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人凝血因子的分离纯化工艺,制作人:龙益如,班级:144092,The Preparation Procedure of Human Coagulation Factor ,1,2,F ,F ,3,人凝血因子是人血浆中一种非常重要的凝血因子,其缺失或缺乏会引起不同程度的甲型血友病一种连锁隐性遗传的出血性疾病,严重时甚至会危及患者的生命。甲型血友病是一种终生性疾病,目前仍没有根治的方法,只能通过输注产品进行替代性治疗。,4,5,原材料:人新鲜冰冻血浆主要杂质:人纤维蛋白原、人纤维结合蛋白、白蛋白、其他凝血因子等,6,关键步骤:,7,冷沉淀中所含杂质:,8,2. 乙酸缓冲液调节pH 等电点沉淀法调节温度为15,pH6.3左右去除等电点较高的人纤维白蛋白和人纤维结合蛋白,9,3.Al(OH)3 吸附 吸附分离法 (负吸附)使用Al(OH)3 作为吸附剂,通过预实验确定铝胶含量为12%。由于该吸附剂为两性离子,在pH7.1(预实验确定)左右时带正电,易于吸附小分子酸性蛋白,去除F 、F 、F 、F 等,10,4. DEAE 650M 弱阴离子交换凝胶 离子交换层析固定层析过程为pH7.0,通过调节缓冲液盐浓度来改变蛋白结合能力,进行洗脱。梯度洗脱方案:,11,12,5. 病毒灭活(1)S/D处理法 灭活脂包膜病毒(2)100 30min 干热灭活法灭活非脂包膜病毒,谢谢您的观看与聆听,制作人:龙益如,班级:144092,The Preparation Procedure
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