还原糖含量的测定ppt课件.ppt_第1页
还原糖含量的测定ppt课件.ppt_第2页
还原糖含量的测定ppt课件.ppt_第3页
还原糖含量的测定ppt课件.ppt_第4页
还原糖含量的测定ppt课件.ppt_第5页
已阅读5页，还剩8页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验六还原糖和总糖含量的测定（3,5-二硝基水杨酸比色法）,1,目的,通过本次实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作，熟悉分光光度计的使用方法。,2,原理,还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖。乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。,3,在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸试剂（DNS）共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其

2、他产物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值，查对标准曲线并计算，就可以分别求出样品中还原糖和总糖的含量。,4,5,操作步骤,1、绘制葡萄糖标准曲线,6,将以上各管上下颠倒几次使溶液混匀后，按顺序倒入比色杯中，在540nm波长条件下进行比色测定：用0号管溶液调零点，分别记录各管吸光值；然后以葡萄糖浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制出标准曲线。,7,2、测定样品中还原糖和总糖含量。 （1）提取样品中的还原糖： 准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中，加少量蒸馏水调成糊状，再加入50ml蒸馏水，摇匀，置于50水浴条件下2

3、0分钟，使还原糖浸出；在4000rpm、5分钟条件下进行离心，得到的上清液倒入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，上下颠倒几次将溶液混匀，作为还原糖待测液。,8,（2）提取样品中的总糖： 准确称取0.1g食用面粉放置于100ml三角瓶中，加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏水，沸水浴30分钟（注意不能把水烧干）。用滴管吸取12滴水解液于白瓷板上，加1滴I-KI溶液，如显示出蓝色说明水解不完全，可适当延长沸水浴时间；若不显蓝色，则说明水解完全。,9,待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，用6mol/L NaOH中和至微红色，在4000rpm、5分钟条件下离心，得到的上清液转移到100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，上下颠倒几次混匀溶液，作为总糖待测液。,10,（3）显色和比色，按下表操作,11,结果处理,以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。按下列公式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量：,12,注意事项,1、标准曲线制作与样品含糖量测定应尽量同时进行，一起显色和比色。 2、实验过程中所有的试管要洁净，加入各种试剂量要准确。 3、试剂不可倒出试剂瓶，必须用干净的移液管吸取，用后盖好瓶塞，放回原处。 4、移液管使用：有色看外边缘，无色看中间凹处。 5、沸水浴：须等水沸腾后，才能将要加热的物品放入锅中；时刻注意锅内的水，

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 作文作品

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论