炎琥宁氯化钠注射液处方筛选

1、炎琥宁氯化钠注射液处方筛选卢宏丽1，刘旻娟2，胡杰3，郭小青3(1. 山西省肿瘤医院药剂科 太原 030013；2.陕西省渭南市中心医院药剂科 渭南 714000； 3. 山西大学中医药现代研究中心 太原 030006)摘要： 目的： 优选炎琥宁氯化钠注射液的处方。方法： 应用L25(53)正交试验法，以有关物质、含量、PH值变化为指标筛选处方。结果：处方中辅料最佳组成为PH6.26.5，L-半光氨酸0.05%，枸橼酸0.04%；采用该处方制备样品在经稳定性、冻融试验考察，质量稳定。结论：处方设计合理，注射液质量稳定。关键词： 炎琥宁氯化钠注射液； 有关物质； 处方筛选 Formula Opt

2、imization of Potassium Sodium Dehydroandrographolide Succinate and Sodinm Chloride injectionLU Hong-Li1，LIU Wen-Juan2，WU Chun-Ling3，GUOxiao-qing3(1.The pharmacy department of Shanxi Province Tumour Hospital , Taiyuan 030013； 2. Weinan Central Hospita of Shaanx，Weinan 714000； 3. The Chinese Medicine

3、Modern Research Center of Shanxi University，Taiyuan 030006 )Abstract: Objective: To optimize the Formula of Potassium Sodium Dehydroandrographolide Succinate and Sodinm Chloride injection. Methods: Orthogonal test of L25 (53) was applied for screening and related substances,contents,pH value as inde

4、xes. Results: The key factors in optimized formula was the following: the solution pH value of 6.26.5, 0.04percent citrate buffer, and 0.05 percent the antioxidant L-cysteine, Conclusion:The formula is reasonable in design and the injection is stable in quality.Key words: Potassium Sodium Dehydroand

5、rographolide Succinate and Sodinm Chloride injection；related substances；Formula Optimization 炎琥宁(Potassium sodium drographolide succinate) 来源于爵床科植物穿心莲的穿心莲内酯新型衍生物，化学名称为14-脱羟-11, 12-二脱氢穿心莲内酯-3, 19-二作者简介：卢宏丽，山西省太原市人（1973，07-）， 琥珀酸半酯钾钠盐一水合物，临床适用于病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染的治疗【1】，目前国内已上市的品种有注射用炎琥宁、炎琥宁氯化钠注射液，炎琥宁氯化钠注射

6、液可主管药师，主要从事医院制剂和新药开发研究。以避免药物使用配制过程中引起的二次污染，但是，目前炎琥宁氯化钠注射液经常发现有关物质不符合规定（5%），因此，对其处方及生产工艺进行严格筛选并考察样品的稳定性十分必要。1 试药与仪器1.1 试药炎琥宁原料及对照品（湖北荷普药业有限公司，批号：080504；对照品由原料精制而得）；枸橼酸（江西国药有限责任公司，批准文号：国药准字H36020075）；L-半胱氨酸(天津天安药业股份有限公司；批准文号：国药准字H20054014)；氯化钠（北京双鹤药业股份有限公司；批准文号：H11020997）；氢氧化钠（天津市化学试剂三厂；分析纯）；甲醇（Fisher

7、 ChemAlert；色谱纯）；磷酸二氢钾（天津市博迪化工有限公司；分析纯）；磷酸（天津市化学试剂三厂；分析纯）；注射用水。1.2 仪器 AA. 样品（Sample ）BB. 对照品（control）CC. 辅料（Adjuvant）图1. 炎琥宁氯化钠注射液有关物质HPLC检测图谱Fig 1. HPLC Chormatogram of related substance of Potassium Sodium Dehydroandrographolide Succinate and Sodinm Chloride injection1炎琥宁（Potassium Sodium Dehydroan

8、drographolide Succinate） 2有关物质(Related substance) 3 辅料（Adjuvant） Waters-1525高效液相色谱仪，2487检测器，Brees色谱工作站(waters公司)；Diamonsil C18色谱柱(迪马公司)；BS210S分析天平（Sartorius公司）；CRMDX-280高压灭菌锅（上海申安医疗器械厂）；Mettler toledo 320-S PH计（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。2 实验方法2.1 有关物质测定方法2及验证色谱条件：色谱柱 Diamonsil C18（200 mm 4.6 mm , 5m )；流动相: 0

9、.05磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节PH值至2.5左右）-甲醇（4060）；检测波长：251nm。溶液的配制及测定：取炎琥宁氯化钠注射液适量，加流动相稀释成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加流动相稀释成每1ml中含50g的溶液，作为对照溶液；精密量取供试品溶液及对照溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，量取供试品溶液色谱图中各杂质峰面积总和（扣除相对保留时间约小于0.29的辅料峰）与对照溶液色谱图中主成分峰面积，计算有关物质相对百分含量。在此色谱条件下炎琥宁与其降解产物峰之间分离度大于1.5，专属性强（图1）。2.2 含量测定方法2 色谱

10、条件：同2.1项下有关物质测定方法下的色谱条件。溶液的配制及测定：精密量取供试品适量(相当于炎琥宁10 mg)，置100 mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取经减压干燥(以P2O5为干燥剂)12小时以上的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品适量，精密称定，用流动相稀释成0.1 mgmL-1的对照品溶液；精密量取供试品溶液及对照溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，测定，按外标法以峰面积计算含量。2.3 制备工艺按正交设计表中试验号，取相对应的枸橼酸和L-半光氨酸及氯化钠0.9g，加注射用水约80ml溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液至相应的PH值，加0.07(w/v)的

11、药用炭搅拌吸附20min，过滤脱炭；加0.2g炎琥宁搅拌溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调节至相应的PH值，加0.01(w/v)的药用炭搅拌吸附15 min，过滤，脱炭，加注射用水至100ml，灌装于100ml的输液瓶中，密封， 115灭菌30min。3 正交设计3.1因素-水平的选择 影响炎琥宁水溶液稳定的主要因素有PH值、温度、氧、金属离子等3，参照原处方及文献4 ，选择了L25(53)正交表，因素-水平如下（表1）。表1. 正交实验因素水平表因素水平PH值（A） L-半光氨酸浓度（B）枸橼酸浓度（C）15.50.010.0226.00.050.0436.20.100.1046.50.15

12、0.2057.00.200.402.4 实验结果分析方法 以有关物质相对百分含量和炎琥宁含量为指标，分别进行方差分析，并分析灭菌前后PH值变化量与灭菌前PH值、L-半光氨酸浓度、枸橼酸浓度之间的相关性。4 结果4.1实验结果正交试验结果（表2）4.2 方差分析结果以有关物质相对百分含量和炎琥宁含量为指标的方差分析结果（表3、4）表2. L25(53)正交实验表试验号PH值 （A） L-半光氨酸浓度（B）枸橼酸浓度（C）空白（D）有关物质相对百分含量（）含量（%）灭菌后PH值 PH值111124.3895.214.770.73212233.7995.774.710.79313343.9896.1

13、24.720.78414451.0898.284.720.78515513.9895.674.690.81621233.9495.545.240.76722343.8096.115.170.83823454.0595.375.160.84924513.9995.495.130.871025123.9896.035.130.871131343.2696.315.310.891232452.5497.115.320.881333512.9796.255.290.911434122.7197.225.380.821535232.7296.985.320.881641453.7195.895.580.

14、921742513.5995.946.350.151843123.4296.276.400.101944233.9796.026.460.042045344.7494.296.500.002151519.0390.196.340.662252125.2394.156.960.042353235.8393.777.000.002454348.4391.177.08-0.082555458.5992.037.05-0.05表3. 以有关物质相对百分含量为指标的方差分析结果变异来源离均差平方和自由度均方F值P值A61.06415.2719.83p0.01B4.3741.091.41p0.05C3.0

15、640.771.00p0.05SSe3.0640.77 F0.01(4, 5)=15.98 F0.05(4, 5)=6.39表4. 以炎琥宁含量为指标的方差分析结果变异来源离均差平方和自由度均方F值P值A56.70414.18132.78p0.01B1.0840.272.53p0.05C0.4340.111.00p0.05SSe0.4340.11 F0.01(4, 5)=15.98 F0.05(4, 5)=6.394.3 相关性分析结果灭菌前后PH值变化量与灭菌前PH值、L-半光氨酸浓度、枸橼酸浓度之间的相关性分析结果（图2）。结果分析表明，炎琥宁氯化钠注射液制备过程中对有关物质和含量的影响因

16、素一致，主要影响因素均为PH值（p0.01），其最佳PH值6.26.5，L-半光氨酸浓度、枸橼酸浓度为非主要因素（p0.05）；灭菌前后PH值变化量与灭菌前PH值、L-半光氨酸浓度、枸橼酸浓度之间无相关性。根据分析结果选择了炎琥宁氯化钠注射液的处方：每100ml含炎琥宁0.2g，氯化钠0.9g，L-半光氨酸浓度0.05g，枸橼酸浓度0.04g；PH值须严格控制在6.26.5之内。采用该处方制备样品在经加速、室温留样稳定性、连续5次冻融试验考察，质量稳定。5. 讨论图2. 相关性分析结果图Fig 2. Analysis result of correlation 炎琥宁为穿心莲内酯与琥珀酸酐等反

17、应而制得的半合成药物，其分子结构中存在桥形共轭结构，、不饱和内酯键，水溶液容易发生水解,导致产品含量下降、有关物质升高，国内关于炎琥宁的水解影响因素未见详细的相关报道。炎琥宁和穿琥宁母体结构相同，只是将穿琥宁分子结构中琥珀酸中的H+变成了Na+，文献报道【5】穿琥宁水解符合一级动力学反应，降解速率与穿琥宁的浓度、溶液离子强度无关；受缓冲液的浓度、溶液pH值以及温度的影响较显著。本实验结果显示，炎琥宁氯化钠注射液制备的主要影响因素为PH值，其最佳PH值为6.26.5，而缓冲液和抗氧剂浓度的影响并不显著，可能与大容量注射剂中缓冲盐和抗氧剂浓度使用范围过窄有关。成品在灭菌后pH会有所下降，分析原因可能是由于受热后有酸性降解产物产生所致，个别样品灭菌后pH略有升高，可能是测定误差，灭菌前后PH值变化量与灭菌前PH值、L-半光氨酸浓度、枸橼酸浓度之间无相关性的原因尚有待探讨。参考文献