、动物细胞、植物细胞、3。目标基因的检测和表达，DNA分子杂交，核酸分子杂交，抗原抗体杂交，4。重组DNA分子的构建(1)重组DNA分子、限制性内切酶、核酸内切酶、核酸连接酶的构建过程，(2)从“基因表达”层面理解基因表达载体的基本要素重组DNA分子的组成：目的基因启动子终止子标记基因复制起点。(2)启动子和终止子：启动子是启动转录的核糖核酸聚合酶结合位点；终止子是终止转录的位点。插入的靶基因只是结构基因的一部分，其表达需要调节序列。因此，在用作载体的质粒的插入位点之前需要启动子，在插入位点之后需要终止子。申请1)(2013浙江十校联考)下表列出了几种限制性酶识别序列及其切割位点。图1和2中的箭头表示相关限制性酶的切割位点。以下陈述不正确()。图1所示的质粒分子在被SMA切割后含有2个游离磷酸基团。图中所示的质粒被修饰。插入的SMA切割位点越多，质粒的热稳定性越高。通过使用如图所示的质粒和外源性DNA构建重组质粒。在构建重组质粒时，DNA连接酶分析图中所示质粒的目的基因和抗生素抗性基因正好位于形状记忆合金限制性内切酶的识别序列中。如果使用SMA切割，靶基因和标记基因将被破坏。回答丙，碧考点2克隆技术典型范例2(义乌仿真2013)说明了细胞融合技术的一些流程，请回答以下问题。(1)甲、乙细胞人工融合为丙细胞的过程包括_ _ _ _ _ _和_ _ _ _ _ _两个方面。d细胞称为_ _ _ _ _ _ _ _细胞。(2)如果细胞A和细胞B是植物细胞，这些细胞已经被酶降解以除去_ _ _ _ _ _。这种酶可能是_ _ _ _ _ _酶，由它产生的细胞称为_ _ _ _ _ _。(3)如果甲细胞是骨髓瘤细胞，乙细胞是淋巴细胞，那么丁细胞称为_ _ _ _ _ _细胞，其连续分裂过程在D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(1)细胞融合应包括膜融合和核融合。d细胞应该是杂交细胞。(2)如果甲和乙是植物细胞，细胞壁已被纤维素酶和果胶酶去除，称为原生质体。(3)如果甲和乙分别是骨髓瘤和B淋巴细胞，D是杂交瘤细胞，D细胞可以通过克隆培养产生单克隆抗体。(4)由于细胞膜的流动性，人和小鼠细胞的荧光标记将“混合”。答(1)膜融合核融合杂种(2)细胞壁纤维素酶和果胶原生质体(3)杂交瘤克隆单克隆抗体(4)细胞膜具有流动性，诱导和精制 1。植物组织培养和动物细胞培养的比较，全能性，增殖，固体，液体，植物激素，动物血清，连续表，无菌性，温度，酸碱度，2。几种细胞工程工艺流程图的比较，特别提醒影响植物细胞再分化的因素(1)外植体的遗传特性和材料的位置会影响愈伤组织的再分化能力。(2)培养基的组成和物理性质对器官的发生有一定的影响，但决定因素是植物激素的比例，尤其是生长素和细胞分裂素。(3)培养环境中的光照和温度也会影响愈伤组织的分化能力。应用2(绍兴第二仿真2013)下面描述的动植物克隆技术是错误的()。a .体外植物组织块在液体培养基中培养以获得愈伤组织b .细胞系通常具有恒定的核型c .几乎所有的植物组织细胞都可以被诱导再生新的植物d .向培养基中加入适量的滋养层细胞可以提高动物细胞克隆的形