慢病毒颗粒制备和应用

1、来自GeneCopoeia的慢病毒颗粒制备和应用,GeneCopoeia Inc,日本Riken： 2004年1月-4月，为Riken提供1600个人类基因克隆构建。 Roche： 2006年4月-2007年3月，合作完成13000个人类基因克隆的无细胞体系蛋白表达。 NCBI ： 2009年成为NCBI推荐克隆供应商。 中国科学院广州生物医药与健康研究院：2006年5月至今，慢病毒载体和哺乳动物载体干细胞相关基因表达克隆构建，华南地区特种疾病相关胚胎干细胞库的建立。 美国NIH（美国国家卫生研究院）：2007年7月-2008年1月，3000个斑马鱼克隆构建。 美国Novartis（美国诺华制

2、药）：2009年10月，美国诺华制药签约长期基因克隆供应商,生命奥秘电子杂志2008年创刊，现已出版45期，拥有近30万名读者,一直关注最前沿资讯，关注内容包括疾病疗法、基因、蛋白、前沿技术等,Outline,体细胞定向重编程的研究思路 慢病毒的构建原理 慢病毒颗粒制备方法及应用,Application of lentivirus in somatic reprogramming,Vierbuchen T, et al.(2010) Direct conversion of fibroblasts to functional neurons by defined factors. Nature

3、 463:1035-1041 Lijian H, et al. (2011) Induction of functional hepatocyte-like cells from mouse fibroblasts by defined factors. Nature 475:386-389 Edward E. M, et al. (2011) Highly Efficient miRNA-Mediated Reprogramming of Mouse and Human Somatic Cells to Pluripotency. Cell stem cell 8:376-388,Proto

4、col of Directed Reprogramming,Profile Detection-qPCR Array,Profile Detection-miRNA qPCR Array,包含有65个miRNAs,可用于检测干细胞的分化程度,同时也可筛选特异miRNAs用于体细胞重编程研究 http:/,miRNA qPCR Validated Primers,人、小鼠、大鼠miRNA的Q-PCR引物都通过严格的实验验证 http:/ 输入miRNA name、Acc No或Sequence等即可获得验证结果,Expression of reprogramming factors -ORF e

5、xpression clone,Expression of reprogramming factors -miRNA clone,Pre-made lenti-vector expression clone,Gene Groups/Families,Reserch of reprogramming mechanism,Reserch of reprogramming mechanism,Virus vector,HIV Viron,HIV B: 0.02ul of concentrated lentivirus (incubated 4 hours with LentiDens before centrifuge). C: 0.02ul of concentrated lentivirus (incubated 16 hours with LentiDens before centrifuge,