th17细胞相关细胞因子il17il23与系统性红斑狼疮的相关性研究

TH17细胞相关细胞因子IL17IL23与系统性红斑狼疮的相关性研究摘要目的探究的发病机制,通过测定患者及正常人外周血浆中的以及的表达水平,研究患者体内的以及水平是否异常,并探讨其在疾病中的作用。通过研究有望为患者的治疗在细胞因子方面提供方向。方法组例健康对照组例。采用酶联免疫吸附试验测定血浆中一、的水平,收集整理患者的临床资料及实验室数据。按照患者疾病活动度、有无狼疮肾炎和抗阳性与否以及补体水平进行分组。结果活动期患者血浆中的以及水平明显高于对照组,与非活动组相比,也有明显差异,其具有统计学意义,但非活动组与正常对照组间无统计学意义。狼疮肾炎组和非狼疮肾炎组患者血浆中的工了和水平均高于正常对照组,但一和的水平在。肾炎组和非肾炎组问无明显统计学差异。抗抗体阳性组与阴性组间和一水平也无明显统计学差异。补体水平低值组与正常组问一和水平也无明显统计学差异。但是与补体水平呈一定负性相关关系。结论一和一表达水平在患者活动期血浆中表达有明显增高,提示工和一可能参与了疾病的发生发展过程,可能与疾病的活动度有密切的关系。是否有肾脏损害可能对患者血浆中一和一的表达水平影响较小。抗抗体阳性与否以及补体水平的高低对患者血浆中一和的表达水平无明显相关性。硕士研究生自雪免疫学指导教师高美华教授狼疮肾炎关键词系统性红斑狼疮,哆一一一,一一,一,一,一】一一一一一一一一目录弓言第一章材料与方法病例选择与分组病例选择实验分组主要试剂及仪器主要试剂主要仪器设备实验方法及步骤一白细胞介素一白细胞介素一抗抗体、血清补体水平检测统计学处理第二章结果患者血浆中水平的变化患者血浆中一水平的变化患者血浆中一和之间的关系患者血浆和水平与临床指标问的关系第三章讨论系统性红斑狼疮患者水平与临床意义系统性红斑狼疮患者一水平与临床意义一与一的相关性分析本研究存在的不足及展望结论参考文献综壶苤综述参考文献攻读学位期间的研究成果致谢学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明引言引言系统性红斑狼疮,是一种极具典型性的系统性自身免疫病,以大量的抗体产生,补体激活和免疫复合物沉积为主要特征,导致多个组织器官的损害,临床表现复杂,病情迁延反复,病死率极高。好发于青年女性,发病高峰为岁,男女发病比例为左右。幼年和老年性的男女比例约为。全球的患病率约为一/万人,我国的患病率约为/万人。但各地的患病率为,而异卵双生子问发病率仅为。尽管的发病受遗传因素的影响,但大多数为散发病例。的病因及发病机理至今未明,发病机制复杂,并非单一因素引起,可能与遗传、环境、性激素及免疫等多种因素有关。通常认为具有遗传背景的个体在环境、性激素及感染等因素的共同作用或参与下引起机体免疫功能异常,诱导淋巴细胞的异常、淋巴细胞的过度活化最终导致其免疫方面的应答紊乱是其主要的发病机制。已有研究表明瞳,淋巴细胞的异常可能是发病的重要因素。淋巴细胞包含了三种具有不同职能的细胞亚群,县辅助性细胞、辅助性细胞和调节性细胞,其分泌的细胞因子和在体内的免疫作用各有不同。有研究发现。“,机体存在另一种在分化以及生物学方面与、矛调节性细胞不同的一类淋巴细胞亚型,且细胞,这类细胞促炎症作用很强,其免疫调节和免疫应答的作用越来越受到重视,并与很多自身免疫性疾病的发生和发展有着紧密联系。成熟分化的细胞可以分泌一,一,一等多种细胞因子。在自身免疫性疾病中起关键作用的是,其是细胞的标志性细胞因子。一是诸多炎症因子的起始因子,具有很强的促炎症性,与过敏性与自身免疫性疾病等炎症性疾病有着密切联系。有研究显示一在类风湿性关节炎、多发性硬化症及哮喘等自身免疫性或过敏性疾病的患者体内有高表达,提示一参与了这类疾病的发生或发展。一是一种新发现的异二聚体结构的细胞因子,和卜共用亚单位,结构上和相似。一主要由抗原提呈细胞,分泌。一通过与受体结合发挥作用。近期的研究证实一在自身青岛大学硕士学位论文免疫性疾病的发生和维持中发挥了关键的作用。目前诱导自身免疫性疾病的作用机制还不完全清楚,但大量的研究显示随一是其发挥生物学作用的重要效应因子之一。现在已有研究显示,细胞和一以及一在狼疮鼠模型中有着一定的作用,但是在狼疮患者体内的作用以及在狼疮患者体内的表达、分泌是否存在异常,目前还未得到国内外的公认。以此为基点,本研究通过测定系统性红斑狼疮患者外周血浆中的一以及一的水平,研究患者以及水平异常与否,探讨其在疾病中的作用及意义。根据患者血清中的一和一表达水平的增高与否以及各分组之间一君一的表达水平差别来揭示其与的发生发展及病情变化的关系,对其进行检测还可以为的治疗和病情预测提供新的策略与方针。第一章材料与方法第一章材料与方法病例选择与分组。病例选择系统性红斑狼疮患者例,均来自青州市人民医院风湿疼痛科病房及门诊病人年月一年月,诊断均符合由美国风湿病协会修订的分类诊断标准引。男性例,女性例,年龄卜岁,平均年龄为岁。来自青州市人民医院查体中心的健康对照组例。男性例,女性例,年龄岁,平均年龄为岁。】实验分组见表首先根据系统性红斑狼疮活动指数进行评分,分归入活动组,分归入非活动组,将患者组分为活动组和非活动组两例,其中,活动组为例,非活动组为例。其次根据有无狼疮肾炎,女患者患有严重蛋白尿。尿蛋白/,或者干化学检测有多次尿蛋白,再或有明显的细胞管型可为血红蛋白、红细胞、颗粒或混合型管型,或测算出患者的肾小球滤过率/,这种类型的患者归入肾炎组,如果没有上述表现的患者就归入非肾炎组,将患者组分为肾炎组和非肾炎组,其中肾炎组占例,非肾炎组占。再次根据抗抗体阳性与否,将患者组分为抗抗体阳性组和抗抗体阴性组,其中抗体阳性组为例,阴性组为例。最后再根据补体水平高低,将患者组分为补体水平低值组和补体水平正常组,其中补体水平低的为例,常者为例。表实验的分组情况青岛大学硕士学位论文/离心于早晨采集所有患者和健康查体者空腹血于肝素钠抗凝管中,经分钟,分离出血浆,于低温冷冻保存,等待检测。主要试剂及仪器主要试剂美国公司板美国公司试剂美国公司洗涤液美国公司品美国公司美国公司美国公司液美国公司标标缩准物物止准品稀释液美国公司品稀释液酶酶浓标底底终标样一美国公司酶标板公司美国酶标试剂美国公司浓缩洗涤液美国公司标准品美国公司底物美国公司底物美国公司终止液美国公司标准品稀释液美国公司样品稀释液,欧蒙医学实验诊断股份公司抗核抗体谱检测试剂盒欧蒙印迹法潍坊康华生物技术有限公司补体试剂主要仪器设备全自动酶标仪第一章材料与方法日立全自动生化分析仪日本日立分析仪器有限公司冰箱青岛海尔集团冰箱青岛海尔集团台式低速离心机北京京立恒温水浴箱上海精宏试验设备有限公司微型振荡器上海彭氏实业有限公司加样枪上海求精生化试剂仪器有限公司实验方法及步骤白细胞介素一一检测原理检测试剂盒应用定性双抗体夹心免疫检测技术,用人抗体包被微孔板,制成固相抗体,向包被人一抗体的微孔中加入一,再与辣根过氧化物酶标记的一抗体结合,形成酶标抗体复合物,经洗涤之后加入底物四甲基联苯胺显色。底物在的作用后变为蓝色,然后加入硫酸发生终止反应后颜色变为黄色。颜色的深浅与所测样品中的含量呈正相关关系。用酶标仪在最大吸收峰波长下测定其吸光度值值,通过计算得出的标准曲线计算样品中一的浓度。准备从冷藏环境中提前取出试剂盒和标本,平衡至室温,大约需要。然后将沈涤液用蒸馏水进行稀释,稀释倍数为倍。稀释标准品在只小试管中稀释标准品,首先在第一管中加入标准品稀释液,第二至第七管中各加入标准品稀释液,在第一管中加标准品然后在第一管中取出加入到第二管中充分混匀,然后再从第二管中取加到第三管中,以此类推。稀释后各管量都为,浓度分别为/、/、/、/,/,/其顺序为一。操作步骤取出实验所用的微孔板。分别设上空白孔,标准品孔和待测样品孔。将已稀释好的标准品从至分别加入到酶标包被板上,待测样品孔中先加入样品稀释液,然后再加入待测样品,即待测样品倍稀释。将样品加入到孔的底部,尽量不触及孔壁,并轻轻晃动混匀。将反应板放于恒温水浴箱中水浴。实验沈板过程应当用尽甩干板内所有液体,每个反应板孔内加入洗涤液,静放一会,然后甩尽孔内的洗涤液,并在吸水纸上拍干,再向孔内加入洗涤液,再青岛大学硕士学位论文甩尽,这样重复洗涤次,最后拍干。向每个反应孔中再加入酶联物,放在微型震荡器上震动,然后用封盖纸封住板孔,放于恒温水浴箱水浴。洗板过程甩板应当用尽甩干板内所有液体,每个反应板孔内依次加入洗涤液,静放一会,然后甩尽孔内的洗涤液,并在吸水纸上拍干,再向孔内加入洗涤液,再甩尽,这样重复洗涤次,最后拍干。再向每孔中加入底物和各肛,放于微型震荡器上震动,置室温避光反应。最后向每反应孔中加入终止液,放于微型震荡器上轻轻混匀。然后在内于波长处读取各反应孔吸光度的值。结果判读以标准品浓度作为纵坐标,相应吸光度值为横坐标描点,以平滑曲线将各坐标点连接起来,画出标准曲线。通过各待测标本的值和标准曲线即可得出样品相对应浓度,再乘以稀释倍数就得出样品的实际浓度。如图/图浓度的/标准曲线一耘准品浓度/参数方程/一白细胞介素一检测原理检测试剂盒应用定性双抗体夹心免疫检测技术,用人工一抗体包被微孔板,制成固相抗体,向包被人一抗体的微孔中加入一,再与辣根过氧化物酶标记的一抗体结合,形成酶标抗体复合物,经洗涤之后加入底物四甲基联苯胺显色。底物在的作用后变为蓝色,然后加入硫酸发生终止反应后颜色变为黄色。颜色的深浅与所测样品中的一的含量呈相关关系。然后用酶标仪在最大吸收峰波长下测定其吸光度值,通过计算得出的标准曲线计算样品中一的浓度。第一章材料与方法准备工作从冷藏环境中提前取出试剂盒和标本,平衡至室温,大约需要。然后将洗涤液用蒸馏水进行稀释,稀释倍数为倍。稀释标准,第二品在只小试管中稀释标准品,首先在第一管中加入标准品稀释液至第七管中各加标准品稀释液,在第一管中加标准品然后在第一管中取出加入到第二管中充分混匀,然后再从第二管中取加到第三管中,以此类推。稀释后各管量都为,浓度分别为/、/、/、/、/,/,/其顺序为一。操作步骤取出实验所用的微孔板。分别设上空白孔,标准品孔和待测样品孔。将已稀释好的标准品从至分别加入到酶标包被板上,待测样品孔中先加入样品稀释液,然后再加入待测样品,即待测样品倍稀释。将样品加入到孔的底部,尽量不触及孔壁,并轻轻晃动混匀。将反应板放于恒温水浴箱中水浴。实验洗板过程应当用尽甩干板内所有液体,每个反应板孔内加入洗涤液,静放一会,然后甩尽孔内的洗涤液,并在吸水纸上拍干,再向孔内加入洗涤液,再甩尽,这样重复洗涤次,最后拍干。向每个反应孔中再加入酶联物,放在微型震荡器上震动,然后用封盖纸封住板孔,放于恒温水浴箱水浴。洗板过程甩应当用尽甩干板内所有液体,每个反应板孔内加入洗涤液,静放一会,然后用劲甩尽孔内的洗涤液,并在吸水纸上拍干,再向孔内加入洗涤液,再甩尽,这样重复洗涤次,一最后拍干。再向每孔中加入底物和底物各肛,放于微型震荡器上震动,置室温避光反应。最后向每反应孔中加入终止液,然后放于微型震荡器上轻轻混匀。最后在内于波长处读取各反应孔吸光度的值。结果判定以标准品浓度为纵坐标,以相应吸光度值作为横坐标描点,以平滑曲线将各坐标点连接起来,画出标准曲线。通过各待测标本的值和标准曲线即可得出样品相对应浓度,再乘以稀释倍数就得出样品的实际浓度。如图青岛大学硕士学位论文。二专一留凸口图浓度的标准曲线一嘱准品诔度注参数方程抗抗体、血清补体水平检测抗抗体使用抗核抗体谱检测试剂盒欧蒙印迹法来检测的。试剂来自欧蒙医学实验诊断股份公司。血清补体水平是用日立全自动生化分析仪,采用速率散射比浊法检测患者的血清、水平。试剂来自潍坊康华生物技术有限公司。统计学处理采用和统计软件进行分析,所有计量资料均用,两组间结果比较采用独立检验、单因素方差分析定量资料和独立样本的秩和检验、双变量相关与回归分析。规定双侧为有统计学意义。尸以/表示该差异在统计学上有极其显著性。现表示该差异不具有统计学意义。第二章结果第二章结果三石禾弟一早一、患者血浆中水平的变化患者血浆中一水平与疾病活动度的关系活动组、非活动组患者和正常对照组的血浆一表达水平见表和图。有表和图可以得出活动组患者血浆一水平明显高于非活动组与常对照组和而非活动组患者血浆一水平与常对照组相比,未见统计学差异。表患者血浆的表达水平注与常对照组比与非活动组比与正常对照组比如与非活动组比妯水平/图活动组和非活动组患者血浆一水平患者血浆一水平与评分的相关性分析患者血浆一水平与评分呈直线相关关系,见图。患者肾脏损害与血浆一水平的关系非肾炎组和肾炎组患者血浆水平见表和图。肾炎组和非肾炎组患者血浆一水平较常对照组明显增高,有统计学意义和但在肾炎组和非。肾炎组自表达差异无明显统计学差异。青岛人学硕学位论文一启一牛卫卜。一评分图患者血浆一水平与评分的散点图表患者肾炎组和卜肾炎组血浆一的表达水平注与常对照组比与正常对照组比,与正宣埘曩组比璇与正窜对臣组比一工一/水。正组别图肾炎组和非肾炎组患者血浆一水平二、患者血浆中一水平的变化患者血浆一水平及其与疾病活动度的关系活动组、非活动组第二章结果患者和常对照组血浆一表达水平见表和图。活动组患者血浆一水平均较非活动组和正常对照组明显增高非活动组患者血浆一水平与常对照组相比,差异未见统计学意义。表患者血浆一的表达水平注与正常对照组比襻与卜活动组比璇与正富埘匣组七,与幸皤动组止一水一平图活动组与活动组患者血浆一水平患者血浆一水平与评分之间的相关性分析患者血浆一水平与评分之、自呈直线相关关系,见图。患者血浆一水平与肾脏损害的关系患者肾炎组与非肾炎组血浆一水平从见表和图中可以表明。患者肾炎组与非肾炎组血浆一的水平均较常对照组的表达水平有明显增高,具有明显的统计学意义可是在患者的肾炎组和非肾炎组问的表达却无明显统计学差异。青岛人学硕十学位论文一吣牛盆评分图患者血浆水平与评分的散点图表肾炎组与。肾炎组患者血浆水平注与正常对照组比一一/水、/平图。肾炎组与卜肾炎组患者血浆水平三、患者血浆和水平间的关系患者血浆和一表达水平无明显直线相关关系,。但如果把所有的受试者作为一个研究整体,可以看到血浆一与一表达水平呈直线相关关系,由图可知我们又做了直线回归分析,发第二章结果现二者之问存在直线回归关系,回归方程为其中轴代表一表达水平,轴代表表达水平。一/牛卜水平/图所有参与受试者血浆的与一水平的散点图四、患者血浆一和水平与密切相关的临床指标间的关系患者血浆和一水平与抗抗体之问的关系通过试验检测到的数据,我们发现患者血浆一和一水平在抗阳性组和阴性组问的差异没有统计学意义,见表,图与图。表患者血浆和一水平与抗抗体的关系一一/水一平图抗抗体阳性患者与阴性患者一水平青岛人学硕十学位论文,、一/水。平组组图抗抗体阳性患者与阴性患者一水平患者血浆一水平与补体水平呈负性相关关系一,患者血浆一水平与补体水平也呈负性相关关系一,但是都与补体水平无相关性,见表。表患者血浆和一水平与相关指标的关系患者血浆一水平与补体水平相关性分析,见图第二章结果一,一召/暑三补体水平图患者血浆水平与补体水平的散点图患者血浆一水平与补体水平相关性分析,见图一目。一补体水平/图患者血浆一水平与补体水平的散点图青岛大学硕士学位论文下匕第三章讨论弟二早系统性红斑狼疮,是一种全身多个器官和组织都能引起病变的自身免疫性疾病,一般在年轻育龄妇女和青壮年多发,发病机制还不明确,目前认为与之有关的因素有很多,像遗传、环境、精神等。全球的患病率约为/万人,而我国的患病率却高达/万人。因为其高发病率、特殊的发病年龄以及治疗所需的时间长,给广大患者以及他们的家庭带来了非常大的痛苦和沉重的经济负担,众多研究已经发现在人类发病机制中存在潜在作用的可能是细胞来源的细胞因子。目前的发病机制还不是十分清楚,很多观念是认为存在于淋巴细胞和淋巴细胞数量以及功能上的异常,而且针对淋巴细胞和淋巴细胞的一些治疗在缓解病情上也有很明显的作用,但遗憾的是,这些治疗具有比较大的副作用。因此,如何减轻并尽可能的解决这些治疗所带来的副作用,制定出具有针对性并且效果显著的治疗方法就成了科研人员以及所有临床医生的共同心愿。然而要使这样的愿望得以实现,就需要对的发生发展过程有一个更为清楚的认识。一群新型细胞细胞,近年来被发现其在自身免疫性疾病发病过程中起着重要作用,可能是导致自身免疫性疾病发生发展的重要因素。同样发现,一在细胞的分化以及增殖过程中,起着重要作用,而细胞分泌的主要细胞因子则是。现在认为一是由一独立的细胞亚群所分泌,这一亚群细胞既不同于也不同于,它们不表达一或,却分泌高水平的一,细胞才因此而来。“。有些自身免疫性疾病,像、系统性硬化、银屑病及哮喘等患者体内大都有一的高表达,提示这类疾病的发生或发展很可能有一的参与。有报道旧称活动期患者外周血经完全刺激培养后,一蛋白水平明显升高,与活动指数呈正相关。然而等报道在患者血清中未测到一水平升高,相反却发现系统性硬化患者血清中水平明显升高。近期的研究证实,在自身免疫性疾病的发生和维持中发挥了关键的作用。目前诱导自身免疫性疾病的作用机制还不完全清楚,但大量的研究显示是其发挥生物学作用的重要效应因子之一。近期很多研究叫力也证实一等细胞因子在患者体内有高表达。目前高水平的一以及一是否第三章讨论存在于患者体内仍有待进一步的证实。目前对细胞及其相关细胞因子在患者中的研究还不是很多,且研究结果各有不同,为了更深一步了解细胞在发生发展过程中所起到的作用,为了为临床提供更好的治疗的方案,因此我们把这两种细胞因子和联合起来,对细胞相关细胞因子和在患者中的表达水平其临床意义进行了相关研究。本研究通过检测方法对患者血浆中和的水平进行了检测,同时对其临床意义进行了相关研究,下面是本研究的内容系统性红斑狼疮患者水平与临床意义本研究通过酶法对患者血浆中一的含量进行检测,按照患者疾病活动度、肾炎与否和抗阳性与否以及补体水平来分组。结果显示活动期患者血浆中的一的表达水平明显高于对照组和非活动期组,而非活动组与正常对照组一的水平大致相当,无统计学意义。同时将患者一表达的水平与疾病活动度作了相关研究,研究结果发现两者之白存在正相关关系,这一结果说明在疾病的发生发展过程中起了一定的作用,并且很可能与疾病的活动度有密切的关系。为进一步明确血浆一水平和疾病活动度这两者之问的关系,我们将一的水平和评分做了相关性分析,结果发现二者之间存在着正直线相关关系,说明患者血浆一水平与疾病活动度有着密切关系。为了了解肾脏的病变与否对患者血浆一水平能否产生影响,我们将肾炎和非肾炎患者进行分组,通过酶标实验分别测两组标本的一水平,结果发现狼疮肾炎组和非狼疮肾炎组患者血浆中的水平均高于正常对照组,但一的水平在肾炎组和非肾炎组问无明显统计学差异,结果提示肾脏是否有损害可能对患者血浆中的一水平影响较小,而且不会因肾功能的下降导致一体内升高。本研究同时将患者按抗阳性与否以及补体水平高低值进行了分组。以了解这些临床指标有差异的患者,他们之间的一的表达水平是否有一定的统计学意义,结果显示,抗抗体阳性组与阴性组间水平无明显统计学差异。补体水平低值组与正常组问工水平也无明显统计学差异,这些可能提示是否有抗抗体阳性与否、补体水平的高低与否对患者血浆中一的表达水平影响较小。但患者血浆中的一水平与补体水平呈负青岛大学硕士学位论文性相关关系,这说明补体作为一项与疾病活动度有明显相关性的指标,其证实了血浆水平和疾病活动度的相关性。但是,由于本项实验收集标本量有限,可能与真值之间存在一定的误差,与有些研究印的结果不符,期待指正。有以上可以得出本项研究表明患者体内一水平的表达存在异常,与疾病活动性密切相关同时发现是否有肾脏损害可能对患者血浆中的水平影响较小,而且不会因肾功能得下降导致一体内升高。但细胞分泌的细胞因子一在疾病的发生发展过程中到底怎样发挥其作用,目前还没有定论,仍有待进一步深入的研究与探讨。系统性红斑狼疮患者水平与临床意义一作为一家族中的新成员,它主要是由经过激活的抗原递呈类细胞所分泌产生的,在其分子结构上,一与一共同拥有亚基,不过两者都具有它们不同的,分别具有其鲜明特征的独特的亚基和两者在生物学应答方面有明显的不一致性第一一是细胞的相关细胞因子,然而一却认为是细胞的相关细胞因子。早期研究可以表明在细胞的增殖分化过程中细胞因子一是起着重要作用的,但是随后的研究却表明初始细胞并不表达受体一,因此,在初始细胞向增殖分化过程中一在初期是没有可能发挥作用的,但细胞后期的增殖与存活中一是一定起着重要作用的险。有研究表明心,一与一联合可以诱导胸腺与人脐带血中的细胞,使这一细胞向着细胞进行转化,所以,对于细胞的增殖与分化是起着重要作用的,是必不可少的细胞因子。同样,与研究细胞因子一一样,本研究也通过酶法对患者血浆中一的水平进行了检测,按照患者疾病活动度、肾炎与否和抗阳性与否以及补体水平来分组。结果显示活动期的患者血浆中一的表达水平明显高于对照组与非活动期组,而患者非活动组一的水平与正常对照组水平相当,没有统计学意义。同时我们此次研究将一表达的水平与疾病的活动度作了一定的研究,发现两者之间存在正相关关系,这说明一在疾病的发生发展过程中起了一定的作用,很可能与疾病的活动度有密切的关系。为进一步明确血浆水平和疾病活动度这两者之间的关系,继而我们将的水平和患者的第三章讨论评分做了相关性分析,结果发现二者存在着正直线相关关系,说明患者血浆一水平与疾病活动度很可能有着密切的关系。而且为了了解肾脏的病变与否对患者血浆一水平能否产生影响,故此,我们将患者分为肾炎和非肾炎组,通过酶联免疫吸附试验测两组标本的一水平,结果发现发现狼疮肾炎组和非狼疮肾炎组患者血浆中的一水平均比正常对照组的水平高,但是一的水平在肾炎组和非。肾炎组间并无明显统计学差异,这些提示肾脏是否有损害可能对患者血浆中的一水平影响较小,而且不会因肾功能的下降导致一体内升高。本研究同时将患者按抗阳性与否以及补体水平高低值进行了分组。以了解这些临床指标有差异的患者,他们之间的的表达水平是否有一定的统计学意义,结果显示,抗抗体阳性组与阴性组问一水平无明显统计学差异。补体水平低值组与正常组间一水平也无明显统计学差异,这些可能提示是否有抗抗体阳性与否、补体水平的高低与否对患者血浆中一的表达水平影响较小。但患者血浆中的一水平与补体水平呈负性相关关系,这同时也说明补体作为一项与疾病活动度有明显相关性的指标,其也证实了血浆一水平和疾病活动度之问有相关性。但是,由于本项实验收集标本量有限,可能与真值之间存在一定的误差,与有些研究嗣的结果不符,期待指正。有以上可以得出患者体内一水平的表达存在异常,与疾病活动性密切相关同时发现是否有肾脏损害可能对患者血浆中的一水平影响较小,而且不会因肾功能得下降导致一体内升高。但细胞因子一在疾病的发生发展过程中怎样发挥作用,目前还没有定论,有待进一步深入研究与探讨。与的相关性分析本项研究显示与一两者在患者体内的表达存在异常,但两者之问存在怎样的联系,还不是很清楚,于是就对两者进行了相关性分析,结果发现两者之间无相关关系但是将所有参与的受试者作为一个整体进行研究,可以得出血浆一和一之间呈正直线相关和直线回归关系。有研究发现,的生成是有赖于一激活的毪型,但本研究发现患者体内的一与一不存在相关关系,考虑原因可能如下因为体内研究存在较多的影响因素,并且不易青岛大学硕士学位论文掌握,可能会受到很多不可避免的抵抗或协同因素的影响,而体外实验却相对简单,容易控制,因而出现不一致的结果另外,当将所有受试者作为一个相对的整体进行研究时却发现二者存在很大的相关性,出现这样的结果,很可能与研究样本量的不足有一定关系。因此,患者体内的细胞因子和,两者之间是否存在相关性,需要进一步的研究与证实。综上所述,本研究通过对患者血浆中的一和一水平进行的检测和对其临床意义的初步探讨,发现患者体内的和水平有明显升高,并且与疾病活动度有明显相关性,提示一和一在发病过程中起重要作用,其水平的高低直接反映了疾病的活动性。而且有更多研究表明瞳细胞及其相关细胞因子在患者体内中表达率升高,可能参与了的病理过程。但是对于其在发病过程中的意义还没有定论。希望有更多的研究者致力于这方面的研究,尽可能的探究细胞及其相关细胞因子在发病机制中的确切作用,为的治疗提供新的方向,为更多的以及其他自身免疫性疾病的患者解除痛苦。本研究存在的不足及展望本研究通过酶法对一与一在患者血浆中的表达水平进行了检测,同时对其临床意义做了初步探讨,提示细胞及其相关细胞因子一与一在的发生发展过程中起到了一定的作用,但本研究存在一定的不足,它仅对患者的以及的蛋白水平进行了检测,因为实验条件的限制,没有同时对患者中一和一的表达水平以及患者中的细胞频率进行检测和比较。因此,今后在条件完善的情况下,将会采用胞内染色和流式细胞技术直接检测患者体内细胞频率表达的变化,以求更好的,更明确的反映细胞在患者中的变化及其临床意义。目前对细胞及其相关细胞因子在患者中的研究越来越多,但其在发病机制中的意义没有定论。希望越来越多的关于细胞及其相关细胞因子在发病过程中作用及意义的研究被做,期待更多的体内和体外研究能够阐明的发病机制,为治疗提供一个全新的、有效的治疗途径,为更多的以及其他自身免疫性疾病的患者解除痛苦结论结论本研究可以得出以下结论和表达水平在患者活动期血浆中表达有明显增高,提示和可能参与了疾病的发生发展过程,可能与疾病的活动度有密切的关系。是否有。肾脏损害以及抗抗体阳性与否、补体水平的高低与否可能对患者血浆中一和的表达水平影响较小。通过此研究我们可以在的细胞因子治疗方面有进一步突破,进一步明确的发病机制,为患者以及他们的家庭带来更大的福音。青岛大学硕士学位论文参考文献,】【刘冠贤,徐涛,董光富,等白细胞介素在狼疮性肾炎外周血单个核细胞上的表达及意义中国实用内科学杂志,】,一,一一,一,【】,一【,】,徐雪,邹和建,吕玲系统性红斑狼疮患者外周血一表达及其与疾病活动性的关系】复旦学报医学版,参考文献,】高丽霞,郭惠芳,马丽艳,等系统性红斑狼疮中细胞相关细胞因子的变化】临床荟萃,张静,慈春增,王晓东,等系统性红斑狼疮患者血清中一的检测及临床意义现代生物医学进展,一,朱广婷,李芳细胞及自介素在系统性红斑狼疮发病机制中的作用泰山医学院学报,。一,王晓,柴华旗一和一在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达水平及其意义苏州大学硕士论文,一,。,一【,一,一夕青岛大学硕士学位论文一,一,综述纫细胞及其相关细胞因子与系统性红斑狼疮的研究新进展系统性红斑狼疮,是一种复杂的、病情迁延反复的、有多种因素相互作用而引起的多个脏器受累的自身免疫性疾病,病因不明确,发病机制十分复杂,现在认为是有淋巴细胞的异常、淋巴细胞的过度活化最终导致机体免疫方面的应答紊乱是其主要的发病机制。淋巴细胞是有群具有不同功能的细胞亚群组成的,幼稚的淋巴细胞可以分化为辅助性细胞、辅助性细胞以及调节性细胞,这三种淋巴细胞分泌的细胞因子以及其在机体内起到的免疫方面的作用各有不同。最近研究发现,机体还存在一种在分化以及生物学方面与、和调节性细胞这三种细胞有所不同的另一类淋巴细胞亚型,即细胞,这类细胞具有较强的促炎症作用,其在机体的免疫方面的作用也越来越受到重视,特别是在免疫应答和免疫调节方面,并与多种自身免疫性疾病的发生和发展有着密切的关系。成熟分化的细胞可以分泌,一,一等多种细胞因子。其中一在多种自身免疫性疾病中起关键作用,可以作为细胞产生的标志性细胞因子。大量实验及临床研究表明,一与有着明显相关性,等对患者和正常对照人群的血浆水平进行检测后,通过实验他们发现患者血浆中一的水平有比较明显的升高乜叫。同样等学者研究也发现在患者的尿液中也有相关细胞因子水平的升高瞄。此外,通过一些动物实验,像利用低剂量肽耐受治疗或用抗抗体抑制能够产生的细胞,这样能够在缓解狼疮的病情上有一定明显的作用。为进一步研究寻求细胞及其相关细胞因子与发病机制之间的关系,近来受到研究者和很多临床工作者的关注,成为新的比较具有探讨性的课题。掘此,本文就细胞的分化发育及其相关细胞因子在中的作用方面予以综述,以进一步的探求的发病机制。为更多的自身免疫病患者牟取福音。一、细胞的发现在一些传统性的自身免疫性动物模型,像自身免疫性脑脊髓炎,和胶原诱导的关节炎中,我们发现了细胞,一般来说,我们认为一诱导这些疾病的发生,并且是有细胞介青岛大学硕士学位论文导的睛,因此曾将分泌的细胞归入到细胞。其中这种认识是基于一小鼠或抗一抗体治疗可以减轻或对和产生抵抗。但有关分泌细胞因子一的这类细胞在一些自身免疫性疾病实验结果中显示体内注射亚单位抗体抗一,敲除一基因,或者是敲除受体基因一后,可以一定程度上降低自身免疫性疾病的发生率或者可以减轻疾病的严重程度。和一有许多的生物学功能相似之处,因为它们共享一和亚单位,当一基因被敲除后,不会影响到自身免疫性疾病的发生与否,而当敲出一基因后,可以看到能够较明显的降低自身免疫性疾病的发生率和减轻疾病的严重程度。进一步研究发现,主要作用是诱导细胞分泌。将正常小鼠输入来自小鼠产生的细胞后,可诱导出严重的,而输入细胞却不能诱导出。最近几年来有研究分析了调控细胞分泌一的信号通路阳,以上研究均提示找到了细胞的新亚群,就是产生的细胞。由于这类细胞主要分泌一,刁被称为细胞。二、影响细胞分化发育的生物学因素及其分化调节的机制在机体不同阶段的免疫应答中,其中细胞起到了十分关键的作用,细胞可以通过不同分化途径获得特定的生物学功能。其中分化方向的不同是有多种因素控制的,其中主要的因素有抗原的性质、局部环境中的细胞因子等。其中在细胞的分化与调节中起到重要作用的是细胞因子。原始细胞在与干扰素的诱导下,可以分化为细胞,分泌参与细胞免疫。原始细胞在诱导下分化为细胞,分泌细胞因子一、一和一,从而参与体液免疫。,单独存在的转化生长因子,诱导原始细胞分化成调节性体细胞分泌因子,从而参与免疫调节。原始细胞在和一共同存在时分化为细胞,其分泌细胞因子一和,其参与炎症反应和大多数的自身免疫性疾病。细胞的分化发育与和细胞相似,受到多种因素的调节,分为正性和负性调节因素,其中最重要的是细胞因子和转录因子。正性调节因素在细胞分化中起正性调节的主要细胞因子是、一、一以及一。早期一些研究认为,细胞发展分化的重要的细胞因子可能是工一,并曾试图建立/细胞这样的分化轴,其中年的两项研究表明通过抑制性抗体中和和相关细胞因子后,发现一只能诱导到的细胞产生。并且培养基在只有和而没含有抗原递呈细胞,时,初始细胞不能被一诱导而产生。同时结合等报道初始细胞一的表达不能被方法检测到,可知初始细胞并不表达一,因此一发挥作用是不可能的。因此,在细胞最初的分化过程中并不依赖一的参与,而是依赖于诱导一表达的因素或者是存在非一介导的细胞产生的途径。现在研究已经明确,初始细胞的分化是有和一完成启动的,并且并不依赖于,但一水平在存在时可明显增强,其作用机制目前尚不明确。另外,像细胞因子、等也在细胞的分化起始阶段起到促进和的诱导作用,一却在细胞的后期分化中爿起到稳定分化的作用。等研究发现引,细胞通过抑制细胞产生一和,而促进其分泌,当加入抗一的中和性抗体时,细胞分泌一的量则会受到相应的抑制。基因敲除和一些转基因的小鼠实验发现,一基因敲除小鼠的细胞分泌一的能力出现明显的下降,而转基因的小鼠的细胞分泌一的能力则有明显的增强。在比较典型的一联合一的模式中,其中一主管细胞的分化方向,它可以通过在细胞膜上的受体/一使下游分子、活化,而一在促进细胞分化的作用上比它抑制和细胞活化的作用强很多,当外源性给与时一方面可以阻断所有/活和细胞的分化发育途径,另一方面可以通过细胞膜上的一化下游分子的/,从而进一步加速细胞的分化。青岛大学硕士学位论文最近几年研究发现,还存在有一种细胞因子一,成高表达水平的状态存在于细胞中,成中低水平表达存在于和细胞中。一可以有细胞能通过自身分泌产生,从而加速其自身的分化过程。一或一基因敲除小鼠的动物模型实验研究显示,即使同时存在和一的条件下也不能诱导细胞的完全分化,用流式细胞术检测细胞的数量也有明显的减少。同时,在缺陷,一和同时存在的条件下也可促进细胞的分化,同时还能释放。这些都表明在一联合的经典模式中,一仍然是细胞完全分化的必须细胞因子。体内一些研究表明,在缺乏一的情况下,的生成可被抑制,同时还对产生抵抗。综上所述,细胞的分化过程可以分为两种途径一依赖途径和/一依赖途径,有研究发现,两种途径之间是有关联的。其中,使用一拮抗剂可以抑制介导的细胞生成,但一是通过培养基中的别的细胞产生的一起作用还是通过细胞组成性表达时起作用,目前还不清楚。虽然初始细胞对不能发生反应,但初始细胞在加入/预刺激后再加入一,细胞的生成就可加速。一不能被初始细胞表达,而能被一诱导初始细胞时表达引,所以由介导的细胞可能是通过这种机制起作用的。通过上述研究得知,一/可诱导初始细胞向细胞转化,而细胞的最初分化阶段一并未参与,但其在细胞的后期分化过程中的增殖、分化和存活起着十分重要的作用。负性调节因素细胞的增殖分化是有很严密的调控机制调控的,除了上面讲到的正性调节因素外,还存在很多的负性调节因素,在细胞的增殖分化中正性调节因素和负性调节因素起着共同的影响和调节作用。细胞分化的关键分子是,能通过抑制下游信号转导因子的磷酸化,从而阻断对受体的作用,进一步干扰一诱导细胞的分化。型和型可以通过的活化而诱导的表达和产生细胞。通过相应的反馈机制,能加速的表达以及细胞的分化,同时可以抑制一的分泌。等哪研究发现,有缺陷的细胞分泌的明显升高,同时发现提高或的浓度可以有效的阻断一的分泌,而一些实验小鼠其基因被敲除,其细胞分泌的经证实也较正常细胞的高。还有一种细胞因子一,其能促进原始细胞向细胞的分化,并且能够抑制向细胞的分化,这是细胞很重要的一种表型特征。等乜叫发现,使用抗中和一中和一后可以一定程度上增强一介导的细胞相应的增殖,而加入一可抑制细胞的增殖。近来发现同样也是影响细胞分化的一种抑制因素。等乜妇发现存在缺陷的小鼠,其一分泌增强,抑制的生成是通过,但能够诱导表达,促进细胞向细胞转化而小鼠如果缺乏,则会出现严重的系统性自身免疫性疾病,这与细胞减少可能有关。体内研究发现一在促进细胞的增殖和维持中起着重要作用瞳,小鼠如果缺乏或则不能产生相应的细胞,从而会出现系统性自身免疫病乜。州,这可能与一信号的缺失,而引起细胞的减少和细胞增多有关。通过以上论述可知,一/在调节细胞与细胞平衡过程中起到重要作用。一与一同属一个家族,是由和构成的异源二聚体,在一的表达过程中起负向调节的作用心置,可使细胞的炎症反应得到抑制瞳引。近来研究发现,蛋白是一受体与一受体所共有的,提示一可能与一通过受体竞争来抑制细胞的分化。还有,维甲酸,作为维生素的代谢产物,对形成细胞具有较强的抑制作用,同时有促进细胞分化的作用娃。细胞因子信号转导负调控因子,是细胞因子依赖性磷酸化的重要调控因子,在介导的磷酸化反应中起负向调节作用,能够抑制细胞的产生与分化。有研究显示,可以在微环境中同时存在一、和一的条件下抑制细胞的产生与分化,当缺乏时,细胞则可被诱导产生较多,同时伴有的高度磷酸化皑。三细胞及其相关细胞因子的生物学作用青岛大学硕士学位论文细胞在机体免疫反应中主要是通过其分泌的细胞因子来发挥作用的