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大肠杆菌乳糖操纵子的结构及其正、负调控:负控诱导型操纵子大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因:Z、Y、A以及一个操纵序列(启动子序列P、操纵基因序列O、调节基因I)。转录时RNA聚合酶首先与P启动子区结合,通过操纵子向下游转录出Z、 Y 、A三个基因的多顺反子。转录的调控是在启动子区和操纵子区进行。正调控机制:cAMP-CAP复合物与启动子区的DNA结合改变了此区域DNA的次级结构,促进了RNA聚合酶结合区的解链,增强了转录。cAMP-CAP复合物的形成取决于细胞内cAMP的浓度(或活性),当细菌以葡萄糖为能源时,因为有葡萄糖降解物的效应(抑制了腺苷酸环化酶的活性),使ATP生成cAMP的浓度降低,因而cAMP-CAP复合物的量低,导致乳糖操纵子结构基因不被转录。负调控机制:由调节基因I表达的阻遏蛋白以四聚体的活性结构结合于操纵子基因上,阻绕了RNA聚合酶的转录。诱导调控:当有诱导物(异乳糖(乳糖异构体)、IPTG、TMG等)存在时,诱导物可以与调节基因I表达的阻遏蛋白结合,改变其蛋白构象后不能与操纵基因结合,RNA聚合酶可以进行结构基因的转录,也就实现了分解乳糖代谢的相关酶的基因表达,即细菌可以分解和利用乳糖。大肠杆菌乳糖操纵子的正、负调控协调调节其结构基因的表达。总结:使大肠杆菌乳糖操纵子高效表达,必须既有诱导物又无葡萄糖效应。大肠杆菌培养基中有葡萄糖和乳糖时,细菌为何优先利用葡萄糖?(1) 培养基中有葡萄糖,无乳糖时,cAMP-CAP复合物浓度低,即CAP不发挥作用,无诱导物存在时,阻遏蛋白与操纵基因结合,关闭了下游结构基因的表达。(2) 培养基中既有葡萄糖,又有乳糖时,虽然阻遏蛋白不能与操纵基因结合,但cAMP-CAP复合物浓度低,即CAP不发挥作用,下游结构基因的表达仍然处于关闭状态。(3) 培养基中无葡萄糖,有乳糖时,cAMP-CAP复合物浓度高,即CAP可以发挥(分解代谢基因激活蛋白的)作用,而且有诱导物,阻遏蛋白不能与操纵基因结合,开放下游结构基因的表达。(4)(5) (学习的目的是增长知识,提
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