下沙学生宿舍中桶装饮用水微生物检测 论文正文

毕业论文（设计）题目下沙学生宿舍中桶装饮用水微生物检测指导老师专业班级生物技术与应用0701姓名学号2010年5月30日摘要目的了解下沙高教园区学生宿舍中桶装饮用水的卫生质量，为提供良好的饮用水，预防食源性疾病，保障学生的身体健康提供科学依据。方法采用细菌总数检测法和大肠菌群检测法，对下沙高教园区内的5个品牌的桶装饮用水，25个样品进行检测。结果根据GB192982003瓶（桶）装饮用水卫生标准判定，3个生活区学生喝的桶装饮用水合格，2个生活区学生喝的桶装饮用水不合格。结论下沙学生宿舍中学生喝的桶装饮用水的卫生质量不容乐观。关键词桶装饮用水；卫生质量；细菌总数；大肠菌群；检测目录引言11实验材料111各种桶装饮用水112试剂213培养基2131营养琼脂培养基的配制2132乳糖胆盐发酵管的配制2133伊红美蓝琼脂的配制3134乳糖发酵管的配制314实验仪器32实验方法421细菌菌落总数的检测422大肠杆菌的检测43结果与分析531实验结果532实验分析8321检测标准8322各水样与标准的比较84讨论941不符合标准的原因942建议9参考文献11引言所谓饮用纯净水是指其水质清纯，不含任何有害物质和细菌，如有机污染物、无机盐、添加剂和各类杂质等，有效的避免了各类病菌入侵人体，其优点是能有效安全地给人体补充水份，具有很强的溶解度，因此与人体细胞的亲合力很强，有促进新陈代谢的作用1。它是采用离子交换法、反渗透法、精微过滤及其他适当的物理加工方法进行深度处理后产生的水2。饮用纯净水以其纯净不含杂质及添加剂,深受广大消费者的喜爱。中国饮用纯净水市场发展迅速,现今各企事业、社会团体、群众机构等所需的饮用水几乎都是桶装饮用水，而且正以每年20的增幅进入寻常百姓家36。随着社会经济的不断发展，我国水源污染日趋严重，自来水厂的净水工艺、输配水设备和二次供水与广大市民饮水要求之间的矛盾已成为现今社会的一大问题7,8。在物质生活水平不断提高的今天，饮用纯净水的需求量不断增加，消费者对饮用纯净水卫生质量要求标准越来越高9。因为如果饮用纯净水微生物指标超标,人饮用后会引起食物中毒,其主要症状为急性胃肠炎症状如呕吐、腹痛、腹泻等。目前饮用纯净水主要是对细菌菌落总数和大肠菌群进行检测，以此作为判定饮用纯净水被污染程度的指标来评价水的卫生质量10。跟其他地区一样，下沙高教园区校园内都以桶装饮用水为主，尤其是学生寝室内。而不符合标准的桶装饮用水对机体健康产生一定的损害，桶装饮用水的质量与人的健康密切相关，因此研究桶装饮用水的质量状况具有现实的意义11。为掌握下沙校园内桶装饮用纯净水的卫生质量状况，以确保同学们的饮水安全卫生，本实验对其进行抽样检查，主要进行细菌总数和大肠菌群的检测12。1实验材料11各种桶装饮用水花家山泉（成蹊苑生活区学生经常喝的水）大唐贡泉（桃李苑生活区学生经常喝的水）虎跑梦泉（中国计量学院生活区学生经常喝的水）云顶山泉（浙江警官职业技术学院生活区学生经常喝的水）黄浦源泉（杭州电子科技大学生活区学生经常喝的水）12试剂75乙醇、09灭菌生理盐水、革兰氏染色液13培养基营养琼脂培养基、乳糖胆盐发酵管、伊红美蓝琼酯、乳糖发酵管131营养琼脂培养基的配制成分蛋白胨10G牛肉膏3G氯化钠5G琼脂1520G蒸馏水1000ML制法将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15氢氧化钠溶液约2ML，校正PH至7274。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121高压灭菌15MIN。132乳糖胆盐发酵管的配制成分蛋白胨20G猪胆盐或牛、羊胆盐5G乳糖10G004滇甲酚紫水溶液25ML蒸馏水1000MLPH74制法将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂，分装每管10ML，并放入一个小倒管，115高压灭菌15MIN。注双倍或三倍乳糖胆盐发酵管培养基，除水以外，其余成分加倍或取三倍。133伊红美蓝琼酯的配制成分蛋白胨10G乳糖10G磷酸氢二钾2G琼脂17G2伊红Y溶液20ML065美蓝溶液10ML蒸馏水1000MLPH71制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121高压灭菌15MIN备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至5055，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。134乳糖发酵管的配制成分蛋白胨20G乳糖10G004溴甲酚紫水溶液25ML蒸馏水1000MLPH74制法将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂，按检验要求分装30ML、10ML或3ML，并放入一个小倒管，115高压灭菌15MIN。14实验仪器恒温培养箱361（DRP9052型，上海森信实验仪器有限公司）显微镜10100（N117M型，宁波永新光学股份有限公司）菌落计数器（CFU600型，上海奥递生物科技有限公司）恒温水浴锅461（HH2型，国华电器有限公司）无菌操作台（SWCJIFD型，上海贺德实验设备厂）灭菌培养皿（直径90MM）灭菌吸管（1ML,10ML）灭菌三角瓶；灭菌试管；放大镜2实验方法21细菌菌落总数的检测以无菌操作用1ML灭菌吸管直接吸取1ML未经稀释水样移入培养皿后,即时将凉至45的营养琼脂培养基倾注入平皿约15ML,并转动平皿使混合均匀,同时做空白对照,待琼脂凝固后翻转平皿,置361恒温箱内培养242H,取出计算菌落数。作平皿菌落计数时,先用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,记下各平皿的菌落数后,求出未经稀释的各平皿的平均菌落数。22大肠杆菌的检测221初步发酵试验在2个各装有50ML3倍浓缩乳糖胆盐发酵管的培养液可称为三倍乳糖胆盐的三角瓶中内有倒置小管，以无菌操作各加水样100ML。在10支装有5ML三倍乳糖胆盐的发酵试管中内有倒置小管，以无菌操作各加入水样10ML。摇匀后，37培养24H。222平板分离经24H培养后，将产酸产气及只产酸的发酵管瓶，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板EMB培养基上，37培养1824H。大肠菌群在EMB平板上，菌落呈紫黑色，具有或略带有金属光泽，或者呈淡紫红色，仅中心颜色较深；挑取符合上述特征的菌落进行涂片，革兰氏染色，镜检。223复发酵试验将革兰氏阴性无芽胞杆菌的菌落的剩余部分接于单倍乳糖发酵管中，为防止遗漏，每管接种来自同一初发酵管的平板上同类型菌落2个，37培养24H，如果产酸又产气，即证实有大肠菌群存在。224报告根据证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管数，查表21，报告每100ML水样中的大肠菌群数MPN。表21大肠菌群检索表（饮用水）012每100ML水样中大肠菌群数备注03411138182713273111838414245251830706223692727431208315116193660230104069230接种水样总量300ML（100ML2份，10ML10份）3结果与分析31实验结果表31花家山泉的检测结果花家山泉菌落总数CFU/ML平均值CFU/ML大肠菌群MPN/100ML15A234312B2013135C22329318D21093112E210113从表31可以看出，成蹊苑生活区学生经常喝的花家山泉中，菌落总数没有超标，而且大肠菌群没有检出，说明水中大肠菌群没感染，水质不错，符合标准。表32大唐贡泉的检测结果大唐贡泉菌落总数CFU/ML平均值CFU/ML大肠菌群MPN/100ML1168A214215541106B21461267164C2726871256D211018341250E22482498从表32可以看出，桃李苑生活区学生经常喝的大唐贡泉中，大肠菌群稍超出标准；但是菌落总数远远超出标准，是标准的好几倍，需要引起高度重视。当然，它也不符合标准。表33虎跑梦泉的检测结果虎跑梦泉菌落总数CFU/ML平均值CFU/ML大肠菌群MPN/100ML168A290773170B260653161C265633158D268633182E278803从表33可以看出，中国计量学院生活区学生经常喝的虎跑梦泉中，大肠菌群符合标准；而菌落总数的检测结果超出标准，所以总的来说还是不符合标准表34云顶山泉的检测结果云顶山泉菌落总数CFU/ML平均值CFU/ML大肠菌群MPN/100ML126A228273120B21618316C287314D2653111E213123从表34可以看出，浙江警官职业技术学院生活区学生经常喝的云顶山泉中，菌落总数和大肠菌群都没超标，符合标准。表35黄浦源泉的检测结果黄浦源泉菌落总数CFU/ML平均值CFU/ML大肠菌群MPN/100ML135A237363142B244433132C234333131D233323127E225263从表35可以看出，杭州电子科技大学生活区学生经常喝的黄浦源泉中，菌落总数和大肠菌群都没超标，符合标准；但是菌落总数的检测结果有点大，离标准蛮近的，需要注意。注A、B、C、D、E表示从5个不同寝室取的水样，1、2表示每个水样的两个平行32实验分析本实验每种饮用纯净水都取了5个水样，这体现了取样的多样性，避免了水样太少而给实验带来的不可靠性。每个水样又作了两个平行，而且也做了空白对照，这样就可以排除操作失误的可能性。321检测标准表36GB192982003瓶（桶）装饮用水卫生标准项目要求色度10，并不得呈现其他异色浑浊度/NTU3嗅和味不得有异嗅异味肉眼可见物不得检出菌落总数/CFU/ML50大肠菌群/MPN/100ML3霉菌/CFU/ML10酵母菌/CFU/ML10致病菌（如沙门细菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌）不得检出注在水质检测的这么多项目中，色度、浑浊度、嗅和味、肉眼可见物人们很容易辨别，所以就没进行检测。霉菌、酵母菌、致病菌一般也不会超标，所以也没有进行检测。但是菌落总数和大肠菌群超标被报道的事例很多，而且这些人们不易察觉，所以就进行了菌落总数和大肠菌群的检测。322各水样与标准的比较成蹊苑生活区学生经常喝的花家山泉中，菌落总数没有超标，而且大肠菌群没有检出，说明水中大肠菌群没感染，水质不错，符合标准。浙江警官职业技术学院生活区学生经常喝的云顶山泉中，菌落总数和大肠菌群都没超标，符合标准。杭州电子科技大学生活区学生经常喝的黄浦源泉中，菌落总数和大肠菌群都没超标，符合标准；但是菌落总数的检测结果有点大，离标准蛮近的，需要注意。中国计量学院生活区学生经常喝的虎跑梦泉中，大肠菌群符合标准；而菌落总数的检测结果超出标准，所以总的来说还是不符合标准桃李苑生活区学生经常喝的大唐贡泉中，大肠菌群稍超出标准；但是菌落总数远远超出标准，是标准的好几倍，需要引起高度重视。当然，它也不符合标准。4讨论41不符合标准的原因造成桶装饮用水微生物污染可能的原因主要有3个桶装饮用水生产厂车间的制水设备及净化、消毒设施不完善,达不到灭菌的要求回收的空桶和桶盖处理不当,未严格清洗,消毒不彻底,造成二次污染消费者没有定期全面清洗饮水机，并对其进行消毒，或者拆分后的桶装饮用水饮用时间太长。42建议作为厂家要加强企业内部的质量控制,应有的设施要齐全,并按要求运行水处理装置的定期维护以及回收桶的清洗消毒要形成制度化加强从业人员的卫生意识教育,使之养成良好的卫生习惯,使其操作规范化。食品卫生及安全部门应加强监督。消费者应定期全面地清洗消毒饮水机。建议由专业清洗人员承担清洗工作,承担清洗工作的服务人员要严格依照服务流程进行清洗。此外还应注意清洗间隔冬季一般3个月清洗1次,夏季一般1个半月清洗1次。加快桶装水更换速度。桶装水启封后,应在一周内饮用完,且在3天后不再饮用凉水,而应煮沸后再饮用。在选择桶装纯净水时,选择信誉好的品牌和水站,做到心中有数。同时,仔细查看水桶上的标签是否完好,如厂名、厂址、执行标准、生产日期批号及保质期等。参考文献1熊文山瓶桶装饮用纯净水微生物检测方法J检测分析,2007,10646472韩国寿,周文奎，黄光前桶装饮用水及饮水机配套用具微生物污染检测J中国消毒学杂志,2003,20173743杨玉英，王璐璐，邓洪宇，夏春雷校园小区内桶装饮用纯净水微生物检测与分析J中国卫生检验杂志,2007,176104310444徐留发瓶装饮用纯净水卫生标准的研究J中国食品卫生杂志,1999111135崔亚珍,乔复兴,连西兰等陕西省瓶装饮用纯