sirt3 通过干扰hif-1a抵制癌细胞代谢的重编程

SIRT3通过干扰HIF1A抵制癌细胞代谢的重编程概述肿瘤细胞即使在正常氧环境下也会表现出较高的糖酵解。这种代谢的重编程被称作WARBURG效应，它会给肿瘤细胞提供细胞增殖所需的底物。在这里，我们介绍一种线粒体内的NAD依赖型去乙酰化酶SIRT3，这是调节WARBURG效应的一个关键因子。从机制上来说，SIRT3会通过调节一种转录因子HIF1A控制糖酵解过程中基因的表达来调节代谢的重编程。SIRT3缺失会导致活性氧（ROS）增加从而使HIF1A稳定。在人的乳腺癌细胞内SIRT3表达降低，这与HIF1A的靶基因表达增多有关。最终，我们发现SIRT3过表达会抑制乳腺癌细胞的糖酵解和细胞增殖过程，为肿瘤抑制提供了一种代谢上的机制。介绍OTTOWARBURG在19世纪20年代首次提到肿瘤细胞在充足氧的环境下也会进行糖酵解过程（WARBURG,1956）。这种有氧下的糖酵解偏倚叫做WARBURG效应，被视为许多肿瘤中标志性特征。这种效应有利于理解葡萄糖摄入和代谢加强造成的细胞生存和繁殖潜能增加的通路，这已经被广泛的关注（TENNANTETAL,2010VANDERHEIDENETAL,2009）。越来越多的证据表明有氧糖酵解会支持肿瘤细胞的增殖。葡萄糖代谢的提高会有利于为核糖、氨基酸和脂质合成提供原料，从而为提高了有氧糖酵解的肿瘤细胞提供生长优势（TONGETAL,2009）。由于肿瘤血管化会导致间断的低氧，所以持续的有氧糖酵解会提供给肿瘤细胞更大的生长优势（GATENBYANDGILLIES,2004）。癌前损伤到浸润性癌的转变过程常伴随着葡萄糖摄入的增高这一现象也支持了本观点。癌细胞的代谢重编程被数个致癌线索所调控，包括PI3K/AKT，MYC，或HIF通路，这些通路会使葡萄糖摄入、糖酵解、血管再生和抗逆性均上调（KAELINANDRATCLIFFE,2008SEMENZA,2010TENNANTETAL,2010TONGETAL,2009）。最近发现，线粒体内的酶的突变在细胞代谢转变过程中表现出很重要的作用。例如，TCA循环中的酶发生获得或失去性突变会调节HIF1A的活性并促进致癌GOTTLIEBANDTOMLINSON,2005ZHAOETAL,2009。相应地，阐明线粒体内的新的调节因子会为癌变细胞的代谢重编程提供重要的前景。SIRT家族是保守的NAD依赖型ADP核糖转移酶或与代谢过程，抗逆反应和寿命相关的蛋白的去乙酰化酶（FINKELETAL,2009）。哺乳动物体内有7种，SIRT35位于线粒体。在中心代谢中，SIRT3是一种关键的去乙酰化酶，调控氧的许多代谢通路（VERDINETAL,2010）。例如，SIRT3能使电子传递链中复合体I与复合体II去乙酰化。SIRT3也能去乙酰化LCAD导致禁食过程中肝细胞脂肪酸氧化（HIRSCHEYETAL,2010）。SIRT3同样会作用于线粒体内的IDH2和MNSOD，打破细胞内ROS的稳定。SIRT3缺失会导致ROS上升，引起许多老年性的病理特征，包括听力丧失和肿瘤发生（KIMETAL,2010SOMEYAETAL,2010）。先前，SIRT3一直起肿瘤抑制的作用，通过减少ROS和维持基因稳定（KIMETAL,2010）。在本次研究中，虽然SIRT3敲除细胞也表现出葡萄糖摄入增加，线粒体氧化转化，但是SIRT3在肿瘤发生中直接调节作用仍然是一个问题。由于SIRT3在ROS调节中的关键作用，我们专门地证明了SIRT3在肿瘤细胞代谢和生长上的作用。结果SIRT3促进细胞的代谢重编程因为SIRT3能激活线粒体内能量代谢的酶并且SIRT3确实还会增加糖的摄入，所以我们假设SIRT3在糖代谢通路和线粒体氧化代谢中起重要的调控作用从而调节肿瘤细胞生长。为了证明这个假设，我们在小鼠胚胎成纤维细胞（MEFS）内用液相色谱质谱联用检测方法检测SIRT3缺失的影响。与SIRT3野生型（WT）相比较，SIRT3KOMEFS表现出一种明显的朝向糖酵解的转变（图1A）。在SIRT3KO细胞内，糖酵解的产物提高，而TCA循环的产物下降。SIRT3KO细胞内的葡萄糖下降这与所建立葡萄糖消耗增加模型相一致，然而糖酵解内的一种产物葡萄糖1磷酸含量却是增高的。葡萄糖1磷酸能被葡萄糖磷酸转移酶催化生成葡萄糖6磷酸从而为糖酵解或能产生NADPH和核糖的磷酸戊糖途径提供原料。非氧化的代谢途径磷酸戊糖途径能用6磷酸果糖或3磷酸甘油酸生成5磷酸核糖。总之，葡萄糖6磷酸，糖代谢的中间产物和5磷酸核糖在SIRT3KO细胞内含量上升，表明糖代谢产物转向磷酸戊糖途径从而生成核酸。尤其，SIRT3确实导致的代谢体这种转变与肿瘤周围组织的代谢模型极为相似。像许多肿瘤细胞一样SIRT3KOMEFS糖酵解和磷酸戊糖途径的代谢产物增加可能是将葡萄糖离开TCA循环转向生物合成的细胞增殖。事实上，SIRT3KO细胞明显比WT细胞生长快。为了检测这种加快是不是需要有氧代谢，我们将细胞培养在含有半乳糖而不是葡萄糖的介质中，从而减少糖酵解通量迫使细胞依赖氧化磷酸化。在这种条件下，WT与KO细胞速率基本一致，说明KO细胞的增殖加快需要提高葡萄糖的代谢。图1为了证明这种代谢型反映了糖酵解的增加，我们检测了葡萄糖的摄入和乳糖的产量。如预测，SIRT3KOMEFS消耗更多的葡萄糖并且产出更多地乳糖。不止是MEFS，在HEK293T细胞内如果用慢病毒表达抗SIRT3的SHRNA来减少SIRT3的表达，则293T细胞也会增加葡萄糖的摄入和乳糖的产生。很有趣的是SIRT3缺失对葡萄糖摄入和乳酸产生的影响与丙酮酸激酶M2型过表达或MTOR激活相类似。这些资料表明SIRT3更改细胞代谢有利于糖酵解，结果SIRT3水平低的细胞表现出与WARBURG效应相类似的特征。先前的研究发现SIRT3缺失会导致葡萄糖摄入增加，然而，据我们所知，具体的机制还没有被发现。为了验证SIRT3上调糖酵解是否是一种氧化能力减弱的代偿性反应，我们检测了在线粒体呼吸抑制剂鱼藤酮或线粒体脂肪酸氧化的抑制剂乙莫克舍作用下葡萄糖的摄入和乳酸的分泌。在WT细胞内，糖酵解在鱼藤酮和乙莫克舍作用下均提高。很明显，在SIRT3KO细胞内葡萄糖摄入和乳酸分泌在氧化抑制剂下仍保持着提高。这些资料表明，SIRT3KO细胞内糖酵解的提升不是单单线粒体氧化损伤代偿性所导致的。相反这些资料表明，SIRT3提高糖代谢可能是通过某条具体的信号通路。图2我们接下来探寻SIRT3KO是否掩盖了葡萄糖消耗提高的迹象。我们给小鼠注射18FFDG然后用PET/CT检测葡萄糖摄入。我们特别地检测BAT，因为BAT会抑制高度的糖摄入。结果我们发现SIRT3KO小鼠BAT的18FFDG摄入相比于WT小鼠有所增加，即使SIRT3KO小鼠的BAT没有WT的大。BAT的葡萄糖摄入是被肾上腺素途径调控的，因此会在寒冷条件下显著上升。我们检测18FFDG在6小时冷冻处理后SIRT3KO和WT的BAT内的摄入，然后发现SIRT3KO鼠无论在室温还是在4都会有更高的18FFDG摄入，表明SIRT3WT和KO对肾上腺素途径调控的BAT葡萄糖摄入有相似的增加。这些BAT葡萄糖摄入相对于整体的葡萄糖动态平衡单独地具有明显变化我们没有检测血液内的葡萄糖水平优于先前有报道。为检测SIRT3KO的BAT葡萄糖摄入增加的机制，我们对BAT分离的RNA检测了全基因组表达谱并用基因排序列表在GSEA上从上调最多到下调最多进行排序从而明确SIRT3KO最显著改变的代谢通路。因为SIRT3是线粒体内的去乙酰化酶，我们期望看到线粒体功能或能量产生上的代谢通路的代偿性上调。让我们惊讶的是，SIRT3缺失会上调肿瘤发生中重要的通路。尤其是在SIRT3KO中的9个基因集显著过表达，三个是只受缺氧诱导的。缺氧本身会增加18FFDG的摄入并且与许多转录改变有关，这些改变会导致葡萄糖摄入和利用增加。因此我们假设SIRT3KO的糖摄入增加可以用缺氧反应的上调来解释。SIRT3KO与缺氧细胞的基因特征极其相似，因为缺氧会诱导与SIRT3缺失相似的代谢转换，包括线粒体氧化产物的减少和糖酵解的增加。为了检测SIRT3在低氧诱导的代谢重编程中所起的作用，我们分析了从培养在21和1O212小时的MEFS中提取的代谢产物。我们发现缺氧与SIRT3缺失所导致的糖酵解中间产物的增加现象相似。甚至，缺氧和SIRT3缺失有额外效应虽然糖酵解，肝糖分解和磷酸戊糖途径的中间产物上升，但在同样的条件下，SIRT3KOMEFS表现出更高的水平。与代谢轮廓相一致，低氧会在两种细胞系能都导致糖摄入增加，但SIRT3KO的细胞增加的量更多。总之，这些资料表明SIRT3缺失和低氧会导致相似的代谢转型，也说明了低氧通路的不正常激活是SIRT3缺失导致代谢重编程的一种诱因。SIRT3通过使HIF1不稳定抑制WARBURG效应HIF1，HIF1和HIF1的异质二聚体，是在缺氧过程中导致糖酵解和乳酸产量增加的一个重要的起子。在低氧条件下，HIF1被稳定并促进许多与低氧反应相关的基因表达。结果，在低氧下缺少HIF1的细胞不能上调糖酵解中的酶和乳酸产量。考虑到体内低氧的SIRT3KOBAT的基因标记，除了SIRT3KOMEFS和缺氧细胞的线粒体内糖分解的相似性，我们解释这个机制通过HIF1。为了检测这个观点，我们首先检测SIRT3是否直接调节HIF1在正常氧环境下。在较高氧环境下，HIF1会很快降解并且难以从提取物中检测，但是HIF1可以从细胞核的提取物中检测。事实上，从SIRT3受损细胞内提取的细胞核表明相对于WT细胞，有更高的HIF1水平。同样地，当MEFS培养在1O2时HIF1在SIRT3KO细胞内会稳定更早而且含量更高相比于WT细胞。在HEK293T细胞内用慢病毒的SHRNA干扰SIRT3后也得到了类似的SIRT3表达减少的结论。重要的是SIRT3同样调控HIF1目标基因的表达。在肿瘤发生中HIF1目标基因葡萄糖转运体GLUT1和己糖激酶HK2都紧密地涉及在内，这些基因对于葡萄糖通过有氧糖酵解和磷酸戊糖途径造成的摄入和分解代谢的增加都是很重要的。在SIRT3KOMEFS中和SIRT3敲除细胞内这些基因相比较于对照组都在缺氧条件下提高了这些基因的表达。更重要的是HIF1目标基因PDK1，LDHA，PGK1，和AEGFA在SIRT3KO细胞内相比较于WT在低氧下都显著的增加了。与我们所见的糖酵解代谢中间产物模型相类似，许多这些基因在基础条件下都由于SIRT3缺失而表达提高，并且SIRT3缺失和低氧具有可叠加的效应。图3为了检测SIRT3是否直接抑制HIF1，我们检测了在SIRT3过表达的细胞内HIF1和其目标基因的水平。SIRT3过表达明显并且可复得减少了在低氧下HIF1的稳定性。重要的是，在低氧下，SIRT3过表达使葡萄糖转运载体GLUT1和HK2在低氧下的诱导减弱了，说明SIRT3直接抑制了HIF1的功能。完全地抑制HIF1目标基因需要SIRT3的催化活性SIRT3催化的表达突变并不会明显地减少低氧下GLUT1的表达。此外，我们用原始MEFS发现两株SIRT3KO细胞抑制了GLUT1的表达，表明SIRT3能在原始细胞内调节HIF1的表达。归纳来看，这些资料显示SIRT3控制HIF1的稳定和HIF1与有氧糖消耗有关的目标基因的诱发。然后，为了检验HIF1在SIRT3敲除细胞内所观察到的糖酵解的类型转变的作用，我们用两种不同的SHRNA对HIF1进行敲除来创造SIRT3WT和KO的MEFS，并且HIF1平稳减少。我们检测正常氧和低氧下GLUT1在这些细胞系内的表达发现，如所预期那般，对照组（SHNS）SIRT3KOMEFS表现出一种对于低氧的过度反应，通过检测GLUT1的表达倍数变化可以看出。相反，用抗HIF1的SHRNA处理的WT和SIRT3KOMEFS具有相当的反应对于低氧。重要的是，SIRT3敲除导致的乳酸产量上升无论在正常氧还是低氧下都需要HIF1。总之，这些资料表明SIRT3通过HIF1调节有氧的糖分解。为了证明体内HIF1活性增加，我们检测了来自SIRT3WT和KO鼠的组织内HIF1和HIF1目标基因的水平。与糖分解有关的HIF1目标基因和HIF1蛋白在SIRT3KO鼠的BAT内都有显著增加，这与我们的研究一致。相类似的是数个HIF1目标基因在SIRT3KO心脏内也有增加的趋势。HIF1的调节是极其复杂的而且还未完全明白。在正常氧下，HIF1在两个脯氨酸残基位点被PHD13羟化，使VHL能结合到HIF1上使其泛素化并被蛋白酶体降解。因为我们并没有检测HIF1MRNA水平的变化，我们检测了是否SIRT3发挥一种转录后的影响对于HIF1的稳定性。SIRT1结合HIF1调节其活性通过直接去乙酰化。为了检测SIRT3是否有相似的机制，我们使用免疫沉淀探寻SIRT3与SIRT1对HIF1的作用。SIRT1下调了HIF1但是SIRT3没有，说明SIRT3没有直接与HIF1作用。我们然后检测另一个假说SIRT3调节HIF1通过修饰PHD活性通过检测HIF1的羟化水平。我们评估对照组和SIRT3KOHEK293T的PHD活性通过用蛋白酶体抑制剂MG132（抑制HIF1羟化防止被降解）或DMOG（一致PHDS）处理细胞。尽管SIRT3敲除细胞堆积了更多的HIF1在MG132处理时，但他们的被羟化HIF1却显著减少，说明PHD活性在SIRT3敲除组更低。相类似，SIRT3WTMEFS表现出更高的HIF1羟化水平。如果SIRT3通过修饰PHD影响HIF1稳定性，难么用DMOG处理会使SIRT3KO和WT具有相等的HIF1稳定。事实上，我们发现在每次检测时SIRT3WT和KO有相等的HIF1稳定性在被DMOG处理过后。为了证实SIRT3影响HIF1通过PHD，我们实施了一系列的实验比较低氧和DMOG对SIRT3KO和WTMEFS的影响。我们观察到，低氧和DMOG都能使HIF1稳定并诱导HIF1名目标基因表达。SIRT3WT和KOMEFS对低氧和DMOG的相关反应强调了PHDS是SIRT3调节的关键。在低氧下，HIF1目标基因会被SIRT3KO更加强烈的诱导，表明了SIRT3在调节低氧代谢上的重要的生理作用。相反SIRT3敲除会抑制DMOG导致的HIF1目标基因的诱发。这些资料支持一种模型PHD的活性已经被SIRT3敲除所抑制。结果，当PHD活性被DMOG所抑制时，SIRT3会有一个相似的效应，所以HIF1目标基因会有更小的诱发。总之，这些结果指明SIRT3会通过减弱PHD活性来增加HIF1表达。除了氧浓度之外，已知的细胞内调节PHD活性的信号还有好几个。最值得注意的是ROS会抑制PHD并使HIF1稳定。甚至，缺氧会触发ROS在细胞内的增加，这是低氧下HIF1激活所必须的。因为SIRT3是有名的一种ROS抑制剂，我们假设SIRT3缺陷的细胞内ROS增多会导致PHDS被抑制。因此，我们检测SIRT3丢失是否会放大低氧下的ROS增加。我们发现在SIRT3KOMEFS中低氧导致的ROS显著增加，提供了一种机制上的解释为什么SIRT3敲除细胞会放大低氧效应。图4然后，我们用抗氧化剂NAC处理细胞来证明一种模型抑制ROS会阻碍SIRT3敲除的效应。事实上，我们观察到尽管SIRT3KOMEFS有更高的HIF1在低氧下，但NAC处理会使HIF1降到与SIRT3WT相当的水平。相反，SIRT3KO和WTMEFS在DMOG下有相当的水平但在DMOG下用NAC处理不再使HIF1不稳定。如预料的那样，NAC处理的KOMEFS内HIF1下降，NAC处理能修复GLUT1在SIRT3KOMEFS细胞内的表达水平。最终，为检测ROS增加是否是SIRT3KOMEFS大量增殖的原因，我们用NAC处理细胞并检测生长速率。我们发现，SIRT3KOMEFS增殖速率恢复到WT类型的水平。因此，SIRT3调节ROS在HIF1稳定和糖代谢激活方面起着重要的作用。为了检测ROS在体内改变BAT代谢的作用，我们首先寻找在SIRT3KO组织内的ROS增加的证据。我们发现两种氧化损伤蛋白羰基和脂质过氧化，在SIRT3KOBAT内明显提升。因为抗氧化处理会挽救HIF1诱发的基因表达，我们假设NAC处理会抑制SIRT3KO组织内的糖分解特征。为验证这个假设，我们用NAC饲养小鼠一个月，然后测试HIF1目标基因的表达水平。我们发现NAC会抑制SIRT3KO小鼠内HIF1目标基因的表达，但WT内则不会。这些资料表明，ROS产量上升在SIRT3缺失小鼠体内会提高糖分解基因的表达。SIRT3缺失会加强糖酵解特征HIF1活性和有氧糖酵解在WARBURG效应里很明显，所以我们设想SIRT3可能是通过抑制WARBURG效应的HIF1调节活性发挥他的肿瘤抑制作用。SIRT3敲除会增加克隆形成在软琼脂群落生长实验内。为检测HIF1在肿瘤发生中的作用，我们用RAS和E1A致癌基因诱导原始MEFS，然后敲除HIF1。如前面所示，我们发现SIRT3缺失会增加克隆形成。重要的是HIF1敲除会抑制SIRT3KO细胞的克隆形成。更重要的是SIRT3WT与KOMEFS以相同的速率形成克隆当培养在含有半乳糖的介质中，这表明克隆形成需要糖代谢。总之，这些资料表明SIRT3通过HIF1导致的代谢重编程可能是SIRT3起肿瘤抑制作用的一个重要的因素。接下来，我们进行了异种移植实验使用转型后的MEFS为了观察SIRT3敲除后的肿瘤代谢状态。如先前研究所示，我们发现缺少SIRT3的肿瘤有更好的生长优势KO型内64形成肿瘤，而WT型内只有27。并且缺少SIRT3的肿瘤生长更快而且更大。因为肿瘤受间断性低氧支配，我们检测了在异种移植内糖酵解限速酶的表达。HIF1的目的基因在SIRT3KO肿瘤内的表达提高了；SIRT3KO肿瘤同样表现出更高的GLUT1。总之，这些资料表明糖酵解相关的酶的增加可能是一种对于低氧的回应，给缺少SIRT3的体内肿瘤提供了生长优势。SIRT3在很多肿瘤内缺失我们的资料显示，SIRT3可能调节肿瘤细胞的代谢通路。为了证明SIRT3在肿瘤内的联系，我们首先检测了SIRT3复制数的变化，这与肿瘤的发展程度有关。在20的肿瘤内至少一份SIRT3缺失而在乳腺癌内这个数据有40。在所有肿瘤中SIRT3被局灶性的删除了（少于一条染色体笔），并且在肿瘤和卵巢肿瘤内局灶性删除更加明显。相反，SIRT4和SIRT5在上诉14种类型中细胞内并没有明显的减少。TP53是一种肿瘤抑制剂在许多人类癌症中缺失，因此可以作为一种控制。我们对SIRT3复制数的分析显示这14种细胞并没有明显增多。大多数SIRT3缺失是杂合的，并且SIRT3缺失频率与众所周知的肿瘤抑制剂BRCA1和BRCA2相似，他们在人类乳腺癌中分别是43和40的杂合率。有趣的是缺失最多的基因包括SIRT3并不包含任何肿瘤抑制剂。因为乳腺癌表达出极高的SIRT3缺失与其他的肿瘤相比，我们进一步在人类乳腺癌中检查SIRT3。提高的HIF1表达在乳腺癌中与肿瘤的侵略性和预后有关。许多乳腺癌细胞表现出糖酵解增加和GLUT1的表达增加，这是许多乳腺癌的活体特征。在异体移植模型中，SIRT3缺失增加HIF1目标基因的表达，也会加剧GLUT1表达。因此，我们寻找SIRT3缺失和HIF1目标基因的关系在乳腺癌细胞内。7种正常乳细胞和40乳腺导管癌的基因表达图谱表明SIRT3表达明显下降在乳腺癌细胞内。此外，数个HIF1目标基因尤其是GLUT1，明显表达提升。我们进一步分析SIRT3和GLUT1的相应关系在单个样例中，发现SIRT3明显与GLUT1负相关（P00008）。我们的结果表明SIRT3的缺失与增加的HIF1目标基因的表达有关，这提供了一种SIRT3缺失与肿瘤在代谢上的一种关联机制。为证明SIRT3在人乳腺癌中表达减少，我们分析了SIRT3的蛋白水平使用免疫组化在正常的乳上皮除了一大区域的人乳腺癌组织。在46病人样例中，只有6个表现出与正常上皮一个样的SIRT3表达。很明显，87的病人表现出减少的或者不可检测的SIRT3印迹在相邻的癌组织中，20的病人表现出没有SIRT3。相似地，人乳腺癌样本的一个单独基因表达图谱显示25的乳腺癌的SIRT3的MRNA减少了至少6倍，相比于正常的乳上皮细胞。这个单独的数据提供了额外的证据，用来支持我们所观察到的SIRT3在人肿瘤中减少的这一现象。此外，一个早期的171例人乳腺癌的高分辨度分析显示SIRT3是明显减少的。KIM报道的SIRT3KO小鼠产生了肿瘤和人乳腺癌肿瘤内SIRT3明显降低也是支持改发现的。对于SIRT3在人乳腺癌内的表达研究表明SIRT3可能起到一种肿瘤抑制的作用，通过阻止代谢向有利于肿瘤生长的方向转型来起作用。为了检查SIRT3是否能抑制WARBURG效应，我们在MCF7、T47D和CAMA1这三种细胞内过表达SIRT3。我们分析了葡萄糖摄入和乳酸的分泌在低氧下从而模拟肿瘤的微环境。我们发现SIRT3抑制乳酸产生和葡萄糖摄入在所有细胞系。这些数据表明SIRT3过表达会抑制与WARBURG效应有关的代谢转变。因为SIRT3强烈抑制CAMA1的葡萄糖摄入和乳酸产生，我们选择深入分析这些细胞。为了检测复合体I或脂肪酸氧化对这些表现型的影响，我们测量了鱼藤酮与乙莫克舍存在下葡萄糖摄入和乳酸产生。鱼藤酮与乙莫克舍都增加对照组与SIRT3过表达组葡萄糖摄入和乳酸产生到一种相似的程度，表明SIRT3抑制糖酵解是依赖SIRT3对脂肪酸氧化或复合体I的作用的。图5我们然后检测是否SIRT3抑制CAMA1的HIF1。SIRT3过表达在低氧下强烈降低HIF1蛋白水平和HIF1目标基因。甚至，当我们检测低氧或DMOG下HIF1目标基因倍数变化时，我们发现与SIRT3KOMEFS相反的结果。当用DMOG处理时，SIRT3过表达钝化低氧效应。SIRT3过表达细胞提高PHD活性的模型与此一致，表明SIRT3在PHD方面调节低氧生理现象的重要性。然后，我们检测此前的一个假说，SIRT3调节葡萄糖代谢影响癌细胞增殖。SIRT3过表达显著抑制培养在高糖的CAMA1细胞增殖。而在只含半乳糖的介质中对照组和SIRT3过表达组增殖速率相似。该数据表明，SIRT3调节癌细胞生长痛过影响葡萄