大肠杆菌PCR检测方法_第1页
大肠杆菌PCR检测方法_第2页
大肠杆菌PCR检测方法_第3页
大肠杆菌PCR检测方法_第4页
大肠杆菌PCR检测方法_第5页
已阅读5页，还剩1页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、大肠杆菌 PCR检测方法12020 年 4 月 19 日文档仅供参考ICS 11.220DB21B41辽宁省地方标准DB 21/ XXXXXXXXX大肠杆菌PCR检测方法Method of PCR for the detection of Escherichia coli点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（征求意见稿）XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施辽宁省质量技术监督局发 布12020 年 4 月 19 日文档仅供参考前言本标准按照GB/T 1.1 给出的规则起草。本标准由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。本标准起草单位：辽宁省动

2、物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。本标准主要起草人：赵凤菊，关淼，关乃鹏，李清竹，陈瑶I2020 年 4 月 19 日302号 兽医实验室生物安全技术管理规文档仅供参考大肠杆菌 PCR检测方法1 范围本标准规定了大肠杆菌PCR检测方法的技术要求。本标准适用于大肠杆菌的诊断、监测及流行病学调查，适用于猪粪便、脏器及纯培养物中大肠杆菌的检测。本标准中的试验操作应在生物安全 级（ BSL-2）以上的实验室进行。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。中华人民

3、共和国农业部公告第范3 缩略语下列缩略语适用于本标准。E.coli：大肠杆菌（ Escherichia coli）DNA：脱氧核糖核酸（Diethylpyrocarbonate ）bp ：碱基对（ base pair）12020 年 4 月 19 日文档仅供参考PCR：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction ）dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（Deoxy-ribonucleoside triphosphate ）Taq酶： Ex Taq DNA聚合酶（ Taq DNA polymerase）TAE：三羟甲基氨基甲烷-乙酸电泳缓冲液（Tris acetate-EDTA buffer）4 原理根据 E.coli 保守基因序列设计一对引物，在DNA 聚合酶催化下，以母链DNA 为模板，以引物为延伸起点，经过变性、退火和延伸，体外复制出与母链模板 DNA 互补的子链 DNA。5 仪器和器材本技术规范中需应用下列仪器和器材：高速台式冷冻离心机（最大离心力 12 000g 以上）、冰箱、 PCR 扩增仪、电泳仪、凝胶成像系统、微波炉、分析天平、 1.5mL 离心管和 0.2mL 离心管、微量移液器和吸头等。6 试剂和材料6.1DNAzol? Reagent：DNA 抽提试剂，外观为淡绿色，于48保存。6.2无水乙醇：-20 预冷。6.375%乙醇：用无水乙醇和灭菌双

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论