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文档简介
1、组织培养程序,一、材料处理,把胡萝卜切成约4cm的段; 去除表皮; 靠外层切成约4x1x1cm的条,里面木质部和髓不要。,二、消毒和清洗,把切好的材料,放在100ml的烧杯里,加入75酒精,浸泡30秒; 把酒精倒入废液瓶里,然后加入0.2升汞,浸泡2530分钟; 把带有升汞的烧杯拿到超净工作台,取出材料,放入培养皿,用灭菌水洗45分钟,重复3次。,三、接种,把洗净的材料用烧过的镊子夹到盛有滤纸的培养皿里,去除表面一层,然后切成约7x5x5mm的块; 把切好的材料,用烧过的镊子夹到锥形瓶里,35块/瓶。,注意事项:,防火。实验中要经常用酒精消毒、用酒精灯烧镊子、刀具,注意安全。 无菌操作。材料经
2、升汞消毒后,即认为是消毒干净,此后的操作中的用具要求无菌。为防止染菌,注意:手要用酒精擦干净;镊子和刀经常在火焰上烧;锥形瓶、手不要放在盛材料的培养皿上方。 废液处理。酒精要回收,放原处;升汞有剧毒,小心不要溅出,废液倒回原处。,常见错误举例,托盘端到超净工作台里。 材料切得过小。 材料消毒时间过长。 切材料时下面没垫滤纸。 镊子、刀在酒精灯上烧过立即放到盛酒精的烧杯里。 操作时,手、三角烧瓶在盛材料的培养皿上方活动,容易把菌带到材料上。 把接种的切块压入培养基里面。 接种时瓶口垂直向上,手、镊子上的赃物容易掉到瓶里。 升汞回收倒入酒精桶里。,一、材料处理 把胡萝卜切成约4cm的段; 去除表皮
3、; 靠外层切成约4x1x1cm的条,里面木质部和髓不要。 二、消毒和清洗 把切好的材料,放在100ml的烧杯里,加入75酒精,浸泡30秒; 把酒精倒入废 液瓶里,然后加入0.2升汞,浸泡2530分钟; 把带有升汞的烧杯拿到超净工作台,取出材料,放入培养皿,用灭菌水洗45分钟,重复3次。 三、接种 把洗净的材料用烧过的镊子夹到盛有滤纸的培养皿里,去除表面一层,然后切成约7x5x5mm的块; 把切好的材料,用烧过的镊子夹到锥形瓶里,35块/瓶。 注意事项: 防火。实验中要经常用酒精消毒、用酒精灯烧镊子、刀具,注意安全。 无菌操作。材料经升汞消毒后,即认为是消毒干净,此后的操作中的用具要求无菌。为防止染菌,注意:手要用酒精擦干净;镊子和刀经常在火焰上烧;锥形瓶、手不要
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