论蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/6论蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定文章标题论蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定摘要采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达996。用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。关键词卵磷脂；纯化；含量；测定1引言卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分1，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源2。卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/6物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度3，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。2实验部分21试剂和仪器蛋黄卵磷脂；中性三氧化二铝；硅胶G；氯仿；甲醇；乙醚；浓硫酸；钼酸铵；30过氧化氢；磷酸二氢钾；层析柱；紫外检测仪；台式平衡记录仪；分光光度计；EYELASB2000旋转蒸发仪。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/622实验方法和结果221蛋黄卵磷脂的提取取12克蛋黄置于150ML的锥型瓶中，加入35ML乙醚，搅拌10MIN，放置20MIN，过滤，于45OC的条件下，用旋转蒸发仪蒸干乙醚，再放入真空干燥器减压干燥20MIN，彻底除尽乙醚，粗提取物离心10MIN，取出下层的卵磷脂，约为2克。222蛋黄卵磷脂的精制在层析柱中装入25克中性三氧化二铝为固定相，将1克提取的卵磷脂溶于氯仿，以91的氯仿甲醇为洗脱液，紫外检测仪接台式平衡记录仪监测收集第二组分4，在氮气气氛中旋转蒸干洗脱液得精制的卵磷脂06克，充氮气冰箱保存。经过精制的卵磷脂用硅胶G板薄层检验只有一个斑点。223卵磷脂含量的测定标准曲线的绘制用消化定磷法测定卵磷脂的含量。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/6按表1中的数据娶浓度为5718MG/ML的磷酸二氢钾标准溶液于小离心试管中，各加入05ML5MOL/L的硫酸，于150160OC的烘箱中消化3小时，冷却，加入30的过氧化氢两滴继续消化1小时，冷至室温，加入46ML022的钼酸铵溶液，再加02MLFSR试剂，于100OC水浴上加热7MIN，于室温下于810NM测定吸光度A，结果列入表1。样品的测定同法测定测定卵磷脂的吸光度，通过回归方程求得卵磷脂中磷的含量，按卵磷脂的摩而质量即可求得卵磷脂的含量。用消化定磷法测定精制卵磷脂的纯度达996。表1消化定磷法的标准曲线数据_NO1234567_精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/6_KH2PO4/ML000050100150200250300KH2PO4/G0000285957188577114414301715P/G0000065213031955260630253909A0000009402100334045005600675_回归方程为Y01753X001072R2099643结论采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，精制卵磷脂的纯度高，可达到食品和医用要求的高纯度。用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量。精品文档2016全新