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文档简介
鸡蛋清胶体破坏以及方案设计,胶体的主要性质,1布朗运动:胶体分散粒子做不停的,无秩序的运动。2丁达尔效应:光束通过胶体,形成光亮的“通路”的现象。3电泳现象:在电流的作用下,胶体粒子的定向移动。这说明溶胶粒子带同性电荷,如果电场中固相不动而液相流动,称为电渗析(Electro-osmosis),加入电解质:在胶体中加入电解质,这就增加了胶体中与胶粒电性相反的粒子的浓度,而给带电荷的胶体粒子创造了吸引相反电荷离子的有利条件,从而减少或中和原来胶粒所带电荷,使它们失去了保持稳定的因素。这时由于粒子的布朗运动,在相互碰撞时,就可以聚集起来,迅速沉降。,胶体破坏的指标,提取鸡蛋清中蛋白质的方案设计,三、材料、试剂与器具1、材料新鲜鸡蛋2、试剂饱和硫酸铵、硫酸铵结晶、生理盐水、1mg/mL标准牛血清白蛋白液3、器具紫外分光光度计、离心机、恒温水浴锅、冰箱、电子天平,实验步骤,(一)、鸡蛋清清蛋白的提取5mL鸡蛋清(20)+5mL生理盐水(20)稀释液(以减少共沉淀)逐滴加入10mL饱和硫酸铵溶液,边加边搅拌,饱和度为50%,然后静置10min,3000r/min离心15min,弃沉淀,上清液,加入硫酸铵固体至不溶解为止,静置10min,3000r/min离心15min,弃上清液,沉淀,10mL生理盐水(20),溶解,用0.1mol/L醋酸调pH=4.6-4.8(卵清蛋白等电点),静置10min,3000r/min离心15min,弃上清液,沉淀(卵清蛋白晶体),5mL生理盐水(20),溶解(粗产品于20以下保存),紫外吸收法测定卵清蛋白的含量,(1)标准曲线的绘制按下表分别向每支试管加入各种试剂,摇匀。在280nm波长处分别测定各管溶液的A280值。以A280值为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。,(2)蛋白提取液中蛋白质含量测定提取液分别稀释1倍、10倍、20倍后,取待测蛋白质溶液1ml,加入蒸馏水3ml,摇匀,按上述方法在280nm波长处测定光吸收值,并从标准曲线上查出经稀释的待测蛋白质的浓度,超声波对提取的作用,超声具有凝聚作用,当它作用于溶液体系,可以促进传质过程,加快电解质离子与蛋白质周围的水化层的位置更换,离子很快取代水分子,从而使蛋白质的水化层被电解质离子取代,同时中和了蛋白质表面
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