第4节生物技术

新型注射（植入）给药系统,非注射给药系统,第三节蛋白质类药物新的给药系统,新型注射（植入）给药系统,控释微球制剂,脉冲式给药系统,复乳液中干燥法,低温喷雾提取法,喷雾干燥法,超临界萃取法,控制型微球制剂应用的高分子聚合物,目前已经实际应用的生物可降解材料有聚乳酸（PLA）或聚丙交酯-乙交酯（PLGA，聚乳酸乙醇共聚物），改变丙交酯与乙交酯的比例或分子量，可得到不同时间生物降解性质的材料。,首次经FDA批准的蛋白质类药物微球制剂是-醋酸亮丙瑞林聚丙交酯-乙交酯微球。,醋酸亮丙瑞林聚丙交酯-乙交酯微球怎么制备的？,为什么要制成微球？,复乳液中干燥法,例亮丙瑞林微球的制备治疗前列腺癌制备复乳液中干燥法内水相:醋酸亮丙瑞林,明胶,水,混合加热至60油相:聚乳酸(PLA)或聚乳酸乙醇酸共聚物PLGA溶于二氯甲烷,制备工艺,内水相油相油相加入水相制成W/O微乳剂冷却至15在5000r/min下用喷嘴聚乙烯醇水溶液W/O/W乳剂30下缓慢搅拌2h或旋转蒸发除去二氯甲烷,得硬化的圆形微球,醋酸亮丙瑞林体内外释放与PLGA(聚乳酸乙醇共聚物）平均分子量的关系,体外释放体内释放时间剩余醋酸PLGA剩余醋酸PLGA(d)亮丙瑞林%平均分子量亮丙瑞林%平均分子量010012000100120007701050079105001457940060880021375600375000282150003028003502600202200,说明醋酸亮丙瑞林随PLGA的降解而不断释放，在体内外大体一致，体内能维持一个月。,低温喷雾提取法,生物大分子药物与保护剂的均匀粉末加生物可降解性聚合物的有机溶液中混合成混悬液,喷头雾化后喷入冰冻的乙醇溶液,低温-70,聚合物载体中有机溶液在乙醇中不断扩散，分离微球，低温干燥除去乙醇得粉末状微球,喷雾干燥法,生物大分子药物及其稳定剂的混合粉末或水溶液,溶有高分子聚合物的有机溶剂,混合形成混悬液,经喷嘴雾化干燥制得微球,超临界萃取法,RESS超临界溶液快速膨胀技术,包埋在聚乳酸小球中洛伐他丁晶体,GAS气体反溶剂技术,制备了氢化可的松微球,肝炎、破伤风、白喉等疾病所用预防药物即疫苗或类毒素均为抗原蛋白，其中乙肝疫苗已能用生物技术制造。使用这些疫苗全程免疫至少进行三次接种，才能确证免疫效果，由于种种原因，全世界不能完成全程免疫接种而发生辍种率达70%，因此为了提高免疫接种的覆盖率，减少一些重大疾病的死亡率，世界卫生组织疫苗发展规化主要目标之一，就是将多剂疫苗发展为单剂疫苗，其中之一就是研制成脉冲式给药系统。此项研究，目前正在研究中。,脉冲式给药系统,非注射给药系统,鼻腔给药系统,口服给药系统,直肠给药系统,口腔黏膜给药系统,经皮给药系统,肺部给药系统,降钙素、催产素、加压素、胰岛素、LHRH激动剂布舍瑞林甘胆酸盐、胆酸盐、去氧胆酸盐、葡萄糖胆酸盐鹅去氧胆酸盐、乌索去氧胆酸盐等有些分子量大的药物透过性差，生物利用度低，吸收不规则，且产生局部刺激性等，应用受到限制。,鼻腔给药系统,上市的药物,常用的鼻腔黏膜促进剂,存在的问题,蛋白质类口服给药主要存在的问题：(1)在胃内酸催化降解；(2)在胃肠道内的酶水解；(3)对胃肠道粘膜的透过性差；(4)受肝的首过效应作用。,口服给药系统,胰岛素口服给药是人们非常关注的热点，因为目前胰岛素主要靠注射给药，而且每天频繁注射（3-4次），这给慢性糖尿病患者身体、心理与经济上的极大负担。无疑是对药学工作者的一个严峻的挑战。,目前研究的几种主要剂型,微乳制剂,纳米囊和纳米粒,胰岛素肠溶胶囊,胰岛素脂质体,新型吸收促进剂的应用,N-8-(2-羟苯基）-氨基辛酸钠SNAC与胰岛素形成非共价键结合的物理复合物20-25分钟达到峰浓度；注射胰岛素45分钟时达到峰浓度,生物黏附材料与肠溶性材料的联合应用技术,常用的直肠吸收促进剂水杨酸、5-甲氧基水杨酸、去氧胆酸钠、聚氧乙烯、烯胺衍生物如D-甘氨酸钠、D-亮氨酸钠，D-苯丙氨酸钠等。,直肠给药系统,口腔黏膜给药系统,胰岛素口腔黏膜剂,内层胰岛素与甘胆酸钠,外周黏附层HPC羟丙基纤维素与卡波普,第四节蛋白质类药物制剂的评价方法,制剂中药物的含量测定,制剂中药物的活性测定,制剂中药物的含量测定,紫外分光光度法,反相高效液相色谱法,BCA法（二辛可宁酸),BCA法,BCA(bicinchoninincacid)二辛可宁酸与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2还原为Cu，一个Cu螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。,制剂中药物的活性测定,酶联免疫测定法,体外药效方法,体内药效学方法,获得待分析物的未标定抗体,将特异性抗体与固相载体连接形成固相抗体,洗涤除去未结合的抗体及杂质,加入封闭蛋白溶液以封闭载体表面残留的蛋白结合位点,洗涤并除去未结合的封闭蛋白,加受检标本（抗原）形成固相抗体抗原复合物,洗涤除去其他未结合的物质,加酶标抗体生成抗体待测抗原酶标记抗体的复合物,彻底洗涤未结合的酶标抗体,加底物进行酶催化反应,根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量测定,酶联免疫测量法,ELISA试剂盒,酶联免疫井,DNM-9602G酶标分析仪,DNM-9602标配酶标分析仪,DNM-9602A酶标分析仪,几种酶标分析仪,复