基因工程的工具ppt课件

1、基因工程的工具,享学课堂,基因工程,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品,基础理论 和技术的发展 催生了基因工程,DNA重组技术的基本工具,是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品,分析概念,工 具,为什么 要加工,什么是表达,用什么导入,基因操

2、作的工具,基因的剪刀（分子手术刀） 限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的针线（分子缝合针） DNA连接酶 基因的运输工具（分子运输车） 运载体,到哪里去寻找这种酶,1）限制酶,分布：主要在原核生物中。 作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 结果：产生黏性未端和平末端 举例：EcoR1限制酶、Sma1限制酶,与我们学过的 DNA酶相同吗,识别序列的特点,作用是什么,两者的区别,这两种酶切的特点,切断的是什么键,限制酶的识别特点,以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如： GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC,EcoRI,被限制酶切开的DNA两条单

3、链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端,什么叫黏性末端,要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端,要切两个切口，产生四个黏性末端,如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢,会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了,基因的针线：DNA连接酶,2）DNA连接酶,连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键（梯子的扶手） 结果：将两个相同的未端的连接。 分类：Ecoli DNA连接酶 T4 DNA连接酶,与DNA聚合酶 相同吗,二者在性质 上的区别,DNA连接酶可把黏性末

4、端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来(形成磷酸二酯键)，这样一个重组的DNA分子就形成了,基因的针线DNA连接酶,3）运载体,作用：将外源基因送入受体细胞。 具备的条件： 能在宿主细胞内复制，并稳定地保存有多个限制酶切点， 具有某些标记基因， 对受体细胞无害 举例：质粒（常用）、噬菌体和动植物病毒,为什么 要具备 这些条件,与外源基因连接,便于进行筛选,质粒特点,1、细菌染色体外双链环状DNA分子 2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在 3、有一个或多个限制酶切点 4、有特殊的遗传标记基因,注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的,1）以下说法正确的是（ ） A、所有的限制

5、酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来,C,练习,2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA,D,练习,3）有关基因工程的叙述中，错误的（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶,A,练习,练习,4）下列关于基因工程的叙述，不正确的是（ ） A、基因工程的原理是基因重

6、组 B、运用基因工程技术，可使生物发生定向变异 C、一种生物的基因转接到另一种生物的DNA分子上 D、是非同源染色体上非等位基因的自由组合,D,5）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料,D,练习,6）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达,C,练习,35.（8分）【生物现代生物科技专题】 为扩大耕地面积，

7、增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中_处，DNA连接酶作用于_处。（填“a”或“b”） （2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_技术，该技术的核心是_和_。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用_方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性,习题,a,植物组织培养,脱分化（去分化,基因枪法（花粉管通道法,再分化,耐盐基因（目的基因,一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中,a,习题,39、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。 (1) 获得目的基因的方法通常包括_和_。 (2) 切割和连接DNA分子所使用的酶分别_和_。 (3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或_，后者的形状成_。 (4)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率_，所以在转化后通常需要进行_操作。 (5)将人胰岛素基因分别导