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文档简介

统计学数据分析论文摘要范文统计学数据分析论文摘要写 代谢组学是近年发展快速的一门学科,目前在医学、植物学、微生物学、毒理学、药物研发等诸多领域中得到了广泛的应用1-5.代谢组学研究产生大量的数据,这些数据具有高维、小样本、高噪声等复杂特征.如何从复杂的代谢组学数据中提取出有价值的信息,筛选出潜在的生物标志物成为近年来代谢组学研究的热点和难点.据此,本文针对目前代谢组学数据分析中的常用统计学方法及其研究进展进行介绍. 阿尔兹海默病(Alzheimers disease,AD)是一种起病隐袭且进行性发展的神经系统退行性疾病,临床上以进行性记忆障碍、失语、失用、失认、视空间损害、执行功能障碍及人格和行为改变为特征.AD的发病机制复杂,至今未有定论,目前人们提出几种假说,如胆碱能神经异常学说、淀粉样蛋白级联学说、自由基与凋亡学说、tau蛋白异常修饰学说、线粒体代谢障碍学说、兴奋性氨基酸毒性学说及基因突变学说等.但以上任何一种学说均不能完全阐明AD的发病机制.经过大量深入的研究,人们发现氧化应激、细胞凋亡、线粒体功能障碍与AD的发病有密切关系. AD的主要病理特征是大脑皮质弥漫性萎缩,大量的神经元丧失,细胞内神经纤维缠结和细胞外淀粉样斑块沉积,淀粉样斑块的主要成分是-淀粉样蛋白(A),它是从淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)由-分泌酶和-分泌酶通过连续的蛋白水解裂解衍生的.研究表明,-淀粉样蛋白(-amyloid, A)在脑内的异常代谢、沉积是AD发病的核心环节,各种原因导致的A生成和清除的代谢失衡,引起A在脑组织中的异常积聚,进而触发了与AD病理生理、生化相关的级联反应.在A的持续刺激下,脑实质内小胶质细胞活化、活性氧(reative oxygen species, ROS)生成增多.众多有害自由基的产生及凋亡因子活化,激活细胞凋亡途径,并诱导氧化应激损伤细胞,如DNA、蛋白质和脂类.然而,A诱导的细胞凋亡具体的信号转导通路并没有被完全阐明.以上各个因素都直接或间接致使中枢神经系统受损.越来越多的研究证实,中枢神经细胞功能紊乱和凋亡可能由神经毒性所致,而这一神经毒性可能恰恰是由于A沉积导致,从而导致痴呆的发生.由此推论脑内氧化应激、细胞凋亡在AD的发病机制中起重要作用,抗氧化、抗凋亡已成为防治AD重要方法之一. 近年来大量研究已经证实AD发病与脑组织细胞凋亡有关.P53基因作为凋亡通路中的关键蛋白,与基因组的稳定性及细胞周期密切相关.正常情况下,P53基因在机体内环境的稳定和组织重建过程中发挥重要作用,过度表达和累积则会导致一系列的病理生理变化.免疫组织细胞学研究已证实AD大脑的老年斑内和神经纤维缠结中存在大量P53蛋白.那么,它在AD患者中枢神经组织细胞内的表达是否会随病程的延长而表达升高,增高的P53与AD患者的认知能力是否存在某种潜在联系,同时又是哪些因素促进其在患者体内过度表达,本文将就上述问题一一展开分析讨论. 高原红景天属于景天科红景天属(Rhodiola),广泛存在于我国高原地区,为我国传统藏药之一,对许多疾病都有独特功效.现代研究证实红景天具有较强的抗氧化损伤及清除氧化自由基的能力,可以促进细胞代谢及增强细胞活力.近几年来,红景天在提高脑细胞功能、增强记忆力方面的作用逐渐受到重视.我们课题组动物实验亦表明,红景天在痴呆相关疾病的治疗上可能具有潜在的应用前景.而红景天的主要有效单体成分红景天苷,能否对抗A产生的中枢神经细胞损伤,能否可以改善A所致的认知功能障碍以及通过哪种具体分子机制发挥作用至今尚无系统深入的研究. 接受A海马内注射的大鼠及接受A刺激的SH-SY5Y细胞,是相对经典的AD动物模型和细胞模型,由于上述两种模型在体内体外较好地模拟AD的病理过程,与其他实验模型相比,更为切实的反应了AD的发病进程.本实验研究通过建立A诱导的AD细胞及动物模型,从行为能力的改变、病理生理代谢产物的生成、生物酶学活性的变化、信号蛋白表达的激活及基因转录翻译调控等诸多层面,系统研究了红景天苷对A1-40所致AD细胞及动物模型内在信号转导机制及认知功能障碍的干预作用. 第一部分研究红景天苷对A1-40导致的AD大鼠模型认知功能障碍的干预作用 目的:体内实验部分,建立A1-40诱导的AD大鼠模型,检测红景天苷对A1-40所致AD大鼠认知功能障碍的干预作用. 方法:大鼠海马内注射A1-40制备AD模型,术后分别灌胃治疗,每日1次给予已定剂量、浓度的红景天苷(50mg,kg-1,d-1),连续21天.自第17天开始,采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,连续5天.数据以x,s表示,用SPSS16.0统计分析软件进行数据处理并分析,组间资料应用重复测量方差分析,计数资料应用非参数秩和检验,以P,0.05判定为有显著性差异. 结果:监测各组大鼠在Morris水迷宫测试实验中寻找到平台并爬上平台的寻台潜伏期.在测试的5天内所有大鼠的寻台潜伏期都表现为缩短趋势.AD模型组与假手术组相比,AD模型组寻台潜伏期明显延长(P0.05),结果提示给予A海马内注射后导致学习及记忆功能受损.红景天苷(50mg,kg-1,d-1)治疗组寻台潜伏期均值较模型组明显下降,与AD模型组相比明显缩短(P0.05).自第五天的定位航行轨迹显示:假手术组大鼠游泳线路清晰、目标明确,能够在较短时间及距离内找到平台.海马内给予A注射的大鼠寻找目标明显减弱,游泳路线无序、繁乱、盲目,需要经历较长距离及时间才能找到平台.而红景天苷治疗组大鼠找到平台前的游泳距离缩短,寻找目标的能力得以改善.监测撤去平台后各组大鼠在原平台象限活动时间与总时间比值及跨平台次数,与假手术组相比,AD模型组大鼠在原平台所处象限搜索时间所占比值明显降低(P0.05),搜索能力测试中跨过原平台所在位置的次数也显著减少(P0.05),红景天苷治疗组(50mg,kg-1,d-1)在原平台所在象限搜索时间所占比值及跨平台次数均较模型组显著升高和增加(P0.05),但未恢复至正常水平. 结论:在接受A1-40双侧海马内注射的大鼠,其记忆学习能力显著下降,给予已定量红景天苷治疗的AD大鼠,学习记忆能力的下降逆转.说明课题组已成功建立A1-40双侧海马内注射所诱导的AD实验大鼠模型.提示红景天苷对A1-40诱导的AD实验模型大鼠认知功能障碍具有显著改善作用. 第二部分红景天苷对A1-40所致AD模型大鼠氧化应激及凋亡的影响 目的:氧化应激反应是不同刺激因素所诱发神经细胞损伤及多种中枢神经功能退行性紊乱疾病的共同通路.A1-40能通过不同途径激发脑组织细胞内的氧化应激反应,进而产生大量ROS.本部分实验研究通过检测红景天苷对A1-40所导致AD实验模型大鼠海马组织细胞内总ROS生成、血清及海马组织细胞内SOD活性、血清及海马组织细胞内MDA含量来深入研究探讨红景天苷对A1-40所致AD模型大鼠脑内氧化应激损伤的影响. 方法:A1-40海马内注射制备AD实验大鼠模型,术后给予已定量红景天苷(50mg,kg-1,d-1)灌胃治疗,每日1次共21天.建立模型成功后,采用DCFH-DA作为荧光检测探针,采用流式细胞技术测定AD实验模型大鼠海马组织细胞内总ROS生成,氧化酶法测定AD大鼠模型血清及海马组织细胞内SOD活性,采用硫代巴比妥酸法检测大鼠血清及海马组织细胞内MDA的含量.数据用x,s表示,用SPSS16.0统计分析软件进行统计学数据分析,用方差分析及LSD进行组间比较和两组间比较,以P,0.05为有显著性差异. 结果:(1)本部分实验研究采用流式细胞技术(FCM)检测各组大鼠海马组织细胞的ROS含量.与假手术组相比,AD模型组大鼠海马组织细胞内ROS含量明显增加(P0.05).给予红景天苷(50mg,kg-1,d-1)治疗21天后,AD模型大鼠海马组织细胞内总ROS含量受到显著抑制(P0.05),虽然未回到正常水平,但与假手术组相比(P0.05).(2)按实验要求测定AD模型大鼠血清SOD活性.与假手术组相比,AD模型组大鼠血清内SOD活性显著降低(P0.05),给予红景天苷(50mg,kg-1,d-1)治疗21天后,大鼠血清SOD活性较AD模型组显著升高(P0.05),虽然未回到正常水平,但与假手术组相比(P0.05),海马组织细胞内SOD活性检测结果与血清学检测结果趋势相同.(3)与假手术组相比,AD模型组大鼠血清MDA含量显著升高(P0.05),给予红景天苷(50mg,kg-1,d-1)治疗21天后,血清MDA含量较AD模型组显著降低(P0.05),虽然未回到正常水平,但与假手术组相比(P0.05),海马组织细胞内MDA含量检测结果与血清学检测结果趋势相同.(4)实验研究通过检测AD实验模型大鼠海马组织细胞的凋亡情况.与假手术组相比,AD模型组大鼠海马组织细胞凋亡率显著升高(P0.05),给予红景天苷(50mg,kg-1,d-1)治疗21天后,实验结果证实经药物干预治疗,AD模型大鼠海马组织细胞凋亡较AD模型组显著降低(P0.05),但与假手术组相比(P0.05),仍未回到正常水平, 结论:红景天苷可能通过有效抑制A1-40所导致的AD大鼠模型海马组织细胞内的总ROS生成、同时提高血清及海马组织细胞内SOD活性并减少血清及海马组织细胞内MDA含量,从局部和整体双向验证红景天苷可以提高AD模型大鼠的抗氧化应激能力并减轻神经细胞因氧化应激所造成的损伤. 第三部分红景天苷对A1-40所致AD模型大鼠海马NADPH氧化酶-ROS通路的影响 目的:NADPH氧化酶是组织细胞内ROS产物的主要.本部分实验通过观察NADPH氧化酶家族成员亚基的的表达与激活,对红景天苷是否可以抑制AD模型大鼠海马组织细胞内ROS产生的上游通路的潜在机制进行探讨. 方法:采用A1-40海马内注射制备AD大鼠模型,术后给予已定量的红景天苷(50mg,kg-1,d-1)灌胃治疗,每日1次共21天.建立模型成功后,采用RT-PCR技术和Western blot技术检测大鼠海马组织中gp91phox及其他亚基在mRNA和蛋白水平的表达.数据用x,s表示,用SPSS16.0统计分析软件进行统计学数据分析,采用方差分析及LSD进行组间比较及两组间比较,以P,0.05为有统计学差异. 结果:(1) Western Blot结果显示,A1-40可导致AD模型大鼠海马组织细胞内p22phox、p67phox、gp9lphox及p47phox蛋白表达明显升高.AD模型组上述各蛋白的含量分别是假手术组的2.16、2.57、3.02及2.71倍(P0.05).而给予已定量红景天苷干预治疗后,大鼠海马组织p22phox、p67phox、gp9lphox及p47phox蛋白表达较AD模型组分别降低了24.1%、26.3%、31.1%及34.2%(P0.05).(2) RT-PCR检测.研究结果显示,与假手术组相比,AD模型组大鼠海马组织细胞内p22phox、p67phox、gp9lphox及p47phoxmRNA表达显著升高.AD模型组较假手术组mRNA水平分别升高了84.1%、96.3%、101.1%及104.2%(P0.05).而给予已定量红景天苷干预治疗后,能够显著抑制A1-40的这种诱导效应.红景天苷干预组较AD模型组分别降低了34.3%、36.1%、33.4%及30.1%(P0.01). 结论:红景天苷可抑制NADPH氧化酶家族成员的亚基进而抑制ROS的产生,此过程可能是通过抑制其家族成员亚基的表达和抑制其亚基激活来实现,或者是两个作用相互协同作用来抑制NADPH氧化酶活化.红景天苷通过对NADPH氧化酶-ROS通路的有效抑制,明显减轻了A1-40所诱导的AD实验模型大鼠脑组织细胞内氧化应激反应. 第四部分红景天苷对A1-40所致AD模型大鼠海马ROS-P53线粒体凋亡通路的影响 目的:为了进一步明确ROS导致细胞凋亡率增加的具体机制,我们检测了ROS生成后可能导致细胞凋亡的相关蛋白P53的表达.同时验证在P53基因基础上红景天苷对Bcl-2、Bax及线粒体凋亡通路的影响 方法:采用A1-40海马内注射制备AD大鼠模型,术后给予已定量的红景天苷(50mg,kg-1,d-1)灌胃治疗,每日1次共21天.建立模型成功后,采用Western-blot检测AD模型大鼠海马组织细胞中细胞凋亡的相关蛋白P53的表达.同时验证在P53基因基础上红景天苷对Bcl-2、Bax及线粒体凋亡通路蛋白的表达,数据用x,s表示,用SPSS16.0统计分析软件进行统计学数据分析,采用方差分析及LSD进行组间比较及两组间比较,以P,0.05为有统计学差异. 结果:(1) Western Blot结果显示,A1-40可致使AD模型大鼠海马组织细胞核内P53表达,并使其表达显著升高.AD模型组最高细胞核内P53蛋白的含量可达假手术组的5-6倍(P0.05).而给予已定量红景天苷干预治疗后,AD模型大鼠海马组织细胞核内P53蛋白表达与AD模型组相比降低近50%(P0.05).(2)与假手术组相比,AD实验模型组大鼠海马组织细胞Bax表达显著升高;而AD实验模型组大鼠海马组织细胞Bcl-2的表达明显下调.AD实验模型组较假手术组Bax升高151%(P0.05);AD实验模型组较假手术组Bcl-2下调近70%(P0.05).而给予已定量红景天苷干预治疗后,能够显著抑制A1-40的上述诱导效应.Bax及Bcl-2在红景天苷干预组较AD模型组分别降低和升高了40%及55%(P0.05).(3)与假手术组相比,AD实验模型组大鼠海马组织细胞内Caspase-9及Caspase-3表达显著升高;AD实验模型组较假手术组Caspase-9及Caspase-3升高151%及124%(P0.05),在给予已定量红景天苷干预治疗后,能够显著抑制A1-40的上述诱导效应.Caspase-9及Caspase-3在红景天苷干预组较AD模型组分别降低了40%及55%(P0.05). 结论:红景天苷抑制NADPH氧化酶产生ROS进而抑制P53入核活化从而抑制caspase-9和caspase-3表达,说明红景天苷通过对NADPH氧化酶-ROS-P53-线粒体凋亡途径抑制,减轻了A1-40诱导的AD脑组织细胞内氧化应激及凋亡的发生. 第五部分红景天苷通过PI3K/*t/Nrf-2/HO-1信号通路减少P53在细胞核内的表达抑制细胞凋亡 目的:探讨红景天苷保护神经细胞防止-淀粉样蛋白损伤的机制.从而为海马内注射-淀粉样蛋白诱导的AD模型提供了有力的证据.因为接受-淀粉样蛋白刺激的SH-SY5Y细胞和海马内注射-淀粉样蛋白大鼠是经典的AD细胞及动物模型,已被广泛用于研究.所以我们研究发现,红景天苷在体外实验中能有效防止SH-SY5Y细胞由于淀粉样蛋白所诱导的细胞凋亡,从而保护神经细胞免受氧化损伤,其机制可能是通过上调HO-1的表达,降低神经细胞P53的核表达来实现. 来逆转-淀粉样蛋白诱导的神经细胞P53的核表达实现. 结果:(1) A1-40可显著降低细胞活力而红景天苷可逆转此现象,(2)红景天苷提高细胞存活率这一现象可被ZnPPIX所抑制.由此表明红景天苷对HO-1的诱导性表达和增加细胞生存能力起着关键性作用,(3)红景天苷通过Nrf-2的激活诱导HO-1表达,同时红景天苷抑制氧化应激诱导的细胞凋亡,而P53活化剂-RITA可以诱导细胞凋亡. 结论:P53蛋白直接诱导细胞凋亡,从而加重认知功能障碍.因此,P53可视为氧化应激在AD的早 背景:1978年7月25日,世界首例“试管婴儿”Louis Brown在英国剑桥出生.Louis Brown的诞生给不孕不育夫妇带来了希望.从此,体外受精胚胎移植(invitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技术在世界范围内开展起来.随着助孕技术(assisted reproductive technologies,ARTs)在方法和技术上的不断创新和改进,又开展了冻融胚胎移植技术(frozen-thawed embryotransfer,FET)、*IVF-ET、用于男性不育的胞浆内单精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)、种植前遗传学诊断(preimplantation geics diagnose,PGD)等技术.通过这些技术分娩的婴儿逐年增多,目前全世界已超过几百万的孩子通过辅助生育技术问世.辅助生育技术的发展使不孕不育症患者有了自己的后代,但是其产科并发症、新生儿结局、后代的体格、智能、精神心理等的发育颇受关注.为此从事本专业的临床工作者从不同的角度进行了研究,但是样本数均较小.国内尚未见大样本的关于体外受精的母亲妊娠期并发症、新生儿结局、子代学龄前期健康状况的系统的随访研究报道.本文为弥补这一空白,进行相关资料的收集研究.希望总结的结果能为今后体外受精技术的实施提供参考意见. 结果: 1、基本信息:xx年xx年我院共启动体外受精周期852例,其中取消胚胎移植周期122例(14.32%),启动周期的分娩者210例(24.65%).共随访到138例成功分娩者(65.71%).其中单胎92例(66.67%),双胎45例(32.61%),三胎1例(0.72%).其双胎率和三胎率均高于自然妊娠Hellin多胎妊娠计算公式(多胎发生率为1:80(n-1)的结果(双胎率1.25%,三胎率0.0156%).共有子代185名.其中男孩97名(52.43%),女孩86名(46.49%),死胎2名(1.08%),男女比例为112.79:100,低于我国第五次人口普查数据(2000年)(新生儿男女比例116.9:100).女方妊娠期携带乙肝表面抗原者(HBsAg)比例占7.97%(符合流行病学数据:0.817.8%),女方妊娠期合并梅毒感染比例1.45%.ART指征中单纯女性因素者74例(53.62%),单纯男性因素者30例(21.74%),双方因素者31例(22.46%),不明原因不孕者3例(2.17%).受精方式中IVF 77例(55.80%),ICSI 61例(44.20%).IVF和ICS工方式受精之间子代死胎死婴率、子代早产率、子代出生体重、子代畸形率之间的差异均无统计学意义,但是数值上ICSI方式受精的子代死胎死婴率、子代早产率、子代先天性畸形率均高于IVF方式受精,ICSI方式受精的子代出生体重低于IVF方式受精.*中丈夫射出*122例(88.41%),睾丸穿刺(TESA)14例(10.14%),供精2例(1.45%). 2、母亲孕期并发症:OHSS 14例(10.14%),贫血13例(9.42%)(低于流行病学数据:50%),妊娠期糖尿病1例(0.72%)(低于流行病学数据:15%),妊娠期高血压疾病15例(10.87%)(高于流行病学数据:9.410.4%),肝损7例(5.07%),ICP 9例(6.52%)(符合流行病学数据:0.812.0%),前置胎盘1例(0.72%)(符合流行病学数据:0.241.57%),胎盘早剥0例(0%)(低于流行病学数据:0.462.1%),胎膜早破13例(9.42%)(低于流行病学数据:10%),羊水过少3例(2.17%)(符合流行病学数掘:0.44.0%),羊水过多2例(1.45%)(高于流行病学数据:0.51.0%),耻骨联合分离3例(2.17%),脐带绕颈19名(10.27%)(低于流行病学数据:20%).其中不同胎数之间妊娠期高血压疾病发病率的差异有统计学意义(P等于0.020),多胎的妊娠期高血压疾病发病率要高于单胎(危险因素(OR)3.49,95%可信区间(CI)1.1610.50).母亲年龄是否35岁与妊娠期高血压疾病发病率的差异无统计学意义.不同胎数之间羊水过多发病率的差异无统计学意义.母亲年龄是否35岁与羊水过多发病率的差异无统计学意义. 3、分娩及产后情况:分娩方式中剖宫产124例(89.85%)(高于流行病学数据:35.3%),平产12例(8.70%),产钳2例(1.45%).足月分娩104例(75.36%),早产34例(24.64%)(高于流行病学数据:515%),孕周中位数38.00(10%90%区间:34.9039.00)周.产后出血2例(1.45%)(低于流行病学数据:23%),体外受精术后恢复自然怀孕功能者5例(3.62%).其中不同胎数之间剖宫产率的差异无统计学意义.不同胎数之间早产率的差异有统计学意义(P等于0.000),多胎的早产率要高于单胎(OR 13.65,95%CI 5.39-34.58). 4、子代出生情况:共随访到子代185名,其中活胎183名(98.92%),死胎2名(1.08%).巨大儿9名(4.92%)(低于流行病学数据:7%),正常出生体重儿127名(69.40%),低出生体重儿41名(22.40%),极低出生体重儿6名(3.28%)(高于流行病学数据:1.11.4%).单胎与多胎之间低(和极低)出生体重儿发生率的差异有统计学意义(P等于0.000),多胎的低(和极低)出生体重儿发生率要高于单胎(OR 14.91,95%CI 5.53-40.17).平均出生体重2867.76,676.31克(低于流行病学数据:3.3,0.4千克).出生身高中位数49.00(45.0050.00)厘米(低于流行病学数据:50厘米).1分钟APGAR评分正常者(810分)176名(95.14%),轻度窒息者(47分)5名(2.70%),重度窒息者(03分)4名(2.16%),总窒息率为4.86%(符合流行病学数据:310%).185名子代中死胎共2名(1.08%),死婴共2名(1.08%),剩余活婴共有181名(97.84%).新生儿期患有湿肺9名(4.92%),新生儿呼吸窘迫综合症(NRDS)5名(2.73%)(低于流行病学数据:5%),羊水咽下综合症7名(3.83%),先天性缺血缺氧性脑病1名(0.55%),低血糖3名(1.64%),低钙血症2名(1.09%),黄疸4名(2.19%)(符合流行病学数据:0.915%),感染性疾病1名(0.55%)(符合流行病学数据:0.11%).先天畸形发生率为9.84%(高于流行病学数据:1.307%).IVF和ICSI方式受精之间子代畸形率之间的差异无统计学意义.早产与足月产之间子代畸形率的差异无统计学意义.但是数值上ICSI方式受精的子代先天性畸形率高于IVF方式受精,早产儿先天性畸形率高于足月儿.活婴中母乳喂养者74名(40.88%)(低于世界卫生组织建议的生后6个月内100%母乳喂养的标准),人工喂养者65名(35.91%),混合喂养者42名(23.20%). 5、目前子代身心状况:xxxx年体外受精的子代目前年龄在4.5-6.5周岁之间.根据中国城区018周岁身高体重发育曲线(1995),身高处于第3百分位第97百分位之间者164名(90.61%),超过第97百分位者11名(6.08%),低于第3百分位者6名(3.31%),身高中位数113.00(105.00120.00)厘米(低于同期标准身高:113.5厘米).体重处于第3百分位第97百分位之间者161名(88.95%),超过第97百分位者17名(9.39%),低于第3百分位者3名(1.66%),体重中位数20.00(17.0025.40)千克(超过同期标准体重:19千克).独走月龄中位数12.00(12.0015.00)月(符合平均会走路月龄:12个月).早产与足月产之间子代学龄前期身高、体重的差异无统计学意义,但是数值上足月儿学龄前期的身高、体重均超过早产儿学龄前期的身高、体重.月龄校正前,早产儿独走月龄要晚于足月儿,差异有统计学意义(P等于0.032).月龄校正后,早产儿的校正独走月龄要早于足月儿,差异有统计学意义(P等于0.000).患STD者1名(0.55%)(超过我国流行病学数据0.277%).经常患有感冒发热者8名(4.42%),患有过敏哮喘者5名(2.76%)(超过我国流行病学数据:1.97%).早产与足月产之间子代患病率的差异无统计学意义.幼儿园上学率为100%.目前就读幼儿园大班者73名(40.33%),中班者108名(59.67%),小班者0名(0%).其中141名参加兴趣班(77.90%),40名未参加兴趣班(22.10%). 结论: 1.xxxx年我院体外受精学龄前期子代的多胎比例高于我国流行病学数据. 2.IVF和ICSI方式受精之间的子代结局无统计学差异. 3.体外受精母亲妊娠期并发症的总发病率无显著增加,但其中妊娠期高血压疾病和羊水过多的发生率高于流行病学资料.其中妊娠期高血压疾病发病率升高与多胎发生率较高有相关性(OR 3.49,95%CI 1.16-10.50). 4.体外受精分娩的剖宫产率和早产率均高于我国流行病学数据.其中早产率升高与多胎率较高有相关性(OR 13.65,95%CI 5.39-34.58). 5.体外受精出生的极低出生体重儿比例高于流行病学数据.平均出生体重和平均出生身高均低于流行病学数据.其中低(和极低)出生体重儿发生率升高与多胎率较高有相关性(OR 14.91,95%CI 5.53-40.17). 6.体外受精不增加子代新生儿期患病率,但是子代畸形率高于我国流行病学数据.子代患STD和其他疾病率高于流行病学数据.畸形率高与早产率较高无统计学关系,也与IVF方式受精还是ICSI方式受精无统计学关系.畸形率升高的原因需要日后扩大样本量,进一步随访调查. 7.目前体外受精子代正处在学龄前期(年龄在4.5-6.5周岁之间),其身高低于全国一般水平,体重高于全国一般水平.独走月龄符合全国一般水平.早产子代和足月产子代学龄前期的身高、体重无统计学差异.月龄校正前,早产儿独走月龄要晚于足月儿.月龄校正后,早产儿的校正独走月龄要早于足月儿.幼儿园上学率为100%.子代参加兴趣班比例为77.90%. 椎管内麻醉(neuraxial anesthesia)包括硬膜外麻醉(epidural anesthesia,EA)、腰硬联合麻醉(bined spinal-epidural anesthesia, CSEA)及蛛网膜下腔麻醉(spinal anesthesia, SA)简称腰麻.由于具有镇痛效果确切、肌肉松弛良好、麻醉药品使用较少、术中病人意识清醒及术后良好的镇痛效果等优点,近百年来广泛用于临床麻醉. 虽然椎管内麻醉已在临床运用了很长时间,但它并非没有并发症,且各文献报道的神经损伤的发生率数值差别较大1-4,因此其确切的发病率很难确定.在临床上,其发病率可能被低估了,导致麻醉医师忽视了神经系统并发症风险.实际发生的神经损伤并发症可能比预期的要多,因此,椎管内麻醉神经系统并发症(尤其是神经损伤)仍然是临床麻醉医生关注的问题.而且随着麻醉材料、技术及设备的不断完善,重新评估严重并发症的发病率和特点是非常有必要的.椎管内麻醉相关的神经并发症(主要是神经损伤)的流行病学数据是必不可少的,是测量和评估椎管内麻醉的安全性和质量的重要指标,国外虽然有不少报道1-,但目前国内在椎管内麻醉神经损伤方面尚缺大样本、多中心的统计资料和数据.因此,有必要建立椎管内麻醉相关神经并发症数据库,以便进行调查统计分析. 为此,本研究对xx年1月1日至xx年12月31日五年间广西壮族自治区各级医院椎管内麻醉后出现神经系统并发症进行一项回顾性调查研究分析,旨在了解广西壮族自治区各级医院椎管内麻醉使用现状及对椎管内麻醉引起的神经损伤发病率及其严重程度、后遗症持续时间,以及椎管内麻醉引起的神经损伤相关因素进行了流行病学调查分析,以评估椎管内麻醉神经损伤相关的风险因素,并对各类神经损伤的康复时间、显效时间及其神经损伤后遗症情况进行分析.我们探讨了椎管内麻醉神经损伤的发病率、愈后情况和风险因素,并对椎管内麻醉神经损伤的相关因素的流行病学数据进行分析,为椎管内麻醉临床使用及椎管内麻醉后神经损伤流行病学数据研究积累一些临床实践经验,对临床麻醉医生有一定参考价值. 第一部分广西64家医院椎管内麻醉使用情况及椎管内麻醉后神经损伤的发病率调查分析 目的 本研究目的是了解广西壮族自治区64家医院椎管内麻醉使用现状,并对椎管内麻醉引起的神经损伤发病率及治愈率进行初步分析.为椎管内麻醉临床使用及椎管内麻醉后神经损伤流行病学数据积累一些临床实践经验. 方法 经广西壮族自治区麻醉质量控制中心批准后,对xx年1月1日至xx年12月31日五年间广西壮族自治区各级医院椎管内麻醉后出现神经系统并发症进行一项回顾性调查研究.调查方式为问卷调查.自行设计椎管内麻醉神经并发症调查表.xx年10月,以广西壮族自治区麻醉质量控制中心的名义通过信函发放和手机短信相结合方式通知广西壮族自治区各级医院的麻醉科主任,要求各级医院麻醉科主任登陆广西麻醉网下载椎管内麻醉神经并发症调查表格并认真填写.表格1调查内容包括:广西壮族自治区各级医院xx-xx年五年间椎管内麻醉的病例数、椎管内麻醉(硬膜外麻醉、腰硬联合麻醉及单纯腰麻)神经并发症的病例数及医院级别.出现并发症的患者填写神经并发症表格2,包括患者的年龄、性别、手术日期、术前诊断、既往病史、麻醉方式、麻醉时间和手术时间、手术方式和手术体位、穿刺间隙,穿刺过程中有无神经刺激征、术后有无镇痛及镇痛药物的使用情况、椎管内麻醉药物使用情况、神经损伤类型、确诊时间及开始治疗时间、治疗措施及其愈后状况、治疗的显效时间及康复时间、神经系统后遗症状等.调查表填写内容不完善的通过电话随访或E-mail追加完善调查报告.根据人口统计学和临床特征采用SPSS13.0统计软件包中的描述性分析和x2检验及Fisher确切概率检验法对数据进行统计学分析.P,0.05为差异有统计学意义. 结果 xxxx年五年间27家*甲等医院实施硬膜外麻醉96897例,占36.6%;腰硬联合麻醉150236例,占56.8%;单纯腰麻17573例,占6.6%;共计264706例.37家非*甲等医院实施硬膜外麻醉106509例,占44.7%;腰硬联合麻醉128665例,占54.1%;单纯腰麻2837例,占1.2%.共计238011例,合计502717例.无论是*甲等医院还是非*甲等医院,都是以腰硬联合麻醉最为常用,而且是呈逐年上升的趋势.其次为硬膜外麻醉,而单纯腰麻用的最少,在非*甲等医院尤为明显.205例患者出现椎管内麻醉神经损伤,椎管内麻醉神经损伤的总发生率为4.08/万,其中硬膜外麻醉发生神经损伤41例,发生率为2.01/万,腰硬联合麻醉发生神经损伤154例,发生率为5.52/万,单纯腰麻发生神经损伤10例,发生率为4.9/万,硬膜外麻醉神经损伤的发生率最低,而腰硬联合麻醉神经损伤的发生率最高(X2等于35.821,P等于0.000),差异有统计学意义(P,0.05);对三种麻醉方式神经损伤发生率进行了两两比较发现,硬膜外麻醉神经损伤发生率与腰硬联合麻醉(X2等于35.774,P等于0.000)及单纯腰麻(X2等于6.772,P等于0.009)相比较,差异均有统计学意义(P,0.05).其中*甲等医院椎管内麻醉发生神经损伤有134例,占5.06/万,非*甲等医院椎管内麻醉发生神经损伤有71例,占2.98/万,*甲等医院椎管内麻醉神经损伤发生率较非*甲等医院高(X2等于13.291,P等于0.000),差异有统计学意义(P,0.05).但两种等级医院发生神经损伤的OR值等于0.589(95%CI0.4420.786).205例神经损伤病例中,短暂神经综合征(TNS)为最多,有171例,发生率为3.4/万;其次是脊神经根损伤(RD)有25例,发生率为0.5/万,而马尾综合征(CES)及截瘫(paraplegia)各4例,发生率均为0.08/万;硬膜外血肿(EH)1例,发生率为0.02/万.硬膜外麻醉发生TNS为30例,发生率为1.47/万;腰硬联合麻醉发生TNS为132例,发生率为4.7/万;单纯腰麻发生TNS为9例,发生率为4.41/万.硬膜外麻醉TNS的发生率最低,而腰硬联合麻醉TNS的发生率最高,X2等于37.352,P等于0.000,差异有统计学意义(P,0.05).神经损伤的总治愈率为89.8%,短暂神经综合征(TNS)病人治愈率为100%,而脊神经根损伤(RD)患者只有48%病人完全康复,马尾综合征(CES)只有1例病人(25%)完全康复.硬膜外麻醉、腰硬联合麻醉、单纯腰麻神经损伤病人完全治愈率分别为82.9%、91.6%、90.0%,差异无统计学意义(P,0.05).永久性神经损伤的发生率为0.42/万,其中硬膜外麻醉永久性神经损伤发生率为0.34/万,腰硬联合麻醉为0.47/万,单纯腰麻为0.49/万,差异无统计学意义(P,0.05). 结论 1.无论是*甲等医院还是非*甲等医院,都以腰硬联合麻醉最为常用,且呈逐年上升的趋势,其次为硬膜外麻醉,单纯腰麻使用得最少.*甲等医院椎管内麻醉神经损伤发生率较非*甲等医院高,但*甲等医院椎管内麻醉发生神经损伤的风险并不比非*甲等医院的高. 2.与椎管内麻醉相关神经损伤的发生率是很低的(4.08/万),硬膜外麻醉的神经损伤发生率最低(P,0.05). 3.神经损伤类型以短暂神经综合征(TNS)为最多见,发生率为3.4/万.硬膜外麻醉TNS的发生率最低(1.47/万),而腰硬联合麻醉TNS的发生率最高(4.7/万),差异有统计学意义(P,0.05).大多数的神经损伤是可以完全治愈的,神经损伤的总治愈率为89.8%.TNS病人的治愈率为100%(P,0.05),三种麻醉方式神经损伤的治愈率也无统计学差异. 第二部分广西64家医院椎管内麻醉神经损伤相关因素调查分析 目的 本研究的目的是对广西壮族自治区64家医院椎管内麻醉神经损伤严重程度、自限能力及后遗症持续时间以及椎管内麻醉引起的神经损伤相关因素进行调查分析,并对各类神经损伤的康复时间、显效时间及其神经损伤后遗症情况进行分析,以评估麻醉相关神经并发症的风险因素.为椎管内麻醉后神经损伤流行病学研究积累一些临床实践经验,对临床麻醉医生有一定参考价值. 方法 经广西壮族自治区麻醉质量控制中心批准后,对xx年1月1日至xx年12月31日五年间广西壮族自治区各级医院椎管内麻醉后出现神经系统并发症进行一项回顾性调查研究.调查方式为问卷式调查.自行设计椎管内麻醉神经并发症调查表.xx年10月,以广西壮族自治区麻醉质量控制中心的名义通过信函发放和手机短信相结合方式通知广西壮族自治区各级医院的麻醉科主任,要求各级医院麻醉科主任登陆广西麻醉网下载椎管内麻醉神经并发症调查表并认真填写.表格1调查内容包括:广西壮族自治区各级医院xxxx年五年间椎管内麻醉的病例数、椎管内麻醉(硬膜外麻醉、腰硬联合麻醉及单纯腰麻)神经并发症的例数及医院级别.出现并发症的患者填写神经并发症表格2,包括患者的年龄、性别、手术日期、术前诊断、既往病史、麻醉方式、麻醉时间和手术时间、手术方式和术中体位、穿刺间隙,穿刺过程中有无神经刺激征、术后有无镇痛及镇痛药物的使用情况、椎管内麻醉药物使用情况、神经损伤类型、确诊时间及开始治疗时间、治疗措施及其愈后状况、治疗的显效时间及康复时间、神经系统后遗症状等.调查表填写内容不完善的通过电话随访或E-mail追加完善调查报告.其中不需要药物治疗的神经损伤病例有142例,归为自限组(I组),而需要药物治疗的神经损伤病例有63例,归为治疗组(II组).治疗组中63例患者中对药物治疗有效的、完全治愈的有42例,归为完全治愈组;对药物治疗效果不佳的、未完全治愈的有21例,归为未完全治愈组.其中定义神经损伤引起的伤残或残障持续3个月或3个月以上的为严重性神经损伤5,则未完全治愈病人又分为轻度后遗症(Mild sequelae, MS)和严重后遗症(severe sequelae, SS).定义神经损伤症状持续12个月或12个月以上的为永久性神经损伤60神经损伤分为三类:短暂神经综合征(Transient neurological syndrome)等于TNS,脊神经根损伤(Radicular damage)等于RD,截瘫(包括马尾综合征和硬膜外血肿)7等于Paraplegia.采用SPSS13.0统计软件包对数据进行分析,计数资料比较采用x2检验及Fisher的精确检验法,多因素分析采用Logistic回归分析,变量包括麻醉方式、穿刺间隙、性别、年龄、手术方式、手术体位、穿刺中有无不适、腰麻药物、硬膜外药物、镇痛、镇痛药物、神经损伤类型.康复时间和显效时间的相关因素分析采用生存分析中的Kaplan-Meier和Cox回归分析方法.P,0.05为差异有统计学意义. 结果 Logistic回归分析显示,麻醉方式和神经损伤类型与神经损伤病人自限率有相关性(P,0.05).205例神经损伤的病人不需要药物处理的病例为142例,自限率为69.3%,其中单纯腰麻的自限率最高,自限率为90%,而硬膜外麻醉的自限率最低,仅为41.5%,差异有统计学意义(P,0.05).无需药物治疗以短暂神经综合征(TNS)病人为最多,142例,自限率为83.0%,脊神经根损伤(RD)和截瘫类(Paraplegia)病人的自限率均为0.0%,X2等于91.872,P等于0.000.Logistic回归分析显示,神经损伤类型、穿刺间隙与神经损伤病人愈后及严重后遗症发生率有相关性(P,0.05);L3-4穿刺点病人的康复率显著的高于其他两个穿刺点,严重后遗症发生率显著的低于其他两个穿刺(P,0.05).L3-4穿刺间隙病人的康复率为95.3%,为最高,其神经损伤病人严重后遗症发生率仅为1.9%,为最低;而穿刺间隙为L1-2及以上病人的康复率仅为70%,为最低,神经损伤病人严重后遗症发生率却高达20%,为最高,差异有统计学意义(P,0.05).短暂神经综合征(TNS)、脊神经根损伤(RD)、截瘫类(Paraplegia)病人完全康复率分别为100%、48%、11.1%,X2等于127.5,P等于0.000.神经损伤严重后遗症总发生率为0.26/万,短暂神经综合征(TNS)无神经后遗症出现,脊神经根损伤严重后遗症发生率为20%.截瘫类病人严重后遗症发生率高达88.9%,X2等于105.2,P等于0.000.Cox回归分析显示麻醉方式、穿刺间隙和神经损伤类型与神经损伤病人康复时间有很大的相关性(P,0.05);腰硬联合麻醉后神经损伤病人的所需康复时间最长,平均估计值和中位数估计值分别为71.8天和3天;硬膜外麻醉神经损伤病人所需康复时间平均估计值和中位数估计值分别为58.3天和4天;而单纯腰麻后神经损伤病人所需康复时间最短,平均估计值和中位数估计值分别为15.2天和1天,X2等于10.602,P等于0.005.短暂神经综合征(TNS)的康复时间最短,平均估计值和中位数估计值分别为2.9天和2天;脊神经根损伤(RD)平均估计值和中位数估计值分别为78.7天和75天;而截瘫类病人的康复时间最长,平均估计值和中位数估计值分别为255.6天和180天,X2等于119.034,P等于0.000.穿刺间隙L2-3、L3-4及L1-2神经损伤病人康复时间的平均估计值分别为60.9天、29.2天和41.3天,中位数估计值分别为3天、2天和2天,X2等于9.411,P等于0.009.短暂神经综合征(TNS)的治疗的显效时间最短,显效时间的平均估计值和中位数估计值分别为3.9天和2天;脊神经根损伤(RD)显效时间的平均估计值和中位数估计值分别为8.8天和5天;而截瘫类神经损伤病人的显效时间最长,显效时间的平均估计值和中位数估计值分别为67.6天和40天,X2等于30.293,P等于0.000. 结论 1.单纯腰麻的自限率最高,而硬膜外麻醉的自限率最低,腰硬联合麻醉神经损伤的自限率与单纯腰麻相似.短暂性神经综合征(TNS)病人的自限率最高,而脊神经根损伤和截瘫类病人的自限率为零,均需要药物干预. 2.短暂性神经综合征(TNS)康复率为100%,无神经后遗症出现;其次为脊神经根损伤病人,康复率为48%,严重后遗症发生率为20%;而截瘫类(包括马尾综合征和硬膜外血肿)的康复率最低,仅为11.1%,严重后遗症发生率高达88.9%. 3.L3-4穿刺间隙病人的康复率为95.3%,其神经损伤病人严重后遗症发生率仅为1.9%;而穿刺间隙为L1-2及以上的病人的康复率仅为70%,神经损伤病人严重后遗症发生率却高达20%. 4.腰硬联合麻醉后神经损伤病人的所需康复时间最长,其次为硬膜外麻醉后神经

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