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文档简介
.,实验六血涂片的制作和血细胞的观察,普通生物学,.,实验目的,掌握血涂片的制作,观察红血球的形态及在不同环境下的反应。,.,材料和用品,材料人血或鱼血主要用品显微镜酒精棉花5NaCl0.9%NaCl盖玻片蒸馏水载玻片注射针筒针头,.,实验内容与方法,.,血涂片的制作和血细胞的观察,1血涂片的制作用酒精棉球擦拭消毒指尖,用采血针刺破指尖,从采血针眼处挤出绿豆大小血滴,用清洁玻片面的一端轻轻接触血滴,使血滴附于玻片面上(注意勿触及皮肤,否则血在玻片上就不能成滴)以左手拿该片的两端,迅速用右手拿住另一载玻片的一端,在左手载玻片上由前向后接触血滴,使两载玻片约成45角,轻轻移动,使血滴成一直线,然后由前向后推为一均匀的薄片涂片在空气中干燥后置于染色架上,滴加瑞氏染色液,使涂片被染色液覆盖染1分钟后,再加等量的缓冲液于染色液上,浸染约58分钟此时涂片表面呈现一层古铜色用蒸馏水迅速冲洗,见涂片呈粉红色后,自然晾干,.,.,血涂片的制作和血细胞的观察,2血细胞观察制作良好的血涂片厚薄适宜,血膜分布均匀,呈粉红色。选一厚薄适宜部位置显微镜下观察。先用低倍镜观察全片,了解涂片染色、细胞分布情况,再用油镜观察.(1)红细胞数量最多,体积小而圆、均匀分布,呈红色的圆盘状,边缘厚,着色较深,中央薄,着色较浅,无细胞核、细胞器,胞质内充满血红蛋白。(2)白细胞白细胞数量较红细胞数量少,但胞体大,细胞核明显,极易与红细胞区别开。,.,嗜中性粒细胞是白细胞中较多的一种,约占白细胞总数50-70%。体积比红细胞大,主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小,分布均匀,着淡紫红色。胞核着深紫红色,一般分35叶,叶间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关,如核为杆状,则为嗜中性粒细胞的幼稚型。嗜酸性粒细胞比中性粒细胞略大,数量少,约占7%以下。核常分两叶,着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗粒,色鲜红或桔红。嗜碱性粒细胞数量很少,约占1%以下。在一般血涂片上不易找到,体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着许多大小不一的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶,也染成紫色,但染色略浅,一般都被颗粒遮盖,形状不清。,.,淋巴细胞数量较多,约占20%-40%,可见中、小型,淋巴细胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据整个细胞,染成深蓝紫色。胞质极少,仅在核的一侧出现一线状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大,胞质较小淋巴细胞的稍多,着色较浅。核圆形或卵圆形,位于细胞中部,也染成深蓝紫色。单核细胞数量少,约占2%-8%,是细胞中体积最大的一种,胞核呈肾形、马蹄形,常在细胞一侧,着色比淋巴细胞浅。血小板为形状不规则的细胞小体,其周围部分为浅蓝色,中央有细小的紫色颗粒,常聚集成群,分布于红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒,在油镜下才能看到颗粒周围的浅色胞质部分。,.,.,实验步骤,分别在3个玻片上滴上一滴5NaCl、0.9NaCl和蒸馏水。以酒精棉球消毒捐血者的指尖,等酒精自然蒸发后,用采血针在消毒指尖刺一个小口(勿太用力,以免造成大伤口)。将用过的采血针丢弃在指定的烧杯内。将指尖血液各滴一滴至3个玻片上,并盖上盖玻片。捐血者用棉花压住伤口直到血流停止,同时其他组员马上进行下一步骤。5在显微镜下观察红血球的大小,形状以及在不同渗透环境下的反应,並比照附图,有没有观察到
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