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文档简介

一、基因工程别名、操作对象、操作水平、操作环境、实质或原理各是什么,二、限制酶的作用,三、DNA连接酶的作用,四、运输基因的载体必须具备的条件,五、DNA连接酶与DNA聚合酶的异同,知识回顾,现代生物科技专题,1.2基因工程的基本操作程序,目的基因的获取,基因表达载体的构建,将目的基因导入受体细胞,基因工程操作的动画,目的基因的表达和检测,基因工程的基本操作程序,基因工程的目的基因,与生物抗逆性相关的基因与优良品质相关的基因与生物药物和保健品相关的基因与毒物降解相关的基因,目的基因的概念：目的基因是人们所需要转移或改造的基因,主要是指编码蛋白质的基因。,？,1、获取目的基因的方法有哪些？2、什么叫基因文库，它包括哪些种类？3、用PCR技术扩增基因需要哪些原料？,1、从基因文库中获取（序列未知）,2、利用PCR技术扩增（序列已知）,基因文库,基因组文库,部分基因文库如：cDNA文库,聚合酶链式反应,目的基因的获取,3、人工合成,(基因比较小，序列已知),反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA,从基因文库获取目的基因,返回,根据目的基因的有关信息，如：基因的已知核苷酸序列；基因的功能；基因在染色体上的位置；基因的转录产物mRNA；基因的表达产物蛋白质；,PCR扩增仪,利用PCR技术扩增目的基因,原理：DNA双链复制的原理过程：变性（9095）退火：引物与单链互补结合（5560）DNA聚合酶作用下延伸（7075）条件：DNA模板、引物、DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、能量。,1、基因表达载体包括哪些必需组分？各成分的作用是什么？2、转化的概念，将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别有哪些？,基因表达载体的构建和将目的基因导入受体细胞,将目的基因导入受体细胞,转化,农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术感受态法,受体细胞,植物cell,动物cell,微生物cell,将目的基因导入微生物细胞原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少方法：,用Ca2+处理细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子,DNA分子杂交,目的基因的检测和鉴定,基因探针，是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列。基因探针通过分子杂交与目的基因结合，产生杂交信号，能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。,？,1、探针需带有一定的标记，可以用什么方法？2、基因探针有哪些用途？,目的基因的表达和检测,接种实验,抗原抗体杂交法,DNA-RNA分子杂交法,DNA分子杂交法,归纳:基因工程的基本操作程序,获取目的基因从基因文库利用PCR技术人工合成构建基因表达载体目的基因、启动子、终止子、标记基因将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法目的基因的检测与
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