肺结核快速诊断新技术介绍

肺结核快速诊断新技术介绍,王甦民2011年10月14日,结核病，特别是耐药结核病的快速诊断是制约结核病控制工作开展的瓶颈之一。而解决这一问题靠微生物学技术难度很大，需要引入新一代的检测技术。,目前诊断技术存在的问题与解决办法,问题： 1、敏感性、特异性不高 2、需要太多的时间解决办法： 1、引入现代分子生物学检测技术 2、引入现代免疫学检测技术,政府的管理决心,世界卫生组织总干事陈冯富珍在2009年4月1日的耐多药和广泛耐多药结核病高负担国家部长级会议上说：“如果不能应对耐多药结核病，则它们将会取代当前占世界95%的药物敏感性结核杆菌，将把我们带回到没有抗生素的岁月。”,耐药结核病获得结果时间,最快药敏结果约23-28天！,传统分枝杆菌培养及药敏的检测速度缓慢，手工方法需要2-3月。液体培养方法也需要3-4星期，而且操作流程也非常繁琐。,实验室快速诊断方法,6个小时之内完成对疑似结核和“耐多药结核”的快速甄别与检测,2008年5月份世界卫生组织建议使用分子线性探针(Molecular Line Probe) 来检测耐多药结核病,实验室快速诊断方法,推荐方法,检测原理(1),检测原理从标本中提取DNA （固体培养、液体培养、涂阳临床标本）,2. PCR扩增 (将一条DNA复制变成几千万条),3. 对扩增DNA产物进行反向杂交,4.判断结果,GenoType MTBDRplus结果,MTBC及其对利福平和/或异烟肼的耐药性,GenoType 分支杆菌试剂盒系列,GenoType MTBC （来自于培养标本的结核分枝杆菌复合群菌种间的鉴定）GenoType Mycobacteria Direct（来自于病人标本的结核分枝杆菌复合群，非结核分枝杆菌复合群的鉴定）GenoType Mycobacterium CM（来自于培养物的结核分枝杆菌复合群，非结核分枝杆菌的鉴定）GenoType Mycobacterium AS（来自于培养物的其他非结核分枝杆菌的鉴定）GenoType MTBDRplus （结核分枝杆菌利福平、异烟肼耐药性检测）GenoType MTBDRsl （结核分枝杆菌乙胺丁醇、喹诺酮类、氨基糖苷类耐药性检测）,方法：将536份来自南非开普敦病人涂片阳性的痰标本分成两部份, 一部份用分子线性探针快速检测, 另一部份用MGIT做培养和药敏。结果：跟传统的培样对比，分子快速的灵敏度，特异性，阳性及阴性预测是 98.8%, 100%, 100% 和99.7%。,快速分子耐多药结核病检测系统在南非公共卫生中心的应用,方法: 169临床标本,以国际标准的比例法对照,仪器系列,TwinCubator 手工杂交仪- 每次检测12个标本- 手工加样及试剂,GT-Blot 48 全自动杂交仪- 每次检测48个标本- 自动手工加样及试剂- 准确温度控制,如果具备PCR实验室，只需要配备,技术优势,获得结果只需6小时！世界卫生组织推荐的方法(在中国、南非、印度及俄罗斯这些结核病高发区开始应用)同一个平台，检测耐多药、广泛耐药、30种分枝杆菌