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文档简介

第二章基因工程的基本条件,一、用于核酸操作的工具酶二、基因克隆载体三、目的基因的获得四、基因工程受体菌或细胞,四、基因工程受体菌或细胞,受体细胞应具备的条件各种基因工程受体及其特性实验室常用的基因工程受体,受体细胞应具备的条件,限制性缺陷型,外切酶和内切酶活性缺陷(recB-、recC-、hsdR-)；,重组整合缺陷型,用于基因扩增或高效表达的受体细胞(recA-)；,具有较高的转化效率,具有与载体选择标记互补的表型,感染寄生缺陷型,防止重组细菌扩散污染，生物武器除外。,各种基因工程受体及其特性,遗传背景清楚载体受体系统完备生长迅速培养简单重组子稳定,产结构复杂、种类繁多的内毒素,大肠杆菌：,外源DNA克隆和扩增；原核基因高效表达；基因文库构建。,用途：,是基因工程主要原核受体菌。,遗传背景清楚蛋白质分泌机制健全生长迅速培养简单不产内毒素,遗传欠稳定载体受体系统欠完备,枯草杆菌：,用途：,原核基因的克隆与表达；重组蛋白多肽的分泌。,链霉菌：,抗生素的主要生产者遗传操作简单不产内毒素,用途：抗生素生产菌株的改良。,遗传不稳定生长相对缓慢,酵母菌：,具有真核生物的特征遗传背景清楚生长迅速培养简单外源基因表达系统完善遗传稳定,内源蛋白产物的种类多、含量高,用途：,外源DNA扩增和克隆真核基因高效表达基因文库构建真核基因表达调控研究,是基因工程重要的真核受体菌。,昆虫细胞（家蚕）：,具有真核生物的特征外源基因表达量高繁殖较快培养成本低遗传稳定,用途：真核生物基因的高效表达。,DNA重组操作系统欠完善,哺乳动物细胞（中国仓鼠卵巢细胞CHO）：,与人的亲缘关系近分子重组表达系统健全具有合适的糖基化修饰系统,细胞培养条件苛刻生长缓慢,用途：,哺乳动物和人基因表达调控研究基因药物生产,是基因工程的主要哺乳动物受体。,植物细胞（拟南芥、烟叶）：,转基因植物细胞易分化细胞培养简单成本低廉具有光合作用,遗传操作繁琐,用途：,高等植物基因表达调控研究农作物品质改良,实验室常用的基因工程受体,酵母菌：毕赤酵母、啤酒酵母,
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