GB 5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定

016食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、016    前  言本标准代替008食品中蔗糖的测定、003蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法 液相色谱示差折光检测法、222212008食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 高效液相色谱法。本标准与008相比,主要变化如下:标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定”;增加了部分样品前处理。0161    食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定1 范围本标准规定了食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定方法。本标准第一法适用于食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定,第二法适用于食品中蔗糖的测定。“第一法”高效液相色谱法,本法适用于谷物类、乳制品、果蔬制品、蜂蜜、糖浆、饮料等食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的测定。“第二法”酸水解法适用于食品中蔗糖的测定。第一法 高效液相色谱法2 原理试样中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖经提取后,利用高效液相色谱柱分离,用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测,外标法进行定量。3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的一级水。腈:色谱纯。酸锌2铁氰化钾e(3油醚:沸程3060。酸锌溶液:冰乙酸3水溶解并稀释至100 亚铁氰化钾溶液:水溶解并稀释至100糖(7度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。萄糖(0度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。糖(7度为99%,0162    物质。芽糖(9度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。糖(3度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。标准贮备液(20mg/分别称取上述经过962干燥2萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖各1g,加水定容于50于4密封可贮藏一个月。标准使用液:水定容, 平:声波振荡器。力搅拌器。心机:转速4000r/效液相色谱仪,带示差折光检测器或蒸发光散射检测器。相色谱柱:氨基色谱柱,柱长250厚5m,或具有同等性能的色谱柱。5 体样品取有代表性样品至少200g,用粉碎机粉碎,匀,装入洁净容器,密封,标明标记。固体和液体样品(除蜂蜜样品外)取有代表性样品至少200g(充分混匀,装入洁净容器,密封,标明标记。蜜样品未结晶的样品将其用力搅拌均匀;有结晶析出的样品,可将样品瓶盖塞紧后置于不超过60的水浴中温热,待样品全部溶化后,搅匀,迅速冷却至室温以备检验用。在融化时应注意防止水分侵入。存蜂蜜等易变质试样置于04保存。6 肪小于10%0g(含糖量5%时称取10g;含糖量5%10%时称取5g;0163    糖量10%40%时称取2g;含糖量40%100水约50慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5水定容至刻度,磁力搅拌或超声30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,液相色谱分析。浆、蜂蜜类称取混匀后的试样1g2g(50水定容至50分摇匀,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,液相色谱分析。二氧化碳的饮料吸取混匀后的试样于蒸发皿中,在水浴上微热搅拌去除二氧化碳,慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5水定容至刻度,摇匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,液相色谱分析。肪大于10%的食品称取粉碎或混匀后的试样5g10g(于100入50匀,放气,振摇2800r/除石油醚后重复以上步骤至去除大部分脂肪。蒸发残留的石油醚,用玻璃棒将样品捣碎并转移至10050液并入100慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5水定容至刻度,磁力搅拌或超声30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,液相色谱分析。谱参考条件色谱条件应当满足果糖、葡萄糖、蔗糖、。a) 流动相:乙腈+水=70+30(体积比);b)流动相流速:c)柱温:40;d)进样量:20L;e)示差折光检测器条件:温度40;f)蒸发光散射检测器条件:飘移管温度:8090;氮气压力:350击器:关。准曲线的制作将糖标准使用液标准依次按上述推荐色谱条件上机测定,记录色谱图峰面积或峰高,以峰面积或峰高为纵坐标,以标准工作液的浓度为横坐标,示差折光检测器采用线性方程;蒸发光散射检测器采用幂函数方程绘制标准曲线。样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中,记录峰面积或峰高,从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。可根据具体试样进行稀释(n)。0164    白试验除不加试样外,均按上述步骤进行。7 分析结果的表述试样中目标物的含量按式(1)计算,计算结果需扣除空白值:X=(V000100(1)式中:X 试样中糖(果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖)的含量,单位为克每百克(g/100g);样液中糖的浓度,单位为毫克每毫升(mg/0空白中糖的浓度,单位为毫克每毫升(mg/V样液定容体积,单位为毫升(n稀释倍数;m试样的质量,单位为克(g)或毫升(1000换算系数;100换算系数。糖的含量10g/100果保留三位有效数字,糖的含量<10g/100果保留两位有效数字。8 精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。9 其他当称样量为10糖、葡萄糖、蔗糖、00g。第二法 酸水解理本法适用于各类食品中蔗糖的测定:试样经除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,按还原糖测定。水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。11 试剂和溶液除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的三级水。酸锌2铁氰化钾e(30165    酸(氧化钠(基红(指示剂。甲蓝(指示剂。酸铜(石酸钾钠(酸锌溶液:冰乙酸3水溶解并定容于100铁氰化钾溶液:水溶解并定容至100酸溶液(1+1):量取盐酸50慢加入50却后混匀。氧化钠(40g/L):称取氢氧化钠4g,加水溶解后,放冷,加水定容至100基红指示液(1g/L):95%乙醇溶解并定容至100氧化钠溶液(200g/L):称取氢氧化钠20g,加水溶解后,放冷,加水并定容至100性酒石酸铜甲液:于水中,加水定容至1000性酒石酸铜乙液:称取酒石酸钾钠50解于水中,再加入亚铁氰化钾4g,完全溶解后,用水定容至1000存于橡胶塞玻璃瓶中。准品葡萄糖(0准品:纯度99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。准溶液配制葡萄糖标准溶液(称取经过98100烘箱中干燥2加水溶解后加入盐酸5用水定容至10002 平:浴锅。调温电炉。式滴定管:253 体样品取有代表性样品至少200g,用粉碎机粉碎,混匀,装入洁净容器,密封,标明标记。固体和液体样品取有代表性样品至少200g(充分混匀,装入洁净容器,密封,标明标记。0166    存蜂蜜等易变质试样于04保存。14 g(液体试样5g25g(置250水50慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。大量淀粉的食品称取粉碎或混匀后的试样10g20g(置250水20045水浴中加热1h,并时时振摇,冷却后加水至刻度,混匀,静置,沉淀。吸取200慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。精饮料称取混匀后的试样100g(置于蒸发皿中,用(40g/L)氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积的14后,移入250慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。酸饮料称取混匀后的试样100g(蒸发皿中,在水浴上微热搅拌除去二氧化碳后,移入250水洗蒸发皿,洗液并入容量瓶,加水至刻度,混匀后备用。别置于100化前:一份用水稀释至100化后:另一份加(1+1)盐酸56870水浴中加热15却后加甲基红指示液2滴,用200g/水至刻度。水10入2粒4粒玻璃珠,从滴定管中加葡萄糖标准溶液约9制在2热以每两秒一滴的速度滴加葡萄糖,直至溶液颜色刚好褪去,记录消耗葡萄糖总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10性酒石酸甲、乙液各5性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(注:也可以按上述方法标定40、乙液各半)来适应试样中还原糖的浓度变化。0167    测滴定:入蒸馏水10入2粒4粒玻璃珠,置于电炉上加热,使其在2持沸腾状态15s,滴入样液至溶液蓝色完全褪尽为止,读取所用样液的体积。确滴定:入蒸馏水10入几粒玻璃珠,从滴定管中放出的(液(置于电炉上,使其在2持沸腾状态2每两秒一滴的速度徐徐滴入样液,溶液蓝色完全褪尽即为终点,分别记录转化前样液(转化后样液(耗的体积(V)。注:平的样品,可以采用反滴定的方式进行测定。15 化糖的含量试样中转化糖的含量(以葡萄糖计)按式(2)进行计算:R=0250000100(2)式中:R 试样中转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);A碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各半)相当于葡萄糖的质量,单位为毫克(m样品的质量,单位为克(g);50酸水解(吸取样液体积,单位为毫升(250试样处理(样品定容体积,单位为毫升(V滴定时平均消耗试样溶液体积,单位为毫升(100酸水解(定容体积,单位为毫升(1000换算系数;100换算系数。注:样液(计算值为转化前转化糖的质量分数液(计算值为转化后转化糖的质量分数糖的含量试样中蔗糖的含量)计算:X=(3)式中:X 试样中蔗糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);转化后转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);转化前转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);转化糖(以葡萄糖计)换算为蔗糖的系数。蔗糖含量10g/100果保留三