生物制药分离纯化技术绪论

1、生物制药分离纯化技术绪论,文献综述,目标物研究进展,生物药物制备方案设计线路简介,研究目的,材料选择,细胞破碎,建立分析方法,预备实验,固液分离,浓 缩,色谱分离,脱盐冻干,产品分析,沉降 离心 过滤,机械法、物理法 化学法、生物法,沉淀、吸附、超滤 离心浓缩,吸附色谱 离子交换色谱 凝胶色谱 亲和色谱 疏水色谱 逆流色谱,提 取,溶剂萃取 水相萃取,溶解性能 溶液稳定性 固体稳定性 物理性质 化学性质,生物活性、酶活力、比活 组成和纯度分析 分子量、pI 其它理化性质分析,透析、凝胶过滤 冷冻干燥,一、原材料选择的原则： 原料有效成分含量高、来源丰富、产 地较近、杂质含量少、成本低,生物药物

2、提取、分离、纯化技术基础,生物材料的选择：1生物活性物质存在部位：胞内、胞外、胞浆、质膜、器膜、周质2生物材料的采集与质控 （1）品种鉴定； （2）防止污染与感染； （3）选择富集目的物材料； （4）冷冻保存,二、生物药物常用的提取方法与优化,一）几种常用提取方法 1酸、碱、盐水溶液提取方法 2表面活性剂提取方法与反胶束提取方法 3有机溶剂提取 4. 双水相萃取法 5超临界萃取法,二）提取方法与优化1.溶剂选择2.选择添加剂 保护剂； 酶抑制剂3.提取条件 温度； pH； 盐； 表面活性剂,三浓缩与干燥,1.浓缩方法： 盐析； 有机溶剂沉淀； 高分子脱水 超滤； 真空浓缩或薄膜浓缩,2.干燥：

3、低温真空干燥；喷雾干燥；冷冻干燥,四、分离纯化,1.生化制药工艺中分离纯化特点: (1) 生物材料组成复杂 (2) 目的物含量低 (3) 易变性、失活 (4) 分离方法有很大经验成分 (5) 步骤多，逐级分离 (6) 产品验证与化学上纯度概念不完全相同,2. 分离纯化原理 P162页 (1)根据分子形状与分子大小 (2)根据电荷差异 (3)根据分子极性与溶解度大小 (4) 根据吸附特性 (5) 根据生物配基特性,3. 选择原则 （1）粗品分离：大处理量,相对低分辨率 盐析，分级沉淀，萃取，超滤 （2）精制：高分辨率 多种色谱层析法,亲和层析，HPLC，FPLC，电泳或等电聚焦,五、生物制药下游

4、技术的特点,1、培养液（或发酵液）中所含欲分离的生物 药物浓度很低，杂质含量高，需进行多步分离 操作。 2、稳定性较差，加热、pH、有机溶剂等可引起 失活或分解。 3、生物变异性大 4、注意生物安全问题,生物药物的分离纯化原则,在分离纯化的设计中需要考虑的因素,1、抑制宿主细胞或分泌产物中相应的酶活性，防止其 消化降解待提纯产物。 2、使目标产物成分有较高的纯度，降低对人体有害的 非目标成分的含量。 3、保证生物药物的安全、有效。注意每个生产环节的 时效性，对每一步骤的质量进行监控。 4、尽可能优化分离纯化工艺，减少分离步骤，降低生 产成本,生物药物的分离纯化,1、溶剂与试剂 2、pH 3、添加物 4、分离纯化前准备,分离纯化的基本工艺流程,预处理 细胞破碎与碎片处理 可溶性杂质的去除 分离纯化,分离纯化单元操作的特点,1、各种技术相互交叉，新型的分离纯化 方法不断涌现 2、注重新材料的研制 3、分离纯化设备推陈出新，发展迅速,分离纯化方