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文档简介
.,液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍,资料收集:cbjcn1985,.,生化多肽-5988-6316EN升温对于反相HPLC分离强疏水肽的影响(B27)Polypeptide,流动相:A:含0.05%三氟乙酸的水B:含0.05%三氟乙酸的乙腈2%B/min进样量:100L(50g的6M脲/5%乙酸)UV:210nm流速:1mL/min室温,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x250mm5m,室温300C400C500C600C700C,提高柱温,可增加柱效(提高灵敏度),.,环保,样品:除草剂流动相:52/480.1M乙酸钠/甲醇,pH6流速:0.45mL/min温度:40,90检测:UV,除草剂:柱温的影响Herbicides:EffectofColumnTemperature,1.西玛津2.敌草隆3.扑灭津4.扑灭净5.异丙甲草胺,1.Simazine2.Diuron3.Propazine4.Prometryn5.etolachlor,液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm,5m,40,90,提高柱温,可增加柱效(提高灵敏度),.,生物制药,液相色谱柱:Zorbax300StableBond-C3色谱柱尺寸:4.6x150mm,5m,肽类/蛋白质:升温对分离的影响Peptides/Proteins:EffectofElevatedTemperature,样品:多肽流动相:A=5:95,乙腈:水,0.10%三氟乙酸(V/V%)B=95:5,乙腈:水,0.085%三氟乙酸(V/V%)梯度:在20min内15-53%,后运行时间12min流速:l.0mL/min温度:室温-60检测:UV215nm,1.亮氨酸脑啡呔2.血管紧张素II3.核糖核酸酶A4.牛胰岛素5.细胞色素C6.溶菌酶7.肌红蛋白8.碳酸酐酶,1.LeucineEnkephalin2.AngiotensinII3.RnaseA4.Insulin(BOV)5.CytochromeC6.Lysozyme7.Myoglobin8.Carbonicanhydrase,提高柱温,可增加柱效(提高灵敏度),.,生物制药,液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C8色谱柱尺寸:150mm,5m,减小毛细管内径来提高低浓度样品的检测灵敏度ReducingCapillaryIDtoImproveSensitivityforConcentration-LimitedSamples,流动相:60%乙腈/40%水流速:内径0.3mm-4uL/min内径0.5mm-10uL/min内径1.0mm-50uL/min内径4.6mm-1.0uL/min温度:室温检测器:UV254nm样品:200ng联二苯(100nl),减小柱径,可增加柱效(提高灵敏度),.,色谱柱技术5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性(TE32),液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x15mm3.5m,流动相:乙腈:1%甲酸=32:68UV:254nm流速:1.0mL/min.30C进样量:5L,响应时间:4.0秒响应时间:2.0秒响应时间:1.0秒响应时间:0.5秒响应时间:0.1秒,1.尿嘧啶2.乙酰水杨酸3.N-乙酰苯胺,1.Uracil2.Acetylsalicylicacid3.Acetanilide,缩短检测器响应时间,可增加柱效(提高灵敏度),.,色谱柱技术:不同硅胶类型比较(TE1),流动相:含0.05%甲醇的二氯甲烷,液相色谱柱,toluenebenzanilidephenolbenzylalcohol,ZorbaxSilSpherisorbZorbaxRx-Sil,甲苯N-苯甲酰苯胺苯酚苯甲醇,使用高纯硅胶,可增加柱效(提高灵敏度),.,有机化学5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响(ORCH1),流动相25mM磷酸:甲醇=58:42流速:1mL/min22C,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm5m,对位甲氧基苯胺间位苯甲胺3-氨基-苯甲腈对位氯苯胺间位氯苯胺邻位氯苯胺,pH:2.5pH:7.0,改变流动相pH,可增加柱效(提高灵敏度),.,生化肽5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响(B10)Peptide,流动相:A:水和三氟乙酸B:乙腈和三氟乙酸0-30%B(30min.内)流速:1mL/minUV:254nm进样量:6uL十肽菌素标样S1-S5(疏水性有略微差异)40C,液相色谱柱:ZORBAX300SB-C8色谱柱尺寸:4.6x150mm5m,1.0%三氟乙酸,0.05%三氟乙酸,0.25%三氟乙酸,改变流动相pH,可增加柱效(提高灵敏度),.,食品分析5988-6360EN流动相强度对单糖和二糖分离的影响(FD4),流动相:乙腈/水如图流速:1mL/min示差折光检测器,液相色谱柱:ZORBAXNH2色谱柱尺寸:4.6x250mm5m,果糖葡糖蔗糖Palatinose海藻糖异麦芽糖,乙腈/水70/30乙腈/水75/25,改变有机相%,可增加柱效(提高灵敏度),.,色谱柱技术5988-6468EN有机改性剂和pH对于选择性的影响(TE5),流动相:25mM磷酸缓冲液流速:1.0mL/min.22C,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-CN色谱柱尺寸:4.6x150mm5m,anisidinem-toluidine4-cl-aniline3-aminobenzonitrile3-cl-aniline2-cl-aniline,甲氧基苯胺间位苯甲胺4-氯-苯胺3-氨基苯甲腈3-氯-苯胺2-氯-苯胺,42%甲醇:58%缓冲液30%甲醇:70%缓冲液,pH2.6,pH3.0,改变有机相%,可增加柱效(提高灵敏度),.,色谱柱技术5988-6453ENZORBAXEclipse系列色谱柱的选择性(TE31),液相色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-Phenyl色谱柱尺寸:4.6x150mm5m,流动相:甲醇:水=70:30UV:254nm流速:1.0mL/min.室温,ZorbaxEclipseXDB-苯基ZorbaxEclipseXDB-C8ZorbaxEclipseXDB-C18,1.尿嘧啶2.苯酚3.4-氯-硝基苯4.甲苯5.萘,1.Uracil2.Phenol3.4-Cl-nitrobenzene4.Toluene5.Naphthalene,改变键合相,可增加柱效(提高灵敏度),.,生物制药,液相色谱柱:ZorbaxExtend-C18色谱柱尺寸:2.1x150mm,5um,三氟乙酸和氢氧化铵用于肽类RP-HPLCESI-MS分离的选择性比较SelectivityComparisonofTFAandNH4OHforPeptideRP-HPLCESI-MSAnalysis,流速:0.25mL/min.温度:25梯度:5-60%Bin20min.LC/MS:正离子,ESI-Vf70V,Vcap4.5kV,N2-35psi,12L/min.,300样品:4L(各50ng),三氟乙酸条件:A-0.1%三氟乙酸水溶液B-0.085%三氟乙酸80%的乙腈溶液,NH4OH条件:A-20mMNH4OH水溶液B-20mMNH4OH80%的乙腈溶液,改变有机添加剂,可增加柱效(提高灵敏度),.,生化肽十肽菌素5988-6299EN酸对于反相肽的分离的影响(B16)decapeptide,液相色谱柱:ZORBAX300SB-C8色谱柱尺寸:4.6x150mm5m,十肽菌素S1十肽菌素S2十肽菌素S3十肽菌素S4十肽菌素S5,decapeptideS1decapeptideS2decapeptideS3decapeptideS4decapeptideS5,0.1%三氟乙酸,0.025MH3PO4,改变有机添加剂可增加柱效(提高灵敏度),流动相:A:含相应的酸的水相B:含相应的酸的乙腈0%-30%B(30min.内)进样量:6L肽标样UV:254nm流速:1mL/min40C,.,色谱柱技术流动相对色谱的影响(TE40),液相色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C8色谱柱尺寸:4.6x50mm3.5m,UV:254nm流速:1mL/min.室温,UracilButylparabenNaphthaleneDipropylphthalateAcenaphthene,尿嘧啶尼帕尔金丁酯萘二丙基邻苯二甲酸酯苊,刻度混合:Dial-a-MixA:水B:甲醇,用
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