GLP动物试验中的实验动物管理.ppt

GLP动物试验中的实验动物管理,2011.06,“280条”中检查项目中标有“”项目为关键项目（共6项），标有“”项目为重点项目（共30项），其他项目为一般项目（共244项）。其中与实验动物管理的相关的“”项目为关键项目（共1项），标有“”项目为重点项目（共8项），其他项目为一般项目（共37项）。,药物非临床研究质量管理规范认证标准,实验动物管理认证标准,动物试验结果会受诸多因素的影响。例如:实验动物的品种、品系、性别、年龄、健康等动物的自身因素；温、湿度、照度、噪音等环境因素；饲料、水等营养因素；以及笼具、垫料等其它因素均可能对实验的数据产生影响。实验动物管理的目的就是控制这些可能对实验数据产生影响的因素，将这些因素可能造成的负面影响降至最低。因此合理的实验动物设施、优质的实验动物、正确的饲养管理是保证动物试验得到准确、可信、可重复的实验数据的基础。实验动物的管理包含硬件和软件两方面的内容，硬件方面的管理内容有：实验动物饲养设施；实验动物使用物品保障设施；实验动物饲养管理设备等。软件方面的管理内容有：各种管理操作的标准操作规程等。,一、动物实验设施、设备和使用管理二、动物实验中动物日常饲养管理三、实验动物管理各种操作的标准操作规程,动物实验设施、设备和使用管理,一、实验动物设施的功能设置（一）实验动物设施的构成实验动物设施的构成根据其功能应设有动物接收、检疫区，饲养区、实验区，带病动物的隔离及治疗区，饲料、垫料及动物管理使用物品的保管、储存区，洗刷、消毒区，废弃物保管、管理区，空调设备区，其他公共使用区。另外实验动物设施应备有实验动物设施平面图，实验动物设施各区域功能说明及面积说明。实验动物设施应计算出各种实验动物的最大容纳量。,动物接收、检疫区,这个区域主要负责各种动物的接收、动物检疫期和检疫期的饲养管理。对于不同种的动物，不同微生物级别设立不同的检疫室（或不同的实验室就地检疫）；对同种同微生物级别同来源不同专题的实验动物可以同室检疫观察。,饲养、实验区,本区域主要进行试验期间动物的饲养和试验的实施区。这个区域的环境条件应完全符合国家有关实验动物设施环境条件的要求，对此区域的环境条件控制应给以重点监控。另外，本区域还进行一些实验的操作，如动物的眼科检查、尿检查、性周期检查、动物血压检查等，应考虑设置单独区域来进行这些操作，同时应考虑单独设置受试物的混合、配制室。,有病动物的隔离及治疗区,本区域是为防止发现有病动物和异常动物（不包括由于受试物引起的异常）对其他健康动物产生影响、感染设立的隔离、治疗区域。对于大、小鼠可考虑不设置有病动物的隔离及治疗区域。,饲料、垫料及动物管理使用物品的保管、储存区,本区域是饲料、垫料及动物管理使用物品（动物笼具）的保管、储存区域。饲料的储藏若有条件最好冷藏保存，饲料、垫料及动物管理使用物品应将已洗刷或消毒和未洗刷或消毒物品分区放置。未经处理的物品应有单独的保管、储藏场所。,洗刷、消毒区,本区域是动物饲养物品洗刷和消毒的场所，灭菌后的物品应单独设置独立保管区域。同时，还应考虑各种洗刷、消毒用设备的设置区域，如洗刷池、消毒池、高压灭菌器、传递舱等。,废弃物保管、处理区,本区域是废弃物保管、处理区域。设置有废弃物保存、管理、处理的设备。如动物尸体冷冻临时保存库、污水处理装置等。,管理区,本区域包括缓冲间、传递窗、清洁走廊和污染走廊、管理办公室、员工休息室、更衣室以及环境监控室、记录保管等区域。,空调设备区,本区域是为保证实验动物设施内的通风换气、温度、湿度、空气压力的设备而设置的区域。,其他公共使用区,本区域是为实验操作设置的区域。如动物的眼科检查、尿检查、周性期检查等所用仪器的保管区域。,（二）实验动物设施动线图（人员、物品、动物、空气流向图）,二、实验动物设施的运行管理,（一）影响动物试验的因素实验动物环境因素有很多种，一般有气候因素、物理化学因素、居住因素、营养因素、动物同居因素、饲养、实验因素、微生物因素等。因各种因素对实验动物影响非常复杂，以下仅讨论环境因素、微生物因素对动物实验的影响。1、温度：温度的急剧变化，会引起动物神经系统的应激反应，继而引起内分泌的反应，最后导致脏器的变化。例如，大鼠的白细胞、红细胞值在高温时会增高，而血浆蛋白等在温时低有增加的趋势。另外，在同一种药物的大鼠LD50实验中，实验结果相差近10倍。以上可以看出，动物的环境温度应设置在一定的温度范围内，并且变化尽可能的小。2、湿度：动物在同一温度，低湿度的情况下，摄食量会增加，身体散热量增加。大、小鼠母鼠会拒绝哺乳或吃崽，仔鼠出现发育不良，室内灰尘容易飞扬，使动物发生呼吸道疾病。湿度低于40%，大鼠会发生环尾病。相反，高湿度环境下，空气中微生物繁殖加快，传染病发生率高，氨气浓度增高，饲养环境恶化。高温高湿和低温低湿都会引起动物生理的变化。因此，设定合适的湿度十分必要。但目前尤其在潮湿的季节，湿度的控制是比较困难的。,3、气流、换气：气流速度过快，会引起动物体温变化；过慢，会影响室内换气。4、光照：光的照度、波长、照射时间等会对动物产生影响，尤其是对动物内分泌的影响，动物的性成熟、发情周期、生殖器官的重量都会受光照的影响。动物饲养室应设定合适的光的照度、照射时间。5、声音：动物能听到的音域比人宽，对声音的感受性比人敏感。噪音对动物的生殖生理有严重影响。噪音造成的听源性痉挛会导致动物死亡。6、臭气：对动物健康产生影响的臭气来源主要是动物排泄物的分解，会产生氨气，高浓度的氨气对动物的呼吸道黏膜产生刺激并引起炎症。7粉尘：动物饲养室中有粉尘颗粒，而微生物多附着在这些粉尘颗粒上，同时粉尘颗粒对动物的呼吸道黏膜产生刺激。因此一般屏障系统要求静态条件下，洁净度达到10000级。对动物实验结果的影响，除了上述所讨论的环境因素等。动物本身的因素也会对动物实验结果产生很大的影响较难控制。其中对动物实验结果的影响最大的因素是实验动物的微生物因素。,*除对动物实验设施内的环境因素温度、湿度、压力利用计算机系统进行随时监控和连续记录外。同时对动物设施内的环境因素温度、湿度、照度、噪音和氨气浓度等进行定期监测。监测时间隔为每6个月1次，将监测结果记录存档并且对不达标指标处理建立对策是十分必要的*动物实验设施的微生物监测：实验动物饲养区域的微生物监测每3个月1次。,三、实验动物设施内相关设备管理,实验动物设施内相关设备主要有：空调系统、高压蒸气灭菌器、风淋器、传递舱、动物天平、其他（动物实验区域内实验仪器、动物管理辅助设备）这些相关设备控制设施是日常操作所必需的物品。实验动物设施内相关设备应有其放置场所，应制订使用标准操作规程，使用记录，状态显示、维护记录。对于需要强检的仪器设备如高压蒸气灭菌器、天平等必须进行强检，同时将强检标识贴在设备上，将强检记录存档。,实验动物日常饲养管理,1、动物的订购方法2、动物接收方法：3、动物验收：4、动物的检疫、驯化：5、饲养管理方法：6、废弃物的处理：,动物的订购依据和内容,动物试验实施的依据是实验计划书（试验方案），通常的实验计划书包含有关实验动物管理的信息有以下内容：实验动物的选择理由实验动物的品种、品系、数量、年龄、性别、体重范围、动物供应商的相关资料、实验动物合格证号。实验动物的分组、识别方法。实验动物的检疫要求实验系饲养管理的环境（地点、环境、笼具、消毒）饲料（厂家、批号、饲喂方式、杂质标准、杂质确认）饮用水（来源、杂质标准、杂质确认）,（一）动物的订购方法,动物管理部门在接到试验方案和填写完毕的实验动物申购书按照要求订购实验动物。实验动物申购书应包含动物来源、动物级别、动物品种、品系、数量、年龄、性别、体重范围、动物供应商的相关资料包括本批订购的实验动物合格证、发票、实验动物生产厂家应提供有效的实验动物生产许可证的复印件及近期动物微生物检测报告复印件。以上所有文件应作为原始数据在动物检疫期结束后交实验负责人存档。,（二）动物接收方法,动物到达实验设施后，动物管理部门应保留动物运输的信息。本中心设置外来动物电梯、动物接收室、动物检疫室、动物饲养室，这样可以使动物接收、检疫、饲养在不同区域进行，可以最大限度保证实验动物设施在使用过程中的安全。,（三）动物验收,动物进入动物设施，动物管理人员应依照实验动物申购书的内容检查动物只数、性别是否正确，每只动物称量体重，做临时标记和设置检疫期临时笼卡。依照外观检疫项目进行动物外观检疫,（四）动物的检疫、驯化,不同种类的动物有不同的检疫、驯化期限，小鼠3天、大鼠7天、豚鼠3天、家兔7天，犬不少于14天、猴不少于28天，动物检疫期间每天应做一般症状观察，主要观察动物的行为状态，摄食、摄水的情况，对于大动物同时进行动物抓取、固定等操作的驯化；对摄食、摄水量进行观察。检疫、驯化期结束，动物的健康状态应由兽医进行书面的动物健康评价。以上所有操作的记录在动物检疫、驯化期结束后移交实验负责人保管。,（五）饲养管理方法,动物实验期间，应依据实验要求明确动物的管理方法，某些特殊实验如放射性实验、生物安全实验等，应在特殊的相关设施中进行，动物饲养管理方法也与一般采用的动物饲养管理方法不同，在此不作详述。以下只讨论一般动物饲养管理方法。1、动物识别：检疫期结束后，动物由动物检疫室移入动物实验室(就地检疫的动物在该实验室直接操作）。同时动物应分组编号，并做动物个体标识。个体标识的方法有色素涂抹（皮下埋植电子标记、耳标、耳号、项圈、刺青），在使用色素涂抹时应充分明确色素可能存在的毒性通过动物舔食色素对实验的影响。动物笼具应设置笼卡，笼卡填写内容应包括药物名称、实验名称、实验种类、实验人、动物名称、实验期、实验组别等。,2、有病动物的处理方法：动物在检疫、驯化期间若出现有病动物，应首先对有病动物进行隔离。对动物进行微生物检查，若发现人畜共患病或动物间烈性传染病，应报告实验负责人、动物管理负责人、机构负责人及相关防疫部门，动物应全部处死，动物尸体及动物使用相关物品和动物实验室做消毒处理。若未发现人畜共患病、动物间烈性传染病或影响动物级别的微生物疾病，应报告实验负责人、动物管理负责人，对患病啮齿类动物个体处死，对患病大动物由兽医进行治疗，用药情况，动物康复情况应报告实验负责人、动物管理负责人。由实验负责人决定康复后的动物是否用于实验。,3、实验室的清扫、消毒：动物饲养区的洗净、消毒包括动物饲养区地面、墙壁、顶棚、出、排风口等。洗净方式采取擦拭、水洗等方式，灭菌方式采用熏蒸、喷雾、擦拭、紫光灯等方式。在动物实验区域使用消毒液、洗涤剂首先要有实验负责人的指示，明确所使用的消毒液、洗涤剂种类，使用方式、使用浓度、频度并做配制、分发、使用记录。,4、动物笼具类的洗刷、消毒：笼具洗刷方式采用手工洗刷；明确所使用的消毒液、洗涤剂种类，使用方式、使用浓度、频度，灭菌方式采用高压蒸气、浸泡、喷雾、紫光灯等方法。所有操作应做记录并归档。,5、动物实验中饲料、水以及动物垫料的管理,A、对饲料的要求:饲料的订购应根据实验的数量，使用动物的数量来订购。饲料生产厂家应具备生产许可证，每批订购的饲料应附合格证及近期饲料质量检测结果的复印件。B、饲料应保存在具备能控制温湿度的保存场所，不同种类饲料应分别存放，使用中采用“先进先用”原则。饲料应按生产批号进行管理，不得使用超过保质期的饲料。C、动物饮水的要求：应明确水的来源，制订操作规程管理消毒或灭菌装备。确定给水瓶等给水器具的交换频度。每6个1次依据人的饮用水部分指标对水中的有害物质、微生物指标进行检测。D、对垫料的要求：垫料的订购应根据实验的数量，使用动物的数量来订购。垫料应明确其来源、材料种类。垫料应保存在通风良好的保存场所，使用中采用“先进先用”原则。垫料应按生产批号进行管理，不得使用超过保质期的垫料。,（三）废弃物的处理,实验动物日常管理废弃物：包括动物管理产生的废弃垫料，饲料包装及相关无害废弃物，确认无害后由动物管理人员用塑料袋密封后存放于公司垃圾堆放处，由清洁公司统一收取和处理动物实验产生的废弃物（二级）：包括实验中使用过的一次性器材，废弃药品等，应由使用人确认无害，用放