地中海贫血检测相关问题 PPT医学课件

1、地中海贫血检测相关问题,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,地贫基因缺失示意图,a3.7,a4.2,SEA,a2,a1,a2,a1,1,16,地贫的基因型与表型,正常,静止型单一基因缺失或丧失功能 临床无任何症状，一般血液学检查无异样，仅平均红细胞体积(MCV) 位于正常值下限。出生时脐带血Hb Barts 可达1%-2%，但很快消失,17,地贫的基因型与表现型,标准型2个基因缺失或丧失功能 临床无症状，血液学检查出现轻微贫血，红细胞大小不均一，平均红细胞体积(MCV) 及平均血红蛋白含量(MCH)轻度下降。出生时脐带血Hb Barts 可达5%-15,血红

2、蛋白H病3个基因缺失或丧失功能 肝脾肿大，中度贫血。HbH含量较高（0.8%-40%），易发生溶血，有些病例需不定期输血，重者需切脾,18,a地贫的基因型与表现型,Hb Barts胎儿水肿综合症 4个基因缺失或丧失功能 患胎于妊娠晚期或产后数小时内死亡，全身水肿，肝脾肿大，可有四肢和外生殖器畸形。由于胎儿无法合成亚基，脐血血红蛋白（ Hb Barts ，4）含量高（80%-90,19,Hb Constant Spring (Hb CS) 基因突变： a2珠蛋白基因142位终止密码子TAACAA突 变，其mRNA不稳定，降解加速，导致Hb CS合成减少， Hb CS 在功能上相当于一个a-地中海

3、贫血2基因,20,Hb Quong Sze (Hb QS) 基因突变： a2珠蛋白基因125 位密码子CTGCCG突 变，导致Hb QS (a125(H8)Leu Pro)。 Hb QS高度不稳定，合成后迅速降解,21,Codon 41-42（ TCTT） IVS-II-654 （CT） Codon 17 （ AT） -28（ AT） Codon 71-72（ +A） Codon 26 （ GA,常见的基因突变类型,Codon 43（ G） Codon 27/28 （） IVS-I-1 （GA） IVS-I-5 （G,22,2011第一次地贫基因检验EQA,23,一、背景： 1、广西与卫生部合

4、作项目，开展地贫防治工程； 2、基因检测在指导有地贫携带基因夫妇进行产前检查，防止重度地贫孩子出生方面具有重要意义。已建立三大地贫检测中心。 二、目的：了解广西各医疗机构开展地贫基因检测的质量情况，进一步规范地贫基因检测、保证质量,24,三、参加实验室：广西各级医疗机构、人口服务中心共23个实验室（调查摸底34家，报名25家，已发质控品，自愿退出2家）。 四、质控品：选取已确诊地贫接收治疗患儿，治疗时抽取的全血，用枸橼酸钠抗凝，交公司分装加工成质控品，每支0.5毫升。样本冻于-20，低于4运送到各实验室。 五、质控品发放：共发放10个血样（其中-地中海贫血基因分析和-地中海贫血基因分析各5个血

5、样，不同实验室收到的血样不完全相同，避免抄袭结果。每个病人的血样均留足备份保存于-80，用作破损后的补发和参考实验室确定参考结果,25,26,六、检测要求： 1、-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的东南亚缺失（-SEA）、右侧缺失（-3.7）、左侧缺失（-4.2）三种缺失型基因检测，以及Hb WS, Hb QS, Hb CS三种2珠蛋白基因突变的检测。 2、-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的8个位点突变CD41-42-TCCT(41-42M)、IVS-2-654 C变T(654M)、CD17 A变T (17M)、-28 A变G (28M)、CD26 G变A (EM)、CD71-72加

6、A (71-72M)、CD43 G变T (43M)、-29 A变G (29M)的检测，以及少见的9个位点突变、CD14-15加G(14-15M)、CD27-28加C(27-28M)、-32 C变A(32M)、-30 T变C(30M)、IVS-1-1 G变T(IVS-1-1M)、IVS-1-5 G变C(IVS-1-5M)、CD31减C(31M)、CAP-40-43-AACC)(CAPM)、起始密码子ATG变AGG(IntM)的检测,27,七、评价方法： 各样本的参考答案由专家组根据参评实验室检测结果、参考实验室检测结果和患儿病历资料确定，有异议时可取出血样再次检测。 参考实验室名单： 广西医科大

7、学儿科实验室 自治区妇女儿童医院优生遗传科实验室 自治区人民医院PCR实验室 解放军303医院血液科PCR实验室,28,八、本次质评发现的问题： （一）a-地贫 ： 1、有一家实验室完全错误，参考答案为 -SEA/cs的标本，做成了“/”。 2、7家实验室未做2珠蛋白基因突变的检测 ，导致所涉及的三个样本CS突变未检出。 3、报告格式不规范：参考答案为-SEA/的标本， 其他格式有： “/-SEA ”， “-SEA/ ”，“-/”， “东南亚缺失型地贫-1 ”， “1.检出东南亚缺失型-地中海贫血 2.未检出-3.7，-4.2缺失型-地中海贫血 3.未检出QS,CS,WS点突变,29,二）-地贫 ： 1、有一家实验室两个标本检测错误，参考答案为“28M/28M”的报告为“71-72/71-72”，参考答案为“43M/71-72M”的报告为“71-72M/n”; 2、另一家实验室参考答案为“28M/71-72M”的报告为“-28/-28”； 3、报告格式混乱，参考答案为“28M/28M”的报告格式有： “-28m/-28m ”，“-28/-28 ”，“-28N位点突变纯合子 ”，“-28纯合子 ”，“CD28”，“28位点突变（纯合子）”， ”珠蛋白基因28位点突变纯合子，其余位点