乳酸脱氢酶 医学生用的生化学习.ppt

乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶几乎存在于各种组织中。心、肺、肝、肾、红细胞、骨骼肌和皮肤的急性损伤，以及恶性肿瘤和其他疾病均导致该酶的增加，因此其特异性较差。LD活性增加主要见于心肌梗塞、肺梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、肾脏疾病、一些恶性肿瘤、白血病和非恶性疾病如传染性单核细胞增多症、贫血、肌营养不良、胰腺炎等。肿瘤转移引起的胸腔积液中乳酸脱氢酶活性增加。目前，临床应用主要用于心肌梗死、肝病和恶性肿瘤的辅助诊断。乳酸脱氢酶由5种M型和H型亚基的同工酶组成，H4(LD1)、MH3(LD2)、M2H2(LD3)、M3H1(LD4)和M5(LD5)。不同的组织有其特有的同工酶。心脏、肝脏、肾脏和红细胞中乳酸脱氢酶同工酶的比例相似，主要成分为LD1和乳酸脱氢酶2。乳酸脱氢酶。根据LD同工酶的分布，组织分为3种类型：LD1是主要组织类型，心肌是主要组织类型，LD5是主要组织类型，肝肌是主要组织类型，LD3是主要组织类型，肺和脾是主要组织类型。当组织受损时，组织中包含的同工酶被释放到血液中，引起同工酶活性的变化。乳酸脱氢酶常用于急性心肌梗死的鉴别诊断。急性心肌梗死时，LD1和LD2活性均升高，但LD1升高更早、更明显，导致LD1/LD2比值升高。乳酸脱氢酶和乳酸脱氢酶在急性心肌梗死诊断中的评价1)总乳酸脱氢酶不能单独用于诊断急性心肌梗死，乳酸脱氢酶在单独诊断急性心肌梗死中仅有53%的特异性，可用于急性心肌梗死的排除诊断。2)乳酸脱氢酶在胸痛后8-12小时出现，7-12天恢复正常，持续时间较长。它可用于延迟治疗的患者。3)如果CK-甲基溴和肌钙蛋白有阳性结果，则没有必要检测乳酸脱氢酶。4)乳酸脱氢酶不能用于监测溶栓治疗。乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生中的一种重要酶。它含有锌离子，能可逆地催化乳酸和丙酮酸之间的氧化还原反应。乳酸NAD 丙酮酸nadh，其中LP为阳性反应，PL为阴性反应。乳酸脱氢酶，正向和反向反应的最佳酸碱度不同，正向为8.8-9.8。其优点是乳酸和NAD的稳定性高，纯NAD产品易得，价格低廉，过量乳酸对乳酸脱氢酶活性的抗性小，反应线性好。其缺点是底物浓度高，反应速度慢。乳酸脱氢酶，反向反应的最适PH值为7.4-7.8。其显著的优点在于NADH的用量少，仅为正向反应的3%左右，而反应速度是正向反应的3倍。其灵敏度高，但丙酮酸和NADH的稳定性差。过量的丙酮酸对乳酸脱氢酶活性有很大的抑制作用。乳酸脱氢酶活性的测定可以用阳性和阴性两种方式进行，但是测试研究所酶学小组的专家建议选择阳性反应。乳酸脱氢酶和不同的乳酸脱氢酶同工酶对温度有不同的敏感性。如果将组织提取物置于-20过夜，LD4和LD5将失去所有活性。血清样本应保存在室温下。如果血清样品需要长期保存，应添加10毫克/毫升的NAD或3.1毫克/毫升的谷胱甘肽，并在4下保存。抗凝血浆也可用于乳酸脱氢酶活性的测定，但不同的抗凝剂对乳酸脱氢酶的测定有不同的影响。草酸盐和乙二胺四乙酸盐能抑制乳酸脱氢酶的活性，而肝素作用不大。乳酸脱氢酶，因为红细胞和血小板含有大量的乳酸脱氢酶，所以严禁使用溶血样品，在使用血浆样品时必