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文档简介
清溪中学陈华毅,课题3酵母细胞的固定化,一、酶的应用:,优点:催化效率高、低耗能、低污染,缺点:1、对环境条件敏感、易失活;2、难回收、不能再次利用、成本高:3、反应后,酶混在产物中,影响产品质量,如何解决?,课题背景,固定化酶:将分离提纯后的酶固定到一定的载体上,使用时将被固定的酶投放到反应溶液中,催化反应结束后,又能将被固定的酶回收,这样的酶叫做固定化酶。,水不溶性酶(固定化酶),水溶性酶,水不溶性载体,原理,基础知识,1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例,(1)需要酶,葡萄糖异构酶,(2)葡萄糖异构酶的优点,稳定性好、可以持续发挥作用,(3)在生产中直接使用酶有什么缺点?,酶溶解于葡萄糖溶液后,无法回收,造成浪费,固定化酶的反应柱示意图,葡萄糖,反应柱,果糖,上端注入,下端流出,生产过程:,3.固定化酶在生产实践中的优点,(1)反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本.(2)提高了果糖的产量和质量。,酶既能与反应物接触,又容易与产物分离,提高产品质量;同时固定在载体上的酶还可以反复利用,节约成本。,(二)固定化细胞技术,1.将酶或细胞固定化的方法,将酶(或细胞)包埋在细微网格里,将酶(或细胞)相互连接起来,将酶(或细胞)吸附在载体表面上,包埋法,化学结合法,吸附法,酶和细胞的固定方法和特点,2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别,联系:应用相同,都能催化某些反应,区别:,(1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收;,(2)固定化细胞技术对酶活性影响更小;,(3)固定化细胞固定的一系列酶;,(4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制;,3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料,明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等,,其共同的特点是不溶于水的多孔性载体,海藻酸钠,聚丙烯酰胺,发酵操作流程,酵母细胞的活化,配制CaCl2溶液,配制海藻酸钠溶液,将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合,固定化酵母细胞,冲洗凝胶珠,酒精发酵,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,(二)用固定化酵母细胞发酵,实验操作,1、将固定化的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2到3次。,2、将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25摄氏度下发酵24h。,利用固定化酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。,细胞的固定化要在严格的无菌条件下进行;反复使用固定化酵母细胞时,需要避免微生物的污染。在应用固定化酵母细胞进行酒精发酵时要注意控制好温度,保证缺氧的环境,并且发酵时间要稍长一些,增强实验效果。,三者优点和不足?,催化效率高,低耗能、低污染,对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。,酶既能与反应物接触,又能与反应物分离,同时固定在载体上的酶还可以被反复利用。,一种酶只能催化一种化学反应,而在生产
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