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文档简介

1、.实验一 邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量目的：掌握分光光度计的测定原理、方法及其结构，掌握吸收曲线的绘制及样品的测定原理。原理：亚铁离子（Fe2+）与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。仪器：721型分光光度计、容量瓶等。试剂：1、铁盐标准溶液：准确称取0.0730克分析纯硫酸亚铁铵（NH4）2Fe（SO4）26H2O于100毫升烧怀中，加50毫升1mol/L HCl，完全溶解后，移入1升容量瓶中，再加约50毫升1mol/LHCl，并用水稀释到刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0.01毫克；2、0.1%邻菲罗啉水溶液；3、

2、1%盐酸羟胺水溶液；4、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH4.6）：称取136克分析纯醋酸钠，加120毫升冰醋酸，加水溶解后稀释至500毫升。测定步骤：1、邻菲罗啉铁吸收曲线的绘制吸取上述标准铁盐溶液2.0ml于50ml容量瓶中，加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，用3厘米比色皿，以蒸馏水作参比溶液，在分光光度计上，在波长440600nm范围分别测定其吸光度A。以波长为横坐标，吸光度A纵坐标，绘制邻菲罗啉铁的吸收曲线，求出最大A值时的波长入m。2、标准曲线的绘制：分别吸取铁的标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.

3、0、6.0、7.0ml于八只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，然后用分光度计在其最大吸收的波长下测得吸光度，以不加铁的试剂溶液作参比。以吸光度为纵坐标，铁含量（mg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。3、试样中铁含量的测定吸取试样溶液10ml（其中含铁0.020.06mg）于50ml容量瓶中，按绘制标准曲线的操作，加入各种试剂使之显色，用水稀释至刻度，摇匀。以不加铁的试剂溶液作参比，于分光光度计上测得吸光度，由标准曲线查得相应的铁含量，计算出试样的含铁浓度。讨论：1、加入盐酸羟胺的目的。

4、2、显色对溶液的pH应为29，若酸度过高（pH2），显色缓慢而色浅。3、Bi3+、Cd2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用，较大量的草酸盐（在pH6时）及酒石酸盐（在pH3时）无干扰，而CN-离子将严重干扰测定。附：721型分光光度计的原理仪器工作原理根据溶液中的物质对照射光的吸收效应（物质对光的吸收具有选择性），测量其光能量减弱的程度和物质的浓度之间的比例关系，符合比色原理比耳定律。I/I0=KCLA=KCL 式中，：透过率：透射光强度：入射光强度 ：吸收系数：吸光度：溶液厚度：溶液浓度在公式中可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度不变时，透射光是根据溶液的

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