脑脊液检验

,掌握脑脊液一般性状检查、脑脊液常用化学检查中的蛋白质检查、葡萄糖定量测定和氯化物定量测定、脑脊液显微镜检查的方法和临床意义。,脑脊液检查,一、标本采集和处理 （一）标本采集 （二）标本转运 （三）标本保存和接收二、一般检查 （一）理学检查 （二）化学检查 （三）显微镜检查三、临床应用,本节内容,脑脊液（cerebrospinalfluid,CSf ）是存在于脑室及蛛网膜下隙内的一种无色透明液体。大约70%的脑脊液是在脑室的脉络丛通过主动分泌和超滤的联合过程形成的；约30%的脑脊液是在大脑和脊髓的细胞间隙形成的间质液。形成的脑脊液经第三、第四脑室进入小脑延髓池，然后分布于蛛网膜下隙内。,CSF的功能,（1）缓冲保护作用。（2）运输。（3）调节压力和酸碱。（4）参与神经内分泌。,适应症,有脑膜刺激症状时，如脑膜感染性疾病。疑有颅内出血，如蛛网脑膜下腔出血。中枢神经系统肿瘤。不明原因的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪。中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉、造影等,禁忌症,对疑有颅内压升高者，为避免因腰穿诱发脑疝，应先作眼底检查，如有明显视乳头水肿，忌作腰椎穿刺。休克、衰竭或濒危状态的病人。穿刺处局部皮肤有炎症的病人。颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状的病人。,一、标本采集和处理,腰椎穿刺法,二、一般检查,二、一般检查：理学检查,颜色,正常：无色。红色：（1）穿刺损伤出血，（2）蛛网膜下腔或 脑室出血。黄色：（1）陈旧性出血，（2）蛛网膜下腔梗阻 （3）高胆红素血症。乳白色：常见于化脓性脑膜炎。微绿色：常见于绿脓杆菌、肺炎双球菌、甲型链 球菌感染所致。褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。,二、一般检查：理学检查,透明度：正常-透明。,二、一般检查：理学检查,凝固性：正常无凝块。,二、一般检查,二、一般检查：化学检查,球蛋白,苯酚,蛋白盐（白色混浊）,：,白色云雾状混浊,：,白色云雾状,：,：,正常：,阴性,白色絮状沉淀,立即形成白色凝块状,【原理】,【结果】,蛋白质定性试验潘氏试验,【临床意义】阳性：常见于脑、脊髓及脑膜炎症、肿瘤、出血等，以及脑软化、脊髓腔肿瘤、脑退化性疾病、神经根病变、脑脊液循环梗阻等疾病。,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,2,蛋白质,磺基水杨酸-硫酸钠,A530,腰池0.150.45g/L； 小脑延髓池0.10.25 g/L；侧脑室池：0.050.15 g/L,正常：,与标准蛋白比较,【原理】,【结果】,脑脊液蛋白质含量增加:常见于脑、脊髓及脑膜的炎症、肿瘤、出血等以及脑软化、脑退化性疾病、神经根病变和引起脑脊液循环梗阻的疾病等，当脑脊液中蛋白质在10g/L以上时，流出后呈黄色胶冻状凝固，而且还有蛋白-细胞分离现象，临床上称为Froin综合征，是蛛网膜下腔梗阻性脑脊液的特征,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,【临床意义】,成人：2.5-4.4mmol/L,减低：中枢神经系统细菌性、真菌性感染中枢神经系统肿瘤增高：主要见于糖尿病患者。鉴别细菌性和病毒性脑膜炎：细菌性脑膜炎显著降低。病毒性脑膜炎，脑脊液葡萄糖含量正常。,【参考值】,【临床意义】,氯化物测定-电极法,减低：细菌性或真菌性脑膜炎；氯化物测定对化脓性脑膜炎和结核性脑膜炎的鉴别有重要意义，脑脊液氯化物含量减低在结核性脑膜炎时为明显。增高：见于尿毒症、呼吸性碱中毒等。,【临床意义】,【参考值】,成人120130mmol/L,酶学检查,5,正电极,负电极,PH8.6缓冲液,2球蛋白,前清蛋白,球蛋白,球蛋白,1球蛋白,清蛋白,【原理】,前清蛋白2%6%、清蛋白55%65%、1球蛋白3%8%、2球蛋白4%9%、球蛋白10%18%、球蛋白4%13%。,【参考值】,前清蛋白增加见于脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病。清蛋白增加见于脑血管病变、椎管阻塞。和球蛋白增加见于脑膜炎、脑肿瘤。球蛋白增加可见于动脉硬化，脑血栓及脂肪代谢障碍性疾病。球蛋白明显增加见于脑肿瘤。,【临床意义】,7,免疫球蛋白质分析,抗原和抗体在凝胶中或特殊缓冲液中特异结合，形成抗原抗体复合物。通过测定凝胶中抗原抗体复合物沉淀环直径或特殊缓冲液中抗原抗体复合物浊度计算出免疫球蛋白的含量。,IgG：10-40mg/L； IgA：0-6mg/L；IgM：0-0.22mg/L； IgE：极少量。,【参考值】,【原理】,7,免疫球蛋白质分析,IgG增高：常见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、舞蹈病、神经系统肿瘤。IgA增高：常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤等。IgM增高：常见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤、多发性硬化症等。IgE增高：常见于脑寄生虫病等。,【临床意义】,二、一般检查,二、一般检查：显微镜检查,红细胞：无；白细胞：成人（0-8）106/L；儿童为（0-15）106/L，新生儿为（0-30）106/L。白细胞分类以单个核细胞为主，多为淋巴细胞和单核细胞。,细胞计数,细胞检查临床意义,红细胞增多 见于脑出血、蛛网膜下腔出血、脑脊髓外伤、肿瘤、脑膜炎等。白细胞增多 见于中枢神经系统感染、肿瘤、脑膜白血病等。病毒性脑(膜)炎、脊髓灰质炎等轻度增加（数十106/L），结核性脑膜炎中度增加（500106/L，以混合性细胞为主，中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时存在），化脓性脑膜炎显著增加（1000106/L，以中性粒细胞为主）。中性粒细胞增多：见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎破溃期、乙型脑炎早期、脑出血等。,淋巴细胞增多：见于各种病毒性脑膜炎、真菌性脑膜炎（新型隐球菌性脑膜炎白细胞数可达数百106/L，以淋巴细胞为主）结核性脑膜炎早期及恢复期等。嗜酸性粒细胞增多：见于脑部寄生虫感染(如脑囊虫病)、变态反应等。肿瘤细胞和白血病细胞 用细胞浓集法制备涂片，染色后查肿瘤细胞和白血病细胞，对中枢神经系统恶性肿瘤和脑膜白血病的诊断具有重要价值。,细胞检查临床意义,细菌检查,正常脑脊液无细菌。脑膜炎症时，可直接涂片染色查细菌，或将标本离心后，取沉淀物涂片，提高阳性检出率。常规情况下，需涂片三四张，用于革兰染色、抗酸染色和特殊染色(如果标本蛋白含量太低，可在沉淀物中加少量血清以利固定)。,三、一般检查：显微镜检查,肺炎链球菌,金黄色葡萄球菌,脑膜炎双球菌,结核分枝杆菌,寄生虫检查,正常脑脊液无病原体。,三、临床应用,1、正常脑脊液中主要为 细胞和 细胞2、脑脊液中中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞同时存在主要见于：（ ）A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎 D、脑寄生虫病E脑出血2.腰穿脑脊液颜色呈红色见于 A蛛网膜下腔出血 B脊髓肿瘤C化脓性脑膜炎E结核性脑膜炎D脊髓蛛网膜粘连,练习题,3、A、脑脊液中细胞数常达数千106/L，以中性粒细胞为主B、细胞数500106/L ，中性粒细胞、淋巴细胞及浆细胞同时存在C、细胞数轻度增加，多为数十106/L，以淋巴细胞为主D、细胞数可正常E、白细胞数达数百，以淋巴细胞为主,隐球菌病毒性脑炎、脑膜炎( C) 新型隐球菌性脑膜炎（ E） 结核性脑膜炎( B ) 化脓性脑膜炎( A)脑肿瘤( D ),练习题,1、如何鉴别穿刺损伤引起出血(新鲜出血)与蛛网膜下腔或脑出血(陈旧性出血)？2、如何根据实验室检验结果鉴别化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎?,自测题,病例分析,患者，男，25岁，3天前因劳累后饮酒出现发热、寒战、剧烈头痛。4h前开始出现意识障碍，自言自语，回答不出问题，并出现抽搐，抽搐时双眼上翻，凝视，口吐白沫，唇周发绀，双手握拳，四肢抽动，呼之不应，持续0.5h后停止。体征：T 39，P 106次/分R 25次/分，BP l5/kPa，昏迷，检查不合作，双瞳等大约0.6cm，眼底检查，视乳头有水肿，光反射迟钝，颈抵抗明显，双肺、心、腹、淋巴结、皮肤均无异常，膝跟腱反射亢进，右侧巴氏征阳性。,综上所述，考虑为颅内感染，腰穿检查脑脊液，穿刺成功，测得压力为255mmH2O，见白色浑浊脑脊液流出，收集6 ml分别装入3只无菌试管，每管2 ml，立即送检。实验室检查：脑脊液外观白色浑浊，RBC 10106/L，WBC：3600106/L，分叶核白细胞93，淋巴细胞7；蛋白质2.49g/L，葡萄糖3.1mmol/L，氯化物121.5mmol/L；脑脊液沉淀物涂片，查见革兰阴性球菌