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文档简介

1、第六章 酶学分析技术1. 酶的国际单位(IU) 1IU指在规定的条件下(25C,最适pH,最适底物浓度),每分钟转化1umol底物的酶量。2. 1katal:指在规定的条件下,每秒钟转化1umol底物的酶量。3. 抑制剂:凡是能降解酶促反应速度,但不引起酶分子变性失活的物质统称为酶的抑制剂。4. 连续检测法:是测定底物或产物随时间的变化量,在酶促反应的线性期每间隔一定时间测定一次产物或底物的变化量,根据其变化量间接求出酶活性浓度,又称速率法。5. 同工酶:同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化功能,但其分子组成、空间构想、理化性质、生物学性质以及器官分

2、布和细胞内定位不同的一类酶。6. 亚型:也称同工型,指基因在编码过程中由于翻译后修饰的差异所形成的多种形式的一类酶。7. 米氏常数Km:是酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度,一般是在106102mol/L之间,是酶的特异性常数之一,只与酶的性质有关,而与酶浓度无关。8. 简述同工酶产生的机理:不同基因位点编码由等位基因变异编码产生多肽链化学修饰产生第七章 蛋白质检验1. 急性时相反应:当人体因感染、自身免疫性疾病等组织损伤侵害、诱导炎症,使单核细胞和巨噬细胞等细胞通过释放紧急反应性细胞因子IL-1、IL-6、TNF,再经血液循环,刺激肝脏细胞产生1-抗胰蛋白酶、1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、铜蓝

3、蛋白、C3、C4、纤维蛋白原、C-反应蛋白和血清淀粉样蛋白A等,使其血浆中浓度显著升高,而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降,此炎症反应过程称为急性时相反应(APR).参与急性时相反应的蛋白称为急性时相反应蛋白。2. M蛋白:又称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆B细胞异常增殖时产生的,具有相同结构和电泳行为的免疫球蛋白分子或其分子片段,一般无抗体活性。3. C-反应蛋白:在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C多糖的蛋白质,是第一个被认定为急性时相反应的蛋白质。1. 血浆蛋白质的功能:维持血浆胶体渗透压;运输功能;维持血浆的酸碱平衡,调节血浆pH;免疫与防御功能;凝血、抗

4、凝血及纤溶等功能。此外还有营养、催化、代谢调控等功能2. 清蛋白的生理功能:营养作用;维持血浆胶体渗透压;维持血浆正常的pH;运输作用3. 清蛋白的临床意义:增高:仅见于严重失水降低:清蛋白合成不足:常见于急性或慢性肝脏疾病蛋白质营养不良或吸收不良清蛋白丢失:肾病综合征,Alb可由尿中丢失肠道炎症性疾病烧伤及渗出性皮炎清蛋白分解代谢增加:组织损伤或炎症清蛋白的分布异常:门静脉高压,肝硬化无清蛋白 :遗传性缺陷评价标准:35g/L为正常,2834g/L为轻度缺乏,2127g/L为中度缺乏,21g/L为严重缺乏当清蛋白浓度低于28g/L时,会出现水肿。4. 双缩脲法测血清总蛋白:原理:蛋白质分子的

5、肽键在碱性条件下能与Cu2+作用生成紫红色复合物,其显色深浅与蛋白质的含量成正比。由于这种反应和两分子尿素缩合后的产物双缩脲与碱性铜溶液中的Cu2+作用形成紫红色产物的反应类似,故称为双缩脲反应。凡分子中含有两个或两个以上甲酰胺基的任何化合物都能发生此反应。临床意义:血清总蛋白升高见于:血液浓缩:严重腹泻、呕吐、高热、休克以及慢性肾上腺皮质功能减退等疾病时,由于水分丢失使血液浓缩,血清总蛋白浓度可明显升高,但清蛋白/球蛋白比值变化不大,临床称为假性蛋白增多症。合成增加:多见于球蛋白合成增加,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、冷沉淀等。血清总蛋白降低见于:合成障碍:如慢性肝炎、急性肝细胞坏死、肝硬化

6、等血液稀释:如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。蛋白质丢失:如大量失血,肾病综合征时的蛋白尿,溃疡性结肠炎。其他:如慢性胃肠道疾病,消耗性疾病如严重肺结核、甲状腺功能亢进,肾病综合征、长期营养不良、恶性肿瘤。5溴甲酚绿法BCG测定血清清蛋白原理:BCG是一种阴离子染料,在pH4.2的缓冲液中与带正电荷的清蛋白结合成复合物,溶液由未结合前的黄色变成蓝绿色,在626nm波长处的吸光度与清蛋白浓度成正比,经与同样处理厄清蛋白标准液比较,即可求得清蛋白的含量。6 肝硬化、肾病综合征和M蛋白血症患者血清蛋白电泳有何特征? 肝硬化:ALB下降,带升高,甚至出现-桥。肾病综合征:ALB下降,

7、带不变或下降,2和带尤其是2带显著升高。M蛋白血症:ALB下降,出现一个色泽深染的窄区带即M蛋白带,多位于带之中,也可出现在或带。 第八章 糖代谢紊乱检验1.糖尿病DM:是临床上最常见的病理性高血糖症,系胰岛素分泌不足或(和)胰岛素作用低下引起的代谢紊乱性综合征,以高血糖为特点,其典型病例可出现多尿、多饮、多食和无原因的体重下降。2.妊娠期糖尿病GDM:指在妊娠期间首次范闲的任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作,不论是否使用胰岛素或饮食治疗,也不论分娩后这一情况是否持续,但不包括妊娠前已知的糖尿病患者。3低血糖:指由于某些病理或生理原因使血糖浓度低于参考值下限而出现交感神经兴奋性增高和脑功能障碍,

8、从而引起饥饿感、心悸、出汗、精神失常等症状,严重时可出现意识丧失、昏迷甚至死亡。4.糖耐量实验:是一种葡萄糖负荷试验,口服或注射一定量的葡萄糖后,每隔一定时间测定血糖水平,以了解机体对葡萄糖的调节能力。5.高血糖症:指空腹血糖浓度超过7.0mmol/L,若超过肾糖阈值(8.910mmol/L)时则出现糖尿。为渗透性利尿。6.胰岛素抵抗IR:指单位浓度的胰岛素细胞效应减弱,即机体对正常浓度胰岛素的生物反应性降低的现象。7.反应性低血糖:被定义为一种临床病症,即病人在日常生活中出现的餐后低血糖症状,且血糖浓度低于2.52.8mmol/L。1. 血糖的来源和去路:来源:食物中的糖类物质肝贮存的糖类分

9、解成葡萄糖入血糖异生作用其他单糖的转化去路:氧化分解供能肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原而贮存转化为非糖物质转变成其他糖及糖衍生物当血糖浓度过高,超过了肾糖阈时,葡萄糖即由尿中排出,出现糖尿。2. 糖尿病的诊断标准:糖尿病症状,同时随机血糖浓度11.1mmol/L。典型糖尿病症状包括多食、多饮、多尿和不明原因的体重下降。空腹血糖浓度FPG7.0mmol/L口服葡萄糖耐量试验OGTT中2小时血糖11.1mmol/L.以上三种方法都可以单独用来诊断糖尿病,但需要重复试验,两次的试验结果有相关性才能确诊。3. 口服糖耐量试验OGTT定义:是一种葡萄糖负荷试验,用于了解胰岛细胞功能和集体对血糖的调节能力

10、。方法:标本采集:检查前三天停用胰岛素治疗,维持正常的饮食及活动(每天食物中糖含量不低于150g)。试验前应空腹1016小时,静脉采血2ml左右,迅速分离血清后测定空腹血糖浓度。口服葡萄糖:将75g无水葡萄糖溶于250ml冷开水中5分钟内饮完(妊娠妇女常用量为100g)。绘制糖耐量曲线结果分析: FPG6.1mmol/L,2hPG7.8mmol/L,为糖耐量正常(NGT) FPG在6.17.0 mmol/L之间,2hPG7.8mmol/L,为空腹血糖受损(IFG) FPG7.0 mmol/L,2hPG在7.811.1mmol/L之间,为糖耐量减退(IGT) FPG7.0mmol/L,2hPG1

11、1.1mmol/L,尿糖+,为糖尿病。4.1型DM特点:任何年龄均可发病,典型病例常见于青少年起病较急血浆胰岛素及C肽含量低,糖耐量曲线呈低平状态B细胞自身免疫性损伤是重要的发病机制,多数病人可检出自身抗体治疗以依赖胰岛素为主易发生酮症酸中毒遗传因素在发病中起重要作用5.2型DM特点:典型病例常见于40岁以上肥胖的中老年人,偶见幼儿起病较慢血浆中胰岛素含量绝对值并不降低,但在糖的刺激后呈延迟释放ICA等自身抗体呈阴性初发病人单用口服降糖药一般可以控制血糖发生酮症酸中毒的比例不如1型DM有遗传倾向但与HLA基因型无关第九章 脂代谢及脂代谢紊乱检验1 LDL受体途径:LDL或其他含ApoB100,

12、E的脂蛋白如VLDL,-VLDL均可与LDL受体结合,内吞入细胞使其获得脂类,主要是胆固醇,这种代谢称为LDL受体途径。2 动脉粥样硬化AS:指动脉内膜因脂质、血液成分的沉积,平滑肌细胞及胶原纤维增生,并伴有不同程度坏死及钙化等一类慢性进行性的病理改变。3 胆固醇的逆向转运途径:HDL可将胆固醇从外周组织运回到肝再循环或以胆酸的形式排泄,这一过程称胆固醇的逆向转运。4 血脂:是血浆中脂质(类)的总称。包括三酰甘油TG、磷脂PL、游离胆固醇FC及胆固醇酯CE、游离脂肪酸FFA等。1. 引起动脉硬化的脂蛋白乳糜微粒与AS:CM颗粒大,不能透过动脉内膜,不易进入动脉壁,故一般不引起AS。极低密度脂蛋

13、白与AS:当血浆VLDL浓度升高时,其颗粒变小生成VLDL残粒,并且胆固醇含量相对增加,因而具有致AS作用。VLDL浓度升高时,可影响其他种类脂蛋白的浓度和结构。血浆VLDL浓度升高伴有血浆HDL浓度下降,导致题记抗AS的因素减弱。VLDL增高常与其他冠心病危险因素想伴随。中间密度脂蛋白与AS:因富含TG的VLDL经LPL水解生成脂蛋白残粒(IDL),并转变成富含胆固醇和ApoE的颗粒沉积于血管壁。故IDL一直以来都被认为具有致AS作用。低密度脂蛋白与AS:LDL升高及LDL被氧化是发生AS的前提条件。脂蛋白与AS:Lp(a)与AS有明显的相关性,是公认的致AS的独立危险因素。HDL与AS:H

14、DL可将泡沫细胞中得胆固醇带出来,逆转运至肝进行分解代谢,可减少脂质在血管壁的沉积。2.测定血清总胆固醇-决定性方法:同位素稀释-质谱法;参考方法:化学法中得ALBK法;常规方法为酶法(COD-PAP法)血清三酰甘油-决定性方法:同位素稀释-质谱法;参考方法:美国CDC采用化学法中的二氯甲烷-硅酸-变色酸法;常规方法:酶法(GPO-PAP法)3.高脂蛋白血症按临床表型分类表型血浆4过夜外观TCTGCMVLDLLDL备注脂蛋白电泳奶油上层,下层清澈罕见,易发胰腺炎CMa澄清常见,易发冠心病脂蛋白带浓染b澄清或轻混很常见,易发冠心病、前-奶油上层,下层混浊宽带很少见,易发冠心病宽带澄清或混浊较常见

15、,易发冠心病前-脂蛋白带增宽浓染奶油上层,下层混浊较少见,易发胰腺炎显示CM带和前-脂蛋白带增宽浓染4. 载脂蛋白的功能:与脂质的亲和作用而使脂质溶于水性介质中运转胆固醇和三酰甘油作为脂蛋白外壳的结构成分,与脂蛋白外生物信息相联系以配体的形式作为脂蛋白与特异受体的连接物激活某些与血浆脂蛋白代谢有关的酶类第十章 钠、钾、氯和酸碱平衡检验1 血气分析:临床上将血液气体分析和血液酸碱度测定统称为血气分析。常用于判断机体是否存在酸碱平衡失调以及缺氧和缺氧程度等项目的检测。2 二氧化碳分压(PCO2):指物理溶解在血液中的CO2所产生的张力。3 氧分压(PO2):指物理溶解在血液中的O2所产生的张力。4

16、 氧饱和度(SatO2):指血液在一定的PO2条件下,血液中被氧结合的氧合血红蛋白的量占全部可结合的血红蛋白容量的百分比。5 缓冲碱(BB):指血液中的所有具有缓冲作用的阴离子总和,包括HCO3-,HPO42-,血浆蛋白及血红蛋白等。6 代谢性酸中毒:指细胞外液H+增加和(或)HCO3-丢失而引起的以血浆HCO3-减少为特征的酸碱平衡紊乱。7 呼吸性酸中毒:由于肺部疾病、呼吸中枢抑制以及呼吸肌麻痹等原因引起的呼吸功能障碍,CO2呼出不畅,使血浆H2CO3浓度原发性升高。8 代谢性碱中毒:由于各种原因使碱性物质在体内积蓄过多或酸性物质大量丢失,造成体内HCO3-增多,血浆PH有升高趋势的现象。9

17、 呼吸性碱中毒:由各种原因导致的肺换气过度,CO2呼出过多,使血浆H2CO3浓度原发性降低而造成的。10. Donnan平衡学说:体液中阳离子总数应与阴离子总数相等,并保持电中性。阴离子常常随阳离子总量的改变而改变,而某一种阴离子的减少会使另一种阴离子增加来维持电中性。11. P50:指使Hb氧饱和度达50%时的PO2.酸碱平衡的类型:代谢性酸中毒:Ph7.45,HCO3-增多,BE为正值呼吸性酸中毒:Ph7.45,PCO2下降,BE为负值第十二章 肝胆疾病的检验1. 生物转化:机体对非营养物质进行性代谢转变,使其极性增加,水溶性增强,易于排出的过程。2. 胆汁酸的肠肝循环:排入肠道的各种胆汁

18、酸,在发挥作用以后,绝大部分可以被肠黏膜细胞主动或被动重吸收,经门静脉重新回到肝,肝细胞将游离胆汁酸再转变为结合胆汁酸,与新合成的结合胆汁酸一起,被再次排入肠道的过程。3. 黄疸:由于胆红素在组织细胞内沉积而造成的黄染现象。4. 显性黄疸:当血清中胆红素浓度超过34.2umol/L时,可出现肉眼可见的黄染现象,称为显性黄疸。5. 隐性黄疸:血清中胆红素浓度超过正常值,但不超过34.2umol/L时,为高胆红素血症,肉眼观察不出巩膜、皮肤有黄染,称为隐性黄染疸。6. 初级胆汁酸:肝初生成的胆汁酸称为初级胆汁酸,主要包括胆酸CA和鹅脱氧胆酸CDCA。7. 次级胆汁酸:经过肠道细菌转化生成的胆汁酸叫

19、做次级胆汁酸,主要包括脱氧胆酸DCA和石胆酸LCA。1.肝组织结构的特点解剖学特点:有双重血液供应:肝静脉和门静脉双重血液供应有双重输出通道组织学特点:组织结构特点:有大量的微绒毛;具有较高的通透性;有丰富的线粒体;有丰富的内质网、核蛋白体和高尔基体;有众多的酶系肝细胞可再生2肝细胞损伤后各物质代谢变化蛋白质:血浆蛋白含量降低血氨升高,血尿素降低血浆氨基酸比例失调糖代谢:丙酮酸含量升高血糖平衡紊乱血清半乳糖浓度增高脂代谢:分解减少,合成增多酮体代谢紊乱血清胆固醇增高磷脂增高激素代谢:在体内堆积,引起物质代谢紊乱。维生素代谢:吸收减少,活化减少3. 简述肝脏在人体物质代谢中的作用?(1) 接受来

20、自消化道吸收的各种物质,如氨基酸、糖、脂肪酸、胆固醇、脂类、维生素和矿物质等,并进行加工和储存。 (2)合成除-球蛋白以外的几乎所有的血浆蛋白质,如清蛋白、和球蛋白、凝血因子和转运蛋白质等。 (3)合成并分泌胆汁酸,调节胆固醇代谢并促进脂肪的吸收。 (4)加工处理体内产生(如氨、胆红素等)和外界进入(如药物、毒物、致癌物等)的非营养物质,保护机体免遭侵害。 (5)肝脏也是多种激素(如甲状腺素、类固醇激素等)在发挥调节作用后降解的主要部位,籍此可调节血浆激素水平。 4.生物转化反应类型:氧化、还原、水解(第一相反应)和结合(第二相反应)特点:连续性、多样性、失活与活化双重性意义:对体内生物活性物

21、质进行灭活,同时有利于排出废物及异物,具有保护机体的作用。对外源性物质的生物转化,有时反而出现毒性或致癌、致畸等作用。5.血清总胆红素测定的意义: 黄疸及黄疸程度的鉴别肝细胞损害程度和预后的判断新生儿溶血症再生障碍性贫血及数种继发性贫血6.黄疸的成因与发生机制胆红素形成过多:大量未结合胆红素在血中积聚而发生高未结合胆红素血症肝细胞处理胆红素的能力下降:血中未结合胆红素和结合胆红素均升高胆红素在肝外的排泄障碍:造成结合胆红素升高第十三章 肾功能及早期肾损伤检验1. 肾血流量:指单位时间内流经双侧肾的血液量,是肾小球滤过的物质基础。2. 肾小球滤过率(GFR):指单位时间内两肾生成的原尿量来反应。3. 逆流倍增:指平行的髓袢降支和升支中的液体流向相反构成了一个“逆流系统”,降支段对水易通透,而对NaCl不易通透。4. 肾清除率:单位时间内(min)肾脏能将多少量(ml)血浆中所含的某种物质全部清除而由尿排出,结果以ml/min表示。5. 肾病综合征:是以大量蛋白尿、低蛋白血症、严重水肿和高脂血症为特点的综合征。6. 蛋白尿:若

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