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文档简介

1、实验七 培养基的配制与灭菌,一、实验目的 1、掌握培养基配制的一般方法与步骤。 2、了解常见的灭菌方式，掌握高压灭菌的原理及操作。 3、掌握基本实验器材的包扎,二、实验原理,一）培养基的配制 培养基是由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。 培养基的六大营养因素： 碳源 氮源 能源 生长因子 无机盐 水,培养基的类型,据组成成分可分为: 1、合成培养基 2、天然培养基 3、半合成培养基 从培养基的物理状态可分为： 1、液体培养基 2、固体培养基 3、半固体培养基 据用途可分为： 1、基础培养基 2、加富培养基 3、选择培养基 4、鉴别培养基,实验基本流程,设计，计算，

2、准备,二）灭菌和消毒技术,1. 火焰灼烧：对金属器皿的灭菌 2. 干热灭菌：18023小时（对器皿的灭菌） 3. 湿热灭菌 常压蒸汽灭菌 ：巴氏消毒法，间歇灭菌法 蒸汽持续灭菌法 高压蒸汽灭菌： 121 30分钟 4. 过滤除菌 5. 紫外线杀菌：紫外线照射20分钟以上，对空气杀菌 6. 化学药剂消毒和杀菌,热蒸汽 121, 25min 115, 35min 加水， 装锅，升压保压，降压与排气， 出锅， 烘干,高压蒸汽灭菌,三、实验材料,250ml、500ml三角瓶 15ml试管 培养基配制的化学药品和琼脂 棉花 报纸 10ml移液管，100ml量筒，500ml量筒，1000ml量筒各2个 1

3、ml移液管5根 10N NaOH 孟加拉红水溶液 pH试纸 ，电炉，标签纸 ，玻棒，铝锅 ，天平,四、实验内容,牛肉膏蛋白胨培养基 固体 3L（500ml 三角瓶分装 X 9，每瓶加琼脂8克） 马丁氏培养基 固体 1L （500ml 三角瓶分装 X 3，每瓶加琼脂8克） 高氏一号培养基 固体 1L 同上 淀粉培养基 固体 1L 同上 葡萄糖蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 40 支 蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 40支 3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基 液体 5ml/试管 75支，内装指形管 伊红美兰培养基 固体 500ml （500ml 三角瓶分装 X 2，每瓶加琼脂7.5克） 无菌水 9ml/支 30 支 无菌水 90ml/瓶 20 瓶,牛肉膏蛋白胨培养基: 1%NaCl 5%NaCl 各300mL（500ml 三角瓶，每瓶加琼脂8克） 10%NaCl pH5 pH7 各300mL（500ml 三角瓶，每瓶加琼脂8克） pH9,四、实验内容,五、 思考题,1、简述高压灭菌锅的灭菌原理及使用注意点。 2、培养基配好后

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