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1、茵陈蒿汤醇提物对机体抗氧化能力影响更新日期:2011-05-18 点击: 洪敏朱荃李晓冬孙小玉 提要为探讨茵陈蒿汤醇提物的保肝作用与机体抗氧化 能力的关系,实验观察茵陈蒿汤醇提物在D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)和卡介苗+脂多 糖(BCG+LPS)模型中对ALT、GST、LPO、SOD及 GSH 的影响。结果:茵陈蒿汤醇提物 ig. 6 g /kg和9 g/kg明显降低 D-CalN+LPS 肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)活性,降低谷胱甘肽-S -转移酶(GST)水平,减少肝匀浆中脂质过氧化物(LPO)含量,对超氧化物歧化酶(SOD)活性无 明显影响;4 g/kg,6 g/k

2、g和9 g/kg显著降低 BCG+LPS免疫性肝损伤小鼠血清 ALT 水平,6 g/kg和9 g/kg增加肝匀浆还原型谷胱甘肽(GSH)含量。表明茵陈蒿汤醇提物经口给药能明显 提高小鼠抗自由基损伤的能力,为其保肝作用的机理之一。 关键词茵陈蒿汤醇提物;BCG+LPS免疫性肝损伤;D-Ga lN+LPS肝损伤 Antilipoperoxidation Activity of Alcohol Extract of Capillaris D ecoction Hong Min, Zhu Quan, Li Xiaodong, et al Nanjing University of TCM, Abstr

3、actThe mechanism of protecting mice from experi mental liver injury of alcohol extract of Capillaris decoction were observed.Ele vated serum ALT,GST activity in D-GalN+LPS liver injury model were reduced by a dose-dependent effect of alcohol extract,coresponding with reduced LPO level.Aft er adminis

4、tration of BCG+LPS, serum ALT level increased significantly.Alcohol e xtract reduced ALT activity and increased GSH level apparently.These results sug gest alcohol extract of Capillaris decoction might protect mice from experimenta l liver injury,through a way of antilipoperoxidation. Key wordsAlcoh

5、ol extract of Capillaris Decoction; BCG+LPS liver injury;D-GalN+LPS liver injury 茵陈蒿汤出自伤寒论,是治疗湿热黄疸的要方,临床用于多种黄疸证及传染性肝炎、急 性病毒性肝炎、重型肝炎的治疗。茵陈蒿汤保肝作用得到多数学者的认可,韩德五等研究表 明茵陈蒿汤对四氯化碳(CCl4)所致的肝损伤显示出良好的保肝作用1;对于大 鼠异硫氰酸萘酯(ANiT)造成的黄疸型肝炎模型,茵陈蒿汤醇提物能使升高的谷丙转氨酶 、谷草转氨酶降低,肝组织病理改变减轻2;孙学惠等研究提示3茵陈 蒿汤醇提物对抗四氯化碳肝损伤的作用强于水煎液。茵陈蒿汤

6、保肝作用的机理研究不多,林 利光研究表明茵陈蒿汤中含有葡萄糖醛酸酶抑制活性物质4,认为可能是其 抗肝损伤的机制之一。 本文研究了茵陈蒿汤对D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)肝损伤及卡介苗+脂多糖(BCG+LPS )免疫性肝损伤小鼠血清 ALT、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、脂质过氧化物(LPO)、超氧化物歧 化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的影响,观察其对机体抗氧化能力的影响。 1实验材料 1.1动物:ICR小鼠,昆明种小鼠,南京中医药大学 动物房,苏动(质)95038。 1.2药材:茵陈蒿、栀子、大黄,购自南京中医药 大学门诊部。 1.3试剂:联苯双酯滴丸(Biphen

7、yldimethyl dicar boxylate,BDD),广州星群(药业)股份有限公司生产,;脂多糖(Lipopolysaccharide ,LPS),SIGMA 公司产品;D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN),重庆医学院, ;卡介苗(BCG),上海生物制品研究所,;还原型谷胱甘肽(Reduced Glutathiou,GSH )上海酵母厂生产,;硫代巴比妥酸(TBA),江苏宜兴第二合成化厂,;1,1, 3,3四乙氧基丙烷(TEP),Fluka Chemika 产品;谷丙转氨酶测定试剂盒,SOD测定试剂盒 ,GSH测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 2方法及

8、结果 2.1茵陈蒿汤醇提物对D-GalN+LPS诱导小鼠肝损伤A LT、LPO、SOD及GST的影响:ICR小鼠,70只,(20.81.3)g,随机分为8组,即正常组( Normal)、D-GalN+LPS模型组(D-GalN+LPS)、联苯双酯组(BDD)、醇提物(B)1.78 g/kg,2.67 g/kg,4.0 g/kg,6.0 g/kg,及9.0 g/kg组。给药组灌胃给药,正常组给等量生理盐水,1 次/d,共3 d,末次给药1.5 h后,正常组腹腔注射10 ml/kg生理盐水,其余各组腹腔注射D- GalN 450 mg/kg和LPS 100g/kg,15 h后,小鼠眼眶取血,分离血

9、清,测定血清谷丙转 氨酶(ALT)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性5;同时 取肝脏0.20.3 g,制成10%的匀浆,匀浆再以3 500 rpm离心10 min,取上清测脂质过氧化 物(lipid peroxidation,LPO)6和超氧化物歧化酶(superoxide dismutese,SOD) 活性。结果见表1。 由表1可见,茵陈蒿汤醇提物6 g/kg,9 g/kg,对D-GalN+LPS诱导的小鼠血 清ALT升高有明显的降低作用( P0.01,P 0.01),且作用随着剂量的增大而增强;茵陈蒿汤醇提物6 g/kg、9 g/kg可

10、显著降低D-GalN+ LPS诱导的肝损伤小鼠血清GST活性的增高( P0.05)。茵陈蒿汤4 g/kg ,6 g/kg,9 g/kg可显著降低D-GalN+LPS引起的肝组织匀浆LPO水平升高( P0.05, P0.01);茵陈蒿汤醇提物对小鼠肝匀浆SOD活性无明显影 响( P0.05)。 表1茵陈汤醇提物对D-GalN+LPS诱导小鼠肝损伤ALT、LPO、SOD及GST的影 响 ( s) 组别 剂量 g/(kg.d) ALT (U) LPO (mol/L) SOD (NU/ml) G ST(IU/L) Normal - 25.505.21 0.7680.094 395.2829.10 17.973.16 D-GalN+LPS - 171.7281.51* 1.1390.210* 363 .0775.80 40.049.93* BDD 0.15 52.7839.37# B 1.78 168.7025.40* 0.9230.198 399.9126.02 4

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