医学微生物学肠杆菌科.ppt

第8章肠杆菌科,是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性短小杆菌，有的为致病菌，多为肠道内正常菌群，可引起医院感染。,肠道杆菌共同特点,形态结构G小杆菌，钝圆杆菌，无芽孢，多数有鞭毛及菌毛培养特性需氧或兼性厌氧营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。肠道选择培养基：,2020/6/12,医学微生物学,2020/6/12,医学微生物学,EMB（伊红美兰培养基），乳糖、伊红、美兰,选择作用（弱选）,大肠埃希菌（非致病菌）,乳糖,发酵,产酸,伊红,结合,美兰,形成紫黑色金属光泽化合物,有色的乳糖发酵菌落,伤寒沙门菌等（致病菌）,乳糖,不发酵,伊红美兰不能结合,无色的乳糖不发酵菌落,2020/6/12,医学微生物学,EMB平板上的E.coli,SS培养基（沙门志贺培养基）乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂,选择抑制作用（强选）,大肠埃希菌产酸桃红色乳糖发酵菌落,伤寒沙门菌无色乳糖不发酵菌落,胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率,乳糖发酵,中性红呈红色,乳糖不发酵,生化反应活跃，常用于鉴别肠道杆菌抵抗力不强，6030min即可灭活抗原结构复杂菌体（O）抗原鞭毛（H）抗原表面（K、Vi）抗原易出现各种变异,第一节大肠杆菌（埃希菌属）,生物学性状,形态染色符合肠杆菌特点，周毛菌，有菌毛培养特性符合肠杆菌特点EMB紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S桃红色生化反应IMViC（+-）抗原O抗原（O1-O173）H抗原（H1-H56）K抗原（K1-K100）血清型表示法：O：K：H,致病性,致病物质除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有：黏附素具有高度特异性吸附、定植、致病,外毒素（由ETEC产生的肠毒素）（1）不耐热肠毒素（LT），分LT-I和LT-两型蛋白质对热不稳定，与霍乱肠毒素相似A亚单位毒素活性成分机制B亚单位与肠上皮细胞受体（GM1神经节苷脂）结合B单位与受体结合导致A进入细胞内激活腺苷酸环化酶,ATPCAMP,小肠液过度分泌,肠腔积液、腹泻,（2）耐热肠毒素（ST），分STa、STb两型为低分子多肽，对热稳定机制为激活细胞鸟苷酸环化酶，使cGMP导致腹泻LT和ST同时存在，致病性更强,E.coli的不耐热肠毒素,所致疾病：肠道外感染（内源性感染）化脓性感染定位转移腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等泌尿道感染病原菌来自病人肠道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等）,肠道感染胃肠炎（腹泻），（外源性感染）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）：婴幼儿、旅游者腹泻，与霍乱功能相似肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：成人腹泻，与菌痢相似肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：婴儿腹泻（水样腹泻）肠出血性大肠埃希菌（EHEC，O157）：出血性结肠炎，溶血性尿毒综合征（HUS）肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）：婴儿腹泻（持续性）,微生物学检查与防治,肠道外感染标本涂片、染色分离培养鉴定尿路感染时每ml尿含菌10万，有诊断价值肠道内感染用弱选择性培养基分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等卫生细菌学检查每1000ml水中大肠杆菌3个，每100ml瓶装汽水、果汁中，大肠杆菌5个,第二节志贺菌（痢疾杆菌）,生物学性状,形态染色符合肠杆菌特征，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点培养特性肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落生化反应葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、H2S-、尿素（-）,抗原分类根据O抗原分4群，40余型A群痢疾志贺菌（10）B群福氏志贺菌（13）C群鲍氏志贺菌（18）D群宋氏志贺菌（1）抵抗力比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感,致病性与免疫性,致病物质侵袭力黏附肠黏膜上皮细胞型分泌系统穿透上皮细胞并扩散、传播内毒素强烈内毒素，作用于局部并可吸附入血引起全身症状外毒素A群（、型）产生志贺毒素（ST）,阻断蛋白质的合成,细菌（菌毛）吸附肠黏膜上皮细胞,穿入细胞并扩散周围及深入黏膜下层,释放内毒素、外毒素,肠局部黏膜炎症（变性、坏死、脱落）出血、坏死、溃疡脓血便/黏液血便,刺激肠壁植物神经肠蠕动肠肌痉挛腺体分泌水分吸收腹痛、腹泻,刺激直肠肛门括约肌里急后重便数增加,吸收入血发热、白细胞高热、休克中毒性脑病DIC死亡,毒血症,中毒性菌痢,所致疾病细菌性痢疾传染源：病人、带菌者传播途径：经口临床类型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力不牢固，易再感染,微生物学检查与防治,微生物学检查分离鉴定毒力实验快速诊断防治更有效的疫苗还在研制中，此菌极易出现耐药性，依药株。,第三节沙门菌属,是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2000种以上血清型对人类有致病性肠热症伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌食物中毒鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌败血症猪霍乱沙门菌最常见,生物学性状,形态染色符合肠杆菌特点，多为周毛菌，有菌毛,伤寒杆菌的周身鞭毛,培养特性EMB、SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落,麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落,EMB培养基，上为E.coli，下为伤寒杆菌,生化反应乳糖（-），葡萄糖（+），多数H2S+，动力+，尿素（-）抗原结构O抗原特异性低、稳定、分群（组）H抗原特异性高，不稳定，分型Vi抗原（毒力抗原）不稳定，可阻止“O”凝集抵抗力不强,致病性与免疫性,致病物质侵袭力菌毛吸附型分泌系统穿入细胞，扩散Vi抗原微荚膜（抗吞噬）内毒素外毒素个别（鼠伤寒沙门菌）产生，与ETEC肠毒素相似,所致疾病,菌毛,穿入淋巴液,胸导管,第二次菌血症,迟发型变态反应肠壁坏死、溃疡,高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞等全身中毒症状,肠热症,伤寒沙门菌等经口,吸附小肠黏膜细胞上,在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖（致敏）,血流（第一次菌血症）,肠出血、肠穿孔,1、肠热症临床过程潜伏期2W发病期：高热、肝脾肿大、皮疹、WBC等全身中毒症状，此期血液（80%）、骨髓（90%（+）有大量细菌。随着病情的发展，全身症状持续加重，此期血、骨髓中仍有菌，但粪便（60%）、尿（20%）、皮疹液中可查到细菌，由于型变态反应并发症发生，血液抗体达到阳性标准肥达反应恢复期：第四周末，体温下降，症状消失，恢复期带菌1年（粪便仍阳性），血液抗体仍高。,2、胃肠炎（食物中毒）潜伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻3、败血症经口感染，经肠道入血，败血症症状明显而肠道症状不明显4、带菌者健康带菌者，恢复期带菌者免疫性肠热症，病后有一定免疫力，可重复感染,伤寒杆菌感染示意图,微生物学检查与防治,分离培养与鉴定标本采取肠热症：1W取血，2W取粪便，3W取尿液，13W取骨髓液食物中毒：粪便、呕吐物、可疑食物败血症：血带菌者：粪便分离鉴定：增菌（血、骨髓）EMB、SS生化反应血清鉴定,血清学诊断肥达反应（Widal）,原理用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H抗原，以及引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价。（TO、TH、PA、PB）方法：试管凝集法（定量）TO1：80，TH1：160，PA、PB均1：80才有意义动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义,临床意义O抗体（IgM），H抗体（IgG）O、H抗体均升高，患伤寒的可能性大O、H抗体不升高，患伤寒的可能性小只有H升高，则可能是预防接种过或非特异性回忆反应，只有O升高而H不高，则可能是感染早期或其他沙门菌的交叉反应。,第四节其他菌属,克雷伯菌属（7个种）肺炎克氏菌（3个亚种）的肺炎亚种，俗称肺炎杆菌，与人类感染有关G-球杆菌，无动力，有较厚的荚膜，多有菌毛抵抗力低下者易感，常引起医院内感染，如肺炎、支气管炎、泌尿道感染等,变形杆菌G-杆菌，有多形性，周身鞭毛，运动活泼，在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生长现象,变形杆菌的周身鞭毛,迁徙生长,迅速分解尿