药物分析习题

1、l 药品：常指由药物经一定的处方和工艺制备而成的制剂产品，是可供临床使用的商品l 药物分析：是运用化学、物理化学或生物化学的方法和技术研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究有代表性的中药制剂和生化药物及其制剂的质量控制方法l 药品质量标准：系根据药物自身的理化与生物学特性，按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所制定的，用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定l 中国药典：由国家药典委员会编撰，经国家食品药品嫉妒管理局批准颁布实施的，是我国记载药品质量标准的国家法典，是对药品质量要求的准则，具有全国性的法律约束力（由凡例、正文、

2、附录、索引四部分组成，目前共9版1953、1963、1985、1990、1995、2000、2005、2010现行）l 炽灼残渣：系指有机药物经碳化或挥发性无机药物加热分解后，再经高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐 l 杂质限量：指药物中所含杂质的最大限量 l 一般杂质：是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引进的杂质，他们的含量高低与生产工艺水平密切相关，所以也常常称为信号杂质l 特殊杂质：是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，也常称为有关物质l 重金属：系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫代钠作用显色的金属杂质l 恒重：是供试品连续两次干燥或灼烧后的重量差异

3、在0.3mg以下的重量l 易炭化物：指药物中存在的遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质l 药物的鉴别试验：是根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪，它是药品质量检验工作中的首要任务，只有在药物鉴别无误的情况下进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义 l 一般鉴别试验：依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪l 专属鉴别试验：是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪l 色谱鉴别法：是利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行

4、为进行的鉴别试验l 维生素：是维持人类机体正常代谢功能所必需的一类活性物质，主要用于机体的能量转移和代谢调节，机体不能自行合成，需从食物中摄取 l 抗生素：是生物在其生命活动中产生的，能在低位浓度下有选择的抑制或影响它种生物机能的化学物质的总称 l 国家药品标准：是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据l GLP药物非临床研究质量管理规范 GCP药物临床试验质量管理规范 GMP药品生产质量管理规范 GSP药品经营质量管理规范 GAP中药材生产质量管理规范（试行） USP 美国药典BP英国药典EP欧洲药典JP日本药局方Ph.Int.国际药典l 药品质量研究的主要内容：名称、性

5、状、物理常数、鉴别、检查、含量测定、类别、贮藏和制剂l 药物杂质的分类：按来源：一般杂质、特殊杂质按毒性：毒性杂质、信号杂质按化学类别和特性：无机杂质、有机杂质、残留溶剂l 莨菪烷类抗胆碱药物是由莨菪烷衍生物声的氨基醇与不同的有机酸缩合而成酯的生物碱。l 典型的莨菪烷类药物：硫酸阿托品、氢溴酸后马托品、硫酸莨菪碱、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、甲溴东莨菪碱、丁溴东莨菪碱l 主要的理化性质：1、水解性：具有酯的结构，易水解。2、碱性：阿托品和东莨菪碱分子结构中，五元脂环上有叔胺氮原子，因此具有较强的碱性，易与酸成盐。3、旋光性：氢溴酸东莨菪碱分子结构中含有不对称碳原子，呈左旋体。阿托品中虽然有

6、不对称碳原子，但是为外消旋体，无旋光性，区别阿托品和东莨菪碱。l 鉴别试验：1、托烷生物碱类的Vitaili鉴别反应：Vitaili鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应，原理是阿托品、莨菪碱等莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变成三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。2、与硫酸-重铬酸钾的反应：本类药物水解后，生成莨菪酸，可与硫酸根-重铬酸钾在加热条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。3、与生物碱显色剂或沉淀剂的反应：生物碱在酸性水溶液中可与金属盐类或大分子酸类等沉淀试剂反应，生成难溶性的

7、盐、复盐或配合物沉淀。但不同的沉淀试剂与生物碱反应灵敏度不同。4、光谱鉴别法：UV、IR。5、色谱法：主要有TLC、HPLCl 抗生素：是生物（包括微生物、植物、动物）在其生命活动中产生的（或并用化学、生物或生物方法衍生的），能在地位浓度下游选择的抑制或影响它种生物机能的化学物质的总称。l -内酰胺类抗生素的结构：青霉素和头孢菌素分子中都有一个游离得羧基和酰胺侧链氢化噻唑环或氢化噻嗪环与-内酰胺并合的杂环分别构成二者的母核青霉素分子中的母核称为6-氨基青霉烷酸（6-APA）头孢菌素类分子中的母核称为7-氨基头孢菌烷酸（7-ACA），青霉素分子中有三个手性碳原子C2、C5、C6，头孢菌素分子中有

8、两个手性碳原子C6、C7。l -内酰胺类抗生素的性质：1、不稳定性：-内酰胺环视该类抗生素的结构活性中心，其性质活泼，是分子结构中最不稳定的部分，其稳定性与含水量与纯度有关，本类药物在酸、碱、青霉素酶、羟胺、某些金属离子（铜铅汞银）或氧化剂作用下，易发生水解和分子重排，导致-内酰胺失去抗菌活性。2、旋光性：都具有手性碳原子，都具有旋光性。3、酸性和溶解性：有游离的羧基具有相当强的酸性，与碱金属成盐，易溶于水。与有机碱普鲁卡因成盐，难溶于水。4、紫外吸收特性：青霉素母核无明显uv，多数有苯环取代。头孢菌素，母核有共轭体系。l 不同条件下-内酰胺类药物水解产生的不同物质：1、碱性或青霉素酶青霉素噻

9、唑酸2、PH为4青霉素烯酸3、PH为2时青霉素酸4、强酸加热或者金属离子青霉醛、青霉胺、二氧化碳l -内酰胺类药物鉴别：1、色谱法：HPLC、TLC。2、IR、UV。3、羟肟酸铁反应：青霉素及头孢菌素在碱性中与羟胺作用，-内酰胺环破裂生成羟肟酸，在烯酸中与高铁离子呈色。4、类似肽键的反应：本类药物具有CONH结构，一些取代基有-氨基酸结构，可显双缩脲和茚三酮反应。5、其他呈色反应：侧链含有苯酚基团时，能重氮淡苯磺酸试液产生偶合反应而呈色。6、本类药物还可与变色酸硫酸、硫酸甲醛试剂反应呈色。l 检查：高分子聚合物、有关物质、异构体，一般采用HPLC法控制限量l 阿莫西林克拉维酸分散片组成成分及其

10、作用：阿莫西林克拉维酸片为混合制剂，主要成分是阿莫西林和克拉维酸钾。阿莫西林为光谱青霉素类抗生素，克拉维酸钾本身只有微弱的抗菌活性，但具有强大的光谱-内酰胺酶抑制作用，两者合用，可保护阿莫西林免遭-内酰胺酶水解，为一有效的-内酰胺酶抑制药。l 含量测定：多数采用HPLC，少数采用抗生素微生物检测法。l 氨基糖苷类抗生素结构：碱性环己多元醇为苷元，与氨基糖缩合成苷l 链霉素结构：一分子链霉胍和一分子链霉双糖胺结构合成的碱性苷，其中链霉双糖胺是由链霉糖与N-甲基-L-葡萄糖胺组成。具有三个碱性中心。l 巴龙霉素结构：巴龙胺和巴龙二糖胺结合而成的苷，有两个立体异构体，巴龙霉素I和巴龙霉素II.。药用

11、为二者的混合物，巴龙霉素I为主要成分，巴龙霉素II为微量成分。4个碱性中心。l 庆大霉素结构：由绛红糖胺、脱氧链霉胺、加洛糖胺缩合而成的苷，它是庆大霉素C复合物C1、C2、C1a、C2a。5个碱性中心。C1、C2、C1a结构相似，C2a是C2的异构体。l 奈替米星结构：与庆大霉素C1a基本相同。l 氨基糖苷类抗生素的性质：1、溶解性和碱性：含有多个羟基和碱性基团，水溶性抗生素，不溶于有机溶剂。2、旋光性：含多个氨基糖，具有旋光性。3、苷的水解和稳定性：含有而糖胺结构的抗生素分子中氨基葡萄糖与链霉素或D-核糖之间的苷键较强，而链霉胍与连霉双糖苷键结合较弱。酸性条件下链霉素水解为链霉胍和连霉双糖胺

12、，进一步水解为N-甲基-L-葡萄糖胺，碱性条件下使得链霉素水解为链霉胍及链霉双糖胺，并使链霉糖部分发生分子重排生成麦芽酚，这一性质是链霉素特有。4、紫外吸收特性：链霉素在230nm处有紫外吸收。庆大霉素、奈替米星等无紫外吸收。l 氨基糖苷类药物的鉴别试验：1、茚三酮反应：本类抗生素为氨基糖结构，具有羟基胺类和-氨基酸的性质，可与茚三酮缩合而成蓝紫色化合物。鉴别硫酸小诺米星及其制剂。2、molisch试验：具有五碳糖或六碳糖结构的氨基糖苷抗生素经酸水解后，在盐酸或硫酸作用下脱水生成糠醛（五碳糖）或羟甲基糠醛（六碳糖）这些产物遇-萘酚或蒽酮呈色。3、N甲基葡萄糖胺反应：本类药物经水解，产生葡萄糖胺

13、衍生物，如链霉素中的N甲基葡萄糖胺，硫酸新霉素，硫酸巴龙霉素中的D葡萄糖胺，在碱性溶液中与乙酰丙酮缩合成吡咯衍生物I，与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成樱桃红色缩合物II.。4、麦芽酚反应：此为链霉素的特征反应。链霉素在碱性溶液中，链霉素经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，再消除链霉素胍生成麦芽酚，麦芽酚与高铁离子在微酸性溶液中形成紫色配位化合物。5、坂口反应：此为链霉素水解产物链霉胍的特有反应，本品水溶液在氢氧化钠试液，水解生成链霉胍。链霉胍和8-羟基喹啉或-萘酚分别同次溴酸钠反应，其各自产物再相互作用生成橙红色化合物。6、硫酸盐反应：本类药物多为硫酸盐，鉴定硫酸盐

14、。7、色谱法：TLC、HPLC。8、光谱法：UV、IR。l 有关物质的检查：TLC、HPLCl 控制庆大霉素C组分的意义：本类抗生素多为同系物组成的混合物，同系物的效价、毒性各有不同，为了保证药品的质量，必须控制各组分的相对含量。庆大霉素C1、C2、C1a对微生物的活性无明显差异，但其毒副作用和耐药性有差异，导致各组分的多少影响产品的效价和临床疗效。因此采用HPLC测定各组分的含量。l 氨基糖苷类药物的含量测定：链霉素、庆大霉素采用微生物检测法测定含量。一般都采用微生物检测法和HPLC法测定含量。l 四环素类抗生素的化学结构：四并苯或萘并萘。l 中国药典收载的主要四环素类抗生素：盐酸土霉素、盐

15、酸金霉素、盐酸四环素、盐酸多西环素、盐酸米诺环素、盐酸美他环素。l 四环素类抗生素的性质：1、酸性与溶解度：本类抗生素母核C4位上有二甲氨基显弱酸性，C10位上的酚羟基和两个含有酮基的烯醇基的共轭双键系统显弱酸性，故四环素类抗生素是两性化合物。遇酸碱能成盐。易溶于水，不溶于有机溶剂。2、旋光性：分子中有不对称碳原子，有旋光性。3、紫外吸收和荧光性质：有共轭双键在紫外光驱具有吸收。此类抗生素在紫外光照射下产生荧光，他们的降解产物在紫外光照射下也有荧光。盐酸土霉素酸性降解绿色、盐酸金霉素碱性降解蓝色、盐酸土霉素碱性降解绿色加热变蓝色、盐酸四环素碱性降解黄色。4、稳定性：四环素类抗生素对各种氧化剂，

16、酸碱都是不稳定的。干燥的四环素类游离碱和他们的盐类避光条件下保存均较稳定，但其水溶液随PH的不同会发生差向异构化、降解等反应，尤其是碱性水溶液特别容易氧化，颜色很快变深，形成色素；差向异构化性质：四环素类抗生素在弱酸溶液中会发生差向异构化。这个反应时由于A环上手性碳原子C4构型的改变，发生差向异构化，形成差向四环素类。降解性质：酸性降解：在酸性条件下（PH2），特别是在加热情况下，四环素类抗生素C6上的醇羟基和C5a上的氢发生反式消去反应生成脱水四环素。碱性降解：在碱性溶液中，C环破裂，生成无活性的具有内酯结构的异构体，脱水四环素亦可形成差向异构体，称差向脱水四环素。l 四环素类抗生素的鉴别试

17、验：1、HPLC。2、TLC。3、IR。4、UV。5、显色法：四环素类抗生素遇硫酸立即产生颜色，不同的四环素产生不同的颜色，可区别各种四环素。如结构中具有酚羟基遇到三氯化铁试液即可呈色。l 四环素类抗生素的杂质检查：1生产或者储存过程中形成异构杂质、降解杂质采用HPLC检查。2、杂质吸光度：四环素类抗生素多为黄色结晶性粉末，异构体降解产物颜色较深，如差向四环素为淡黄色，因其不稳定有容易变为黑色，脱水四环素为橙红色，差向脱水四环素为砖红色。此类抗生素的存在均能使四环素类抗生素的外观色泽变深。因此中国药典2010规定了一定溶剂，一定浓度、一定波长下杂质吸光度的限量。3、残留有机溶剂l 含量测定：四

18、环素类抗生素含量测定采用HPLCl 甾体激素类：药物是一类具有环戊烷并多氢菲母核的激素类药物，有着十分重要的生理功能，包括天然激素类和人工合成品及其衍生。l 甾体激素类药物的基本结构：环戊烷并多氢菲母核。l 甾体激素类药物按照药理作用分类分为：肾上腺皮质激素、性激素（雄激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素）l 肾上腺皮质激素的代表药物：氢化可的松、地塞米松磷酸钠、醋酸去氧皮质酮、醋酸曲安奈德。l 肾上腺皮质激素代表药物的特点：氢化可的松为天然皮质激素，在临床上用作抗炎药，地塞米松A环C1、C2和C4、C5为双键，C9的位引入氟原子，C16引入甲基，抗炎作用更强。地塞米松磷酸钠则是地塞米松C21位

19、上的羟基与磷酸成脂，肌注可延长时间，磷酸部分在成盐，增大药物的水溶性。曲安奈德A环的结构与地塞米松相同，C9上也有F原子取代，C16、C17上的羟基与丙酮缩合形成环状结构。l 肾上腺皮质激素的结构：1、A环有4-3-酮基，部分药物C1、C2或C6、C7之间为双键。2、C17位上为-醇酮基，具有还原性。多数药物有C17-羟基，部分药物-醇酮基上的醇羟基与酸成脂，如地塞米松磷酸钠、醋酸去养皮质酮、醋酸曲安奈德。3、部分药物的C6或C9位为卤素取代。3、部分药物C11位上有羟基或酮基取代。l 雄性激素与蛋白同化激素的结构：1、A环有4-3-酮基。2、C17位有羟基，部分药物的羟基被酯化。3、雄性激素

20、的母核有19个碳原子，蛋白同化激素在C10上一般无角甲基，母核只有18个碳原子。l 雄性激素有甲睾酮、丙酸睾酮等、蛋白同化激素有苯丙酸诺龙、葵酸诺龙等。l 孕激素的结构：1、A环有4-3-酮基。2、C17位有甲酮基（17-羟孕酮类，如黄体酮、醋酸甲地孕酮）或乙炔基（19-去甲睾丸酮类、如炔诺酮、左诺孕酮）。3、多数在C17位上有羟基，部分药物的羟基被酯化。l 主要孕激素有：黄体酮、醋酸甲地孕酮、炔诺酮、左炔诺孕酮。l 雌激素的结构特点：1、A环为苯环，C3位上有酚羟基，有的药物C3位上的酚羟基成脂（如苯甲酸雌二醇）或成醚（如炔雌醚）。2、C17位上有羟基，有些药物C17位上羟基成脂。3、有些药

21、物在C17位上有乙炔基，构成19-去甲孕甾烷母核，如炔雌醇、炔雌醚。l 甾体激素类药物的性质：1、性状与溶解度：白色至微黄色粉末或结晶性粉末。除钠盐外，多数在三氯甲烷中微溶至易容，在水中几乎不容。2、熔点：测定熔点不仅具有鉴别意义，还可以反应药物的纯度。3、比旋度：甾体激素类药物多有手性碳原子，具有旋光性。测定比旋度是鉴别不同载体药物和检查药物纯杂程度的重要依据。在二氧六环、三氯甲烷、丙酮或醇溶剂中，多数药物显示右旋特征。而做炔诺酮、炔诺酮和炔雌醇为左旋。4、紫外吸收系数：载体激素类药物具有紫外吸收，最大吸收波长和吸收系数亦可反应药物的紫外吸收特征，具有鉴别意义，具有4-3-酮基团的药物在24

22、0nm波长附近有最大吸收，A环为苯环并具有酚羟基的雌激素类药物在280nm波长附近有最大吸收。l 甾体激素类药物的鉴别：包括化学鉴别法、紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、色谱法。l 化学鉴别法：1、与强酸的显色反应。2、官能团的反应l 与强酸的显色反应：许多甾体激素类能与硫酸、盐酸、磷酸、高氯酸等强酸反应呈色，其中与硫酸的呈色反应应用广泛。反应机制是酮基先质子化，形成正碳离子，然后与硫酸氢根作用呈色。l 官能团的反应：1、C17-醇酮基的呈色反应：质激素类药物分子结构中C17位上的-醇酮基具有还原性，能与四氮唑试液、氨制硝酸银试液（多伦试液）以及碱性酒石酸铜试液（斐林试液）反应呈色。与四氮

23、唑盐的反应广泛应用于皮质激素药物的分析。四氮唑盐具有氧化性，和C17-醇酮基反应后被还原为有色的甲 而显色。此反应除用于鉴别实验外，还用于皮质激素类药物薄层色谱的显色以及比色含量测定。（醋酸地塞米松砖红色沉淀、醋酸泼尼松显红色、醋酸去氧皮质酮黑色沉淀）。2、酮基的呈色反应：皮质激素、孕激素、雄激素和蛋白同化激素药物结构中含有C3-酮基和C20-酮基，可以和一些羰基试剂形成黄色的腙而用于鉴别。该反应也用于定量分析，异烟肼以选择性的作用于C3-酮基，用于比色含量测定。（醋酸可的松鉴别显黄色）。3、C17-甲酮基的呈色反应：甾体激素类药物分子结构中含有甲酮基以及活泼亚甲基时，能与亚硝基铁氰化钠、间二

24、硝基酚、芳香醛类反应呈色。黄体酮可与亚硝基铁氰化钠反应，生成蓝紫色产物，该反应作为黄体酮的专属、灵敏的鉴别方法，在一定条件下，黄体酮显示蓝紫色，其他常用甾体激素均不显示蓝紫色，或呈现淡橙色或不显色。（鉴别黄体酮显紫蓝色）。4、酚羟基的呈色反应：雌激素的C3位上的酚羟基，可与重氮苯磺酸反应生成红色偶氮染料。5、炔基的沉淀反应：一些具有炔基的甾体激素药物，如炔雌醇、炔诺酮、炔诺孕酮等，遇硝酸银试液，既生成白色的炔银沉淀加以鉴别。6、卤素的反应：有的甾体激素类药物在C6、C9或其他位置上有氟或氯取代，鉴别时需要对取代的卤原子进行确认。由于卤原子与药物是以共价键连接的，因此需采用氧瓶燃烧法或回流水解法

25、将有机结合的卤原子转化无机离子后在进行鉴别。7、脂的反应：一些药物为C17或C21位上有羟基的脂，如醋酸地塞米松、醋酸泼尼松等。药物中脂结构的鉴别，一般先进行水解，生成响应的羧酸，再根据羧酸的性质来鉴别。（醋酸去氧皮质酮采用此法。）l 紫外可见分光光度法：甾体激素类药物结构中有4-3-酮基、苯环或其他共轭结构，在紫外区有特征吸收，A环具有4-3-酮基的甾体激素类药物在240nm附近有最大吸收，C1位再引入双键，最大吸收波长没有显著改变，如地塞米松在C1、C2有双键，其最大吸收波长也为240nm，但若在C6、C7间有双键，其最大吸收波长会发生明显红移。A环具有酚羟基的雌激素类药物在280nm附近

26、有最大吸收。l 红外分光光度法（为何成为重要鉴别手段）：甾体激素类药物结构复杂，有的药物之间结构上仅有很小的差异，紧靠化学鉴别法难以区别。红外光谱特征性强，为本类药物鉴别的可靠手段。各国药典中，几乎所有的甾体激素原料药都采用红外分光光度法进行鉴别。l TLC：复方炔诺酮片采用此方法l 甾体激素类药物的有关物质：具有相似的甾体母核结构，需采用色谱法进行检查。（炔诺酮、醋酸去氧皮质酮有光物质采用TLC）（甲睾酮采用HPLC）l 硒的检查：有些甾体激素类药物，如醋酸地塞米松、醋酸氟轻松醋酸曲安奈德在生产过程中产生硒l 残留溶剂的检查：（地塞米松）l 游离磷酸盐的检查：一些肾上腺皮质激素的磷酸钠盐均是

27、由像样的皮质激素的C21位羟基与磷酸之花后形成的磷酸钠盐，如地塞米松磷酸钠等，在精制过程中有可能残留游离的磷酸盐，同时药物在贮藏过程中酯键反生水解可能产生游离的磷酸盐，因此需要检查游离磷酸盐，采用的方法是磷钼酸比色法。l 甾体激素类药物的含量测定：HPLC：地塞米松磷酸钠、醋酸曲安奈德、复方左炔诺酮片.。紫外可见分光光度法：甾体激素类药物结构中有4-3-酮基、苯环或其他共轭结构，在紫外区有特征吸收，A环具有4-3-酮基的甾体激素类药物在240nm附近有最大吸收，C1位再引入双键，最大吸收波长没有显著改变，如地塞米松在C1、C2间有双键，其最大吸收波长也为240nm。但若在C6、C7位间有双键，

28、最大吸收波长会发生明显红移。A环具有酚羟基的雌激素类药物在280nm附近有最大吸收。（炔雌醚、醋酸泼尼松龙片）l 甾体激素类药物的含量测定还包括比色法（四氮唑比色法、异烟肼比色法、柯柏反应比色法）l 四氮唑比色法：四氮唑比色法是用于皮质激素药物含量测定的方法。皮质激素类药物的C17-醇酮基有还原性，可以还原成四氮唑盐成有色甲簪，此显色反应可用于皮质激素类药物的含量测定。1、四氮唑盐的种类：氯化三苯四氮唑（TTC）其还原产物为不溶于水的深红色三苯甲簪，最大吸收波长在480-490nm，也称红四氮唑。；蓝四氮唑（BT），其还原产物为暗蓝色的双甲簪，最大吸收波长在525nm附近。2、反应原理：皮质激素C17-醇酮基（-CO-CH2OH）具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原为甲簪（有色甲），而自身失去2e被氧化为20-酮-21醛。生成颜色随所用的试剂和条件不同而不同。3、讨论：本法广泛应用于皮质激素类药物，特别是制剂的含量测定。溶剂和水分的影响：含水量大时会使呈色速度减慢，但含水量不超过5%时，对结果几无影