LC-MS原理以及应用.ppt

基础，优点：高灵敏度，10-7-10-8g，单离子检测速度快到10-12g，测量分子量几分钟或几秒钟，确定子分析范围，混合物新的电离，检测技术，极限：(1(2)重复性稍低的情况下，要严格控制操作条件(3)离子源产生的内存效应、污染等问题。(4)价格有点贵，工作有点复杂(5)质量歧视效果，离子源1。电感耦合等离子体电离(ICP)在此条件下破坏了化合物的分子结构，因此只适用于元素分析。2.电子冲击电离(ei)能提供有机化合物最丰富的结构信息，具有良好的再现性，对其分解规律的研究也是最完善的。缺点是不适用于挥发性和热稳定性低的样品。3.化学电离(ci)适用于色谱和质谱，低压化学离子化源可以在低温度下分析挥发性样品，使用挥发性反应试剂，但只能用于傅立叶变换质谱。4.大气压离子化源(API)液相色谱最常用的电离方法。典型的大气压电离源有三种：大气压雾化(ESI)、大气压化学电离(APCI)和大气压电离(APPI)。大气压离子化源是独立于高真空状态的质谱，因此不同大气压离子化源之间的切换非常方便。5.矩阵辅助激光解吸电离(maldi)主要用于可能达到100000da质量的大分子分析，仅限于用作飞行时间分析器和FT-MS的离子源。特别适合蛋白质多肽等大分子，可以直接从组织样本中提取数据。电喷雾对大气压力化学电离机制：电喷雾使用离子蒸发，而APCI电离在高压放电中发生质子转移，产生m h或M-H-离子。范例流速：APCI来源可以从0.2到2ml/min。电喷雾的流量相对较小，一般为0.2-1ml/min。断裂度：APCI源探针在高温下，热不稳定化合物分解。适用范围：电喷雾有助于分析极性大的小分子和生物聚合物以及其他分子量大的化合物，APCI更适合分析极性小的化合物。多电荷：APCI源不能产生一系列多电荷离子，TMP1，TMP2，旋转泵，废液管，Detector，砂四杆质量分析器2。飞行时间质量分析器3。离子阱质量分析器4。傅里叶变换质量分析器四极质量分析器5。泛磁分析器，多级质量分析通常由惰性气体分子(如氮、氩或氦，选择碰撞的分子离子)完成。中性分子的碰撞将能量传递到离子的这种过程称为碰撞诱导离解(CID)。这种能量传递足以使分子结合破裂，选定的离子将片段离子用于对原始分子离子的结构判断。为什么使用HPLC/MS/MS？不需要衍生。在单一分析中实现确认/量化。在复合/脏矩阵中，使用低检测极限质谱，在空间中，第一类设备用两个质谱仪排成一列。前面列出的串行多级质谱计。第二类使用质量分析器的时间顺序上的离子储存力，该分析器由离子回旋(ICR)和离子阱质量分析器等存储离子的分析器组成。但是不能进行莫离子扫描或中性损失。MS/MS串联偶极质谱比单偶极质谱具有更好的矩阵抗干扰能力和定性能力，比离子阱质谱具有更好的再现性和检测灵敏度，质量范围和分辨率有限的偶极离子阱技术中，在传统qqqqq偶极子上添加了辅助RF，可以进行选择性刺激；或者，从功能上讲，提供qqqqqqqqqqq的多层级联功能四极-早监视之间质量分析方法QMS作为质量过滤器，提供TOFMS作为质量分析程序。离子陷阱-粗监测间质谱将3D离子陷阱用作质量选择器和反应器，将离子陷阱的多级质量分析力和粗监测间质量分析方法的高分辨率线性离子陷阱-粗监测间质量分析方法将线性离子陷阱作为质量选择器和反应器，将线性离子陷阱的高灵敏度多级级联能力和飞行时间质量分析方法结合高分辨率串行四极线性离子肼质量分析器LTQ-FT液，串联质量分析器ThermoFinnigan将LTQ。使用此组合技术获得的分析数据具有超分辨率、准确的质量数和多级质量分析方法等特性。质量分析器的性能特性，qqqq，第一历史剧(Q1)根据设定的质量-霍比范围扫描和选择所需离子。第二个历史剧(Q2)也称为碰撞池，用于收集和传输离子。在选定离子的飞行中引入氮等碰撞气体。第三个四极子(Q3)用于分析碰撞池中产生的碎片离子。Q1选择了特定质量的母离子，Q2碰撞池生成了碎片离子，在Q3中进行了分析。此过程将生成典型的质量分析/质量分析碎片光谱。特定应用，阳离子模式：适用于碱性样品，可以用乙酸或甲酸酸化样品。样品含有氨或含有三次氨时，可以优先考虑阳离子模式。负离子模式：适用于酸性样品，可用氨或三乙胺碱化样品。样品中含有更多的含氯、含溴和多个羟基等强伏电组时，可以尝试负离子模式。离子峰的主要类型1，分子离子峰2，同位素离子峰3，碎片离子峰，分子离子是有机分子被电子轰击后失去电子，带正电荷的离子，m .在纯样品的质谱中，分子离子峰必须具备以下条件：(1)必须是质谱中最高的质量离子；(2)必须是奇数电子离子。(3)在高质量地区，中性碎片(小分子或自由基)合理丢失，产生重要的片段离子。除了同位素离子峰和质子化分子离子(M 1)、钠化分子离子(M 23)和结论分子离子(M R)等准分子离子外，分子离子在质量分析图中必须出现在最高质量。C8H18O化合物，C8H18O的分子量：130，分子离子峰，氮规则，化合物中没有氮或包含偶数个氮原子，则化合物的分子量为偶数；如果化合物含有奇数氮原子，则该化合物的分子量为奇数。2同位素离子峰(M 1峰)，由于同位素的存在，比分子离子峰看到一个质量单位的峰；有时你还可以观察M 2，M 3。即可从workspace页面中移除物件。即可从workspace页面中移除物件。即可从workspace页面中移除物件。，同位素的相对丰富度(强度)，第三，碎片离子峰，有机化合物蒸汽分子进入离子源，受到电子轰击时，热分解产生质量电荷相对较小的碎片离子。正己烷，第一阶段：电荷或自由基的位置，电子电离的第一阶段是分子中原子的最高能级n电子的电子，在每个轨道上电子的电离顺序如下。分子离子的电荷总是分子杂原子(例如氧、氮)或双键作用机理(例如ABCD e-ABCD 2e-分子离子)，第二阶段：化学键的破坏，三种方法：-断裂，-断裂和重排，2-已酮在a-裂解时丢失丁基自由基会产生100%的CH3CO，但丢失甲基的话，C4H9CO的丰富度只有2%。，典型的低质量电荷非碎片离子，3，重排列破坏，