实验一X染色质标本制备与观察.ppt_第1页
实验一X染色质标本制备与观察.ppt_第2页
实验一X染色质标本制备与观察.ppt_第3页
实验一X染色质标本制备与观察.ppt_第4页
实验一X染色质标本制备与观察.ppt_第5页
已阅读5页，还剩4页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、a,实验一 X染色质标本制备与观察,目的要求 （1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。 （2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义,a,实验原理,一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率一般约为10一30，有的可高达50以上。其出现率的高低与个体不同生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞核中则平均低于1。一般检查X染色质确定性别时，观察200个细胞，X染色质出现5以上者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一种辅助诊断方法

2、,a,实验用品,1)器材：显微镜、载玻片、牙签。 (2)试剂 ：Giemsa染液、0.2甲苯胺蓝染液 、5mol/L HCl溶液 、95乙醇、pH 6.8 PBS (3)材料：人口腔黏膜上皮细胞,a,方法与步骤,一） Giemsa染色法 (1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞，在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。 (2)固定：将带有标本的载玻片置入装有新配置的甲醇-冰醋酸固定液（3：1）的染色缸中固定10min后取出，空气干燥。 (3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四

3、次，充分洗去残留的HCl。 (4)染色：置Giemsa染液中染色10min ，蒸馏水冲洗后晾干，酒精灯上过火脱水，以二甲苯透明(1-2min)，树胶封片,a,二）甲苯胺蓝染色法,1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞，在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。 (2)固定：用95%乙醇固定30分钟。 (3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次，充分洗去残留的HCl。 (4)染色：0.2甲苯胺蓝染液染色510min。 (5)镜检：自来水漂洗，空气干燥后油镜下观察,a,观察与结果,高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核，细胞质不着色或不明显。选择核较大，染色清晰，轮廓完整，核质呈均匀细网状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有蓝色浓染小体的细胞核后，换油镜进一步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、三角形、扁平形的浓染小体,a,注意事项,1)取材前要漱口，以免口腔中的杂质影响观察效果。 (2)HCl水解要充分，使X染色质易于显现。 (3)临床检查时要选择形态好的细胞观察，计算100个细胞中X染色质出现的频率,

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 医学制药

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论