生物质谱技术与方法ppt课件

，质谱和方法，1，质谱，(massspectrometry，MS)是将化合物形成离子和片段离子，根据质量比(m/z)分离，分析成分和结构的方法。结果由质量分析方法(也称为MassSpectrum)显示。根据质谱，可以对有机物和无机物进行定性和定量分析，对生物大分子进行结构分析，对样品的各种同位素比率进行测量，并对固体表面的结构和成分进行分析等。2，生物质谱，(Bio-mass pectrometry，Bio-MS)是生物分子分析的质谱技术。生物质谱必须测量数万甚至数十万个相对分子质量。生物聚合物质谱是在电子能谱电离(ESI)和矩阵辅助激光解吸电离(MALDI)技术完整成熟的情况下实现的。3，thenobelpriinchemistry 2002 forthedevelopmentfmethodsforitificationiandstructureanalysefbiologicalmacromolegistry5、质谱中的多种电离技术都使物质分子失去外部原子电子，形成分子离子，(molecularion，m)，分子离子的化学键持续有规则的破裂，可以形成不同质量的碎片离子(frag mention):m m片段离子中立分子，6也就是说，zeU=1/2mv2。其中：z是电荷数，e是元电荷(e=1.6010-19c)，u是加速度电压，m是离子的质量，v是离子初始加速度后的移动速度。具有速度v的带电粒子进入质量分析器的质量分析器，根据选择的分离方法，最终各种离子按质量比(m/z)分离。7，质谱，质谱包括注入系统，电离系统，质谱和检测系统。为了对离子进行良好的分析，必须避免离子损失，因此样品分子和离子存在并通过的地方必须处于真空状态。质谱的一般过程是通过适当的注入装置获取样品，然后气化。气化后的样品被引入离子源，电离。电离后，离子适当加速后进入质谱仪，分离成不同的m/z。然后到达探测器，生成不同的信号进行分析。8，质量分析器，探测器，样品导入系统，离子源，真空泵，m/z，计算机控制和数据处理，相对丰富，质量分析器的组成，9，data，systemmasssectrum，inlet system电离所需的能量因分子而异，因此每个分子必须选择不同的解离方法。一般来说，能够给样品提供更大的能量，产生更多片段离子的电离方法称为硬电离方法(例如，电子冲击电离，EI)，给样品提供较少的能量，片段离子较少，或者不产生片段离子的电离方法称为软电离方法。，11，生物质谱的代表性离子源，1。电喷雾电离(ESI) 2。离子雾化电离(IonsprayIonization，isi) 3。大气压化学电离(APCI)，4 .矩阵辅助激光解吸电离(matrixassistedlaserdescriptionization，maldi)，5 .快速原子轰击离子化(FastAtomBonbardmentIonization，FAB)，12，离子源是质谱仪的心脏，离子源可以视为电离反应，样品在很短的时间内做出反应，从而快速获得质谱。13、质量分析器、质量分析器是质量分析器的核心，根据质量和电荷比(质量-电荷比m/z，m-离子的质量数，z-离子传递的电荷数)，根据空间的位置、时间的顺序或轨道的稳定性，质量-负荷比(m，14，质量分析器的种类，1。磁质量分析器(单焦点质量分析器，双焦点质量分析器)，2 .四重质量分析器(四重条形过滤器)3。飞行时间质量分析器(TOF)4。离子阱(IonTrap)质量分析器5。离子回旋共振质量分析器，其中2，3，4是目前生物质谱中常用的质谱仪，15，探测器，1。直接电探测器2。电子倍增器3。闪烁探测器4。微通道板，16，计算机控制和数据处理系统，1。监控每个设备的运行状态，实现质量分析器的全自动运行，2 .数据收集和简化。3 .质量数转换，4 .消除底部或相邻组件的干扰。5 .光谱峰值强度归一化，6 .显示高分辨率质谱的要素组成部分，17，7。将质谱峰值强度修正为总离子流。8。光谱累积，平均. 9。输出质量色谱。10 .单离子检测和多离子检测. 11。光谱搜索。18，质谱，质谱时，根据每个离子m/z顺序和相对强度大小记录分析结果的地图是质谱图。地图上离子的质量和相对强度对每种物质都是唯一的，即反映物质的特性和结构特性，因此可以用质谱分析物质的成分和结构。典型的质量分析图是计算机处理后获得的直方图。19、典型的质量分析图是计算机处理的条形图。在此图中，纵坐标表示离子的相对丰富性(在质谱中，最强峰值的高度为100%，此峰值称为位置峰值，表示剩余峰值与基准峰值的比率，也称为相对强度)。显示离子质量比的横坐标表。可以根据峰值位置(杆位置)确定，可以进行性识别。随着相对丰富，可以定量测量。15，28，29，31(基本峰值)，32(分子离子峰值)，33，100，8060，40，20，10，20，30，40，50，m/3494，3495，3496，3496，3497，3498，3499，3500，3501，3502，3503，3497.642396.65413498.6256，3495.6545，3499.6528，203500.6595 ，在质谱中，使用核素12C质量(12C=12.000u)的1/12作为质量单位(u)。1u=(12.00000 gmol-1/6.022141023mol-1)/12，=1.66045410-24g，在生物大分子的质谱中，道尔顿(Dalton，da)1da=1.66310-24g。Da和u的差异约为三分之三，可以在生物质谱中将其视为1Da=1u。，26，质量精度，质量精度是质量精度，即离子质量测量，值m和理论值M0的相对误差：质量精度=m-M0/m