仪器分析：第2章 气相色谱法

1、2 气相色谱法 Gas Chromatography,气相色谱法（GC）是英国生物化学家 Martin A T P等人在研究液液分配色谱的基础上，于1952年创立的一种极有效的分离方法，它可分析和分离复杂的多组分混合物,目前由于使用了高效能的色谱柱，高灵敏度的检测器及微处理机，使得气相色谱法成为一种分析速度快、灵敏度高、应用范围广的分析方法,如气相色谱与质谱（GCMS）联用、气相色谱与Fourier红外光谱(GCFTIR）联用、气相色谱与原子发射光谱（GCAES）联用等,气相色谱法又可分为气固色谱（GSC）和气液色谱（GLC,而后者的固定相是用高沸点的有机物涂渍在惰性载体上。由于可供选择的固定

2、液种类多，故选择性较好，应用亦广泛,前者是用多孔性固体为固定相，分离的对象主要是一些永久性的气体和低沸点的化合物,氧气，二氧化碳，乙烯,12.1 气相色谱仪,一、气相色谱仪的工作流程,气相色谱平面结构流程 process of gas chromatograph,1-载气钢瓶,载气系统,进样系统,色谱柱,检测系统,温控系统,2-减压阀,3-净化干燥管,4-针形阀,5-流量计,8-分离柱,6-压力表,7-进样阀,10-放大器,9-热导检测器,11-温度控制器,12-记录仪,二、气相色谱仪,1 气路系统,双柱系统,2 进样系统,进样口,汽化室,进样器,分流,密封垫,3 分离系统,分离系统由色谱柱组

3、成，它是色谱仪的核心部件，其作用是分离样品,色谱柱主要有两类：填充柱和毛细管柱,分离系统,1）填充柱,填充柱由不锈钢或玻璃材料制成，内装固定相，一般内径为24 mm，长13m。填充柱的形状有U型和螺旋型二种,2）毛细管柱,毛细管柱又叫空心柱，分为涂壁，多孔层和涂载体空心柱,涂壁空心柱是将固定液均匀地涂在内径0.l0.5mm的毛细管内壁而成，毛细管材料可以是不锈钢，玻璃或石英,毛细管色谱柱渗透性好，传质阻力小，而柱子可以做到长几十米,与填充柱相比，其分离效率高（理论塔板数可达106）、分析速度快、样品用量小，但柱容量低、要求检测器的灵敏度高，并且制备较难,4 控制温度系统,在气相色谱测定中，温度

4、是重要的指标，它直接影响色谱柱的选择分离、检测器的灵敏度和稳定性,控制温度主要指对色谱柱炉，气化室，检测器三处的温度控制,控制温度系统,色谱柱的温度控制方式有恒温和程序升温二种。对于沸点范围很宽的混合物，往往采用程序升温法进行分析,程序升温指在一个分析周期内柱温随时间由低温向高温作线性或非线性变化，以达到用最短时间获得最佳分离的目的,5 检测和数据处理系统,样品经色谱柱分离后，各成分按保留时间不同，顺序地随载气进人检测器检测器把进入的组分按时间及其浓度或质量的变化，转化成易于测量的电信号，经过必要的放大传递给记录仪或计算机，最后得到该混合样品的色谱流出曲线及定性和定量信息,12.2 气相色谱固

5、定相,固体吸附剂,液体固定相,一、气液色谱固定相,l）对载体的要求 具有足够大的表面积和良好的孔穴结构，使固定液与试样的接触面较大；表面呈化学惰性，没有吸附性或吸附性很弱，更不能与被测物起反应；热稳定性好；形状规则，粒度均匀，具有一定机械强度,载体（担体）和固定液组成气液色谱固定相,1. 载体(担体,2）载体类型,大致可分为硅藻土和非硅藻土两类。硅藻土载体是目前气相色谱中常用的一种载体，它是由称为硅藻的单细胞海藻骨架组成，主要成分是二氧化硅和少量无机盐，根据制造方法不同，又分为: 红色载体和白色载体,红色载体是将硅藻土与粘合剂在900煅烧而得，因铁生成氧化铁呈红色，其特点是表面孔穴密集、孔径较

6、小、比表面积较大,对强极性化合物吸附性和催化性较强，如烃类、醇、胺、酸等极性化合物会因吸附而产生严重拖尾。因此它适宜于分析非极性或弱极性物质,白色载体是将硅藻土与20的碳酸钠（助熔剂）混合煅烧而成，它呈白色、比表面积较小、吸附性和催化性弱，适宜于分析各种极性化合物,101，102系列，英国的Celite系列，英国和美国的Chromosorb系列，美国的GasChrom A， CL， P， Q， S， Z系列等，都属这一类,非硅藻土载体有有机玻璃微球载体，氟载体，高分子多孔微球等。这类载体常用于特殊分析，如氟载体用于极性样品和强腐蚀性物质HF、Cl2。等分析。但由于表面非浸润性，其柱效低,3）载

7、体的表面处理,或含有矿物杂质，如氧化铝、铁等，使色谱峰产生拖尾。因此，使用前要进行化学处理，以改进孔隙结构，屏蔽活性中心。处理方法有酸洗、碱洗、硅烷化及添加减尾剂等,硅藻土载体表面不是完全惰性的，具有活性中心。如 硅醇基,2固定液,l）对固定液要求首先是选择性好。另外还要求固定液有良好的热稳定性和化学稳定性；对试样各组分有适当的溶解能力；在操作温度下有较低蒸气压，以免流失太快,固定液,2）组分分子与固定液间的作用力 包括有定向力、诱导力、色散力和氢键作用力4种。前三种统称范德华力，都是由电场作用而引起的,此外，固定液与被分离组分间还可能存在形成化合物或配合物等的键合力,3）固定液的特性,固定液

8、的特性主要是指它的极性或选择性，用它可描述和区别固定液的分离特征。目前大都采用相对极性和固定液特征常数表示,i）相对极性,1959年由Rohrschneider提出，用P来表示，此法规定非极性固定液角鲨烷的极性为0，强极性固定液，-氧二丙睛的极性为100。然后，选择一对物质（如正丁烷一丁二烯或环乙烷一苯），来进行试验。分别测定它们在氧二丙腈、角鲨烷及欲测固定液的色谱柱上的相对保留值，将其取对数后，得到,角鲨烷和,-氧二丙睛结构式,角鲨烷（异三十烷）squalane 2，6，10，15，19，23-六甲基二十四烷 ，-氧二丙晴 ，-oxydipropionitrle,式中下标1，2和X分别表示氧

9、二丙睛，角鲨烷及被测固定液,由此测得的各种固定液构相对极性均在0100之间。一般将其分为五级，每20单位为一级。相对极性在0+l之间的叫非极性固定液，+2级为弱极性固定液，+3级为中等极性，+4+5为强极性,ii）固定液特征常数,I=IpIs 式中I为任一标准物质保留指数差值，Ip和Is分别为任一标准物质在被测固定液和参比固定液的保留指数,麦氏常数是在罗氏方法的基础上，1970年由McReynolds提出的改进方案。选用苯、正丁醇、2一戊酮、l一硝基丙烷、吡啶、2一甲基一2一戊醇、碘丁烷、2一辛炔、二氧六环、顺八氢化茚10种物质，在柱温120下分别测定它们在226种固定液和角鲨烷上的I值。归纳

10、后发现前5种物质已足以表达固定液的相对极性，把该五项之和称为总极性。表19-3列出一些常用固定液的McRevnolds常数,保留指数,人为规定正构烧烃的保留指数为其碳数乘100,如正己烷和正辛烷的保留指数分别为600和800。至于其他物质的保留指数，则可采用两个相邻正构烷烃保留指数进行标定。测定时，将碳数为n和n+1的正构烷烃加于样品x中进行分析，若测得它们的调整保留时间分别为tr（Cn），tr（Cn+1；）和tr（x）且tr（Cn）tr（x）tr（Cn+1）时，则组分X的保留指数可按下式计算，即,保留指数,4）固定液的分类,气液色谱可选择的固定液有几百种，它们具有不同的组成、性质、用途。如何

11、将这许多类型不同的固定液做一科学分类，对于使用和选择固定液是十分重要的。现在大都按固定液的极性和化学类型分类。按固定液极性分类就是如前所述，可用固定液的极性和特征常数（罗氏常数和麦氏常数）表示,固定液的分类,此外，还有用化学类型分类。这种分类方法是将有相同官能团的固定液排列在一起，然后按官能团的类型分类。这样就便于按组分与固定液结构相似原则选择固定液,5）固定液的选择,对固定液的选择并没有规律性可循。一般可按“相似相溶”原则来选择。在应用时，应按实际情况而定,i）分离非极性物质：一般选用非极性固定液，这时试样中各组分按沸点次序流出，沸点低的先流出，沸点高的后流出,ii）分离极性物质：选用极性固

12、定液，试样中各组分按极性次序分离，极性小的先流出。极性大的后流出,固定液的选择,vi）分离能形成氢键的试样：一般选用极性或氢键型固定液。试样中各组分按与固定液分子间形成氢键能力大小先后流出，不易形成氢键的先流出，最易形成氢键的最后流出,v）复杂的难分离物质：可选用两种或两种以上混合固定液,对于样品极性情况未知的，一般用最常用的几种固定液做试验。表19-3列出了几种最常用的固定液,二气固色谱固定相,1常用的固体吸附剂,主要有强极性的硅胶，弱极性的氧化铝，非极性的活性炭和特殊作用的分子筛等。使用时，可根据它们对各种气体的吸附能力不同，选择最合适的吸附剂,气固色谱固定相,2人工合成的固定相,作为有机

13、固定相的高分子多孔微球是一类人工合成的多孔共聚物。它既是载体又起固定液作用，可在活化后直接用于分离，也可作为载体在其表面涂渍固定液后再用。由于是人工合成的，可控制其孔径大小及表面性质。圆球型颗粒容易填充均匀，数据重现性好。在无液膜存在时，没有“流失”问题，有利于大幅度程序升温。这类高分子多孔微球特别适用于有机物中痕量水的分析，也可用于多元醇、脂肪酸、脂类、胶类的分析,2.3 气相色谱检测器,气相色谱检测器是把载气里被分离的各组分的浓度或质量转换成电信号的装置。目前检测器的种类多达数十种。根据检测原理的不同，可将其分为浓度型检测器和质量型检测器两种,l）浓度型检测器 测量的是载气中某组分浓度瞬间

14、的变化，即检测器的响应值和组分的浓度成正比。如热导检测器和电子捕获检测器,气相色谱检测器,2）质量型检测器 测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的量成正比。如氢火焰离子化检测器和火焰光度检测器等,热导检测器（TCD,热导检测器是根据不同的物质具有不同的热导系数原理制成的,热导检测器由于结构简单，性能稳定，几乎对所有物质都有响应，通用性好，而且线性范围宽，价格便宜，因此是应用最广，最成熟的一种检测器。其主要缺点是灵敏度较低,1热导池的结构和工作原理,热导池由池体和热敏元件构成，将参比臂和测量臂接入惠斯顿电桥，由恒定的电流加热组成热导测量线路，如前

15、图所示,2影响热导检测器灵敏度的因素,l）桥电流 桥电流增加，使钨丝温度提高，钨丝和热导池体的温差加大，气体就容易将热量传出去，灵敏度就提高。响应值与工作电流的三次方成正比。所以，增大电流有利于提高灵敏度，但电流太大会影响钨丝寿命,2）池体温度 池体温度降低，可使池体和钨丝温差加大，有利于提高灵敏度。但池体温度过低，被测试样会冷凝在检测器中。池体温度一般不应低于柱温,3）载气种类 载气与试样的热导系数相差愈大，则灵敏度愈高。故选择热导系数大的氢气或氦气作载气有利于灵敏度提高。如用氮气作载气时，有些试样（如甲烷）的热导系数比它大就会出现倒峰,4）热敏元件的阻值 阻值高、温度系数较大的热敏元件，灵

16、敏度高。钨丝是一种广泛应用的热敏元件，它的阻值随温度升高而增大，其电阻温度系数为5.510-3cm-1-1，电阻率为5.510-6cm。为防止钨丝气化，可在表面镀金或镍,二.氢火焰离子化检测器（FID,氢 火焰离子化检测器是以氢气和空气燃烧的火焰作为能源，利用含碳有机物在火焰中燃烧产生离子，在外加的电场作用下，使离子形成离子流，根据离子流产生的电信号强度，检测被色谱柱分离出的组分,它的特点是：灵敏度很高，比热导检测器的灵敏度高约103倍；检出限低，可达10-12gS-1；火焰离子化检测器能检测大多数含碳有机化合物；死体积小，响应速度快，线性范围也宽，可达106以上；而且结构不复杂，操作简单，是

17、目前应用最广泛的色谱检测器之一,其主要缺点是不能检测永久性气体、水、一氧化碳、二氧化碳、氮的氧化物、硫化氢等物质,1. 结构,至今还不十分清楚其机理，普遍认为这是一个化学电离过程。有机物在火焰中先形成自由基，然后与氧产生正离子，再同水反应生成H30+离子。以苯为例，在氢火焰中的化学电离反应如下,2氢火焰离子化机理,3. 影响操作条件的因素,操作条件的变化，包括氢气、载气、空气流速和检测室的温度等都对检测器灵敏度有影响,三. 电子捕获检测器(ECD,电子捕获检测器是一种选择性很强的检测器，对具有电负性物质（如含卤素、硫、磷、氰等的物质）的检测有很高灵敏度（检出限约10-14gcm-3）。它是目前

18、分析痕量电负性有机物最有效的检测器。电子捕获检测器已广泛应用于农药残留量、大气及水质污染分析，以及生物化学、医学、药物学和环境监测等领域中,1电于捕获检测器的结构与工作原理,实际上它是一种放射性离子化检测器，与火焰离子化检测器相似，也需要一个能源和一个电场。能源多数用63Ni或3H放射源，其结构如下图,检测器内腔有两个电极和筒状的放射源。放射源贴在阴极壁上，以不锈钢棒作正极，在两极施加直流或脉冲电压。放射源的射线将载气（N2或Ar）电离，产生次级电子和正离子，在电场作用下，电子向正极走向移动，形成恒定基流,当载气带有电负性溶质进入检测器时，电负性溶质就能捕获这些低能量的自由电子，形成稳定的负离

19、子，负离子再与载气正离于复合成中性化合物，使基流降低而产生负信号倒峰,2捕获机理,捕获机理可用以下反应式表示,四. 火焰光度检测器(FPD,火焰光度检测器，又称硫、磷检测器，它是一种对含磷、硫有机化合物具有高选择性和高灵敏度的质量型检测器，检出限可达10-12gS-1（对P）或10-11gS-11（对S）。这种检测器可用于大气中痕量硫化物以及农副产品，水中的毫微克级有机磷和有机硫农药残留量的测定,1火焰光度检测器的结构,根据硫和磷化合物在富氢火焰中燃烧时，生成化学发光物质，并能发射出特征波长的光，记录这些特征光谱，就能检测硫和磷以硫为例，有以下反应发生,2火焰光度检测器的工作原理,当激发态S2

20、*分子返回基态时发射出特征波长光max为394nm。对含磷化合物燃烧时生成磷的氧化物，然后在富氢火焰中被氢还原，形成化学发光的HPO碎片，并发射出max为526nm的特征光谱。这些光由光电信增管转换成信号，经放大后由记录仪记录,六. 检测器的性能指标,一个优良的检测器应具以下几个性能指标：灵敏度高，捡出限低，死体积小，响应迅速，线性范围宽，稳定性好。通用性检测器要求适用范围广；选择性检测器要求选择性好。表19-8列出四种常用检测器的性能指标,当一定浓度或一定质量的组分进入检测器，产生一定的响应信号R。以进样量C（单位：mg.cm-3或gs-1）对响应信号(R)作图得到一条通过原点的直线（见图1

21、9-9）。直线的斜率就是检测器的灵敏度（S）。因此，灵敏度可定义为信号（R）对进人检测器的组分量（C）的变化率,1灵敏度,对于浓度型检测器，R取mV，C取mgcm-3，灵敏度S的单位是mVcm3mg-1,灵敏度,对于质量型检测器，c取gs-1，则灵敏度S的单位为mVsg-1,式中：Sc一灵敏度（mVcm3mg-1），Ai一色谱峰面积（cm2），C2一记录仪灵敏度（mVcm-1），Fc一检测器入口处载气流速（cm3min-1），wi一进入检测器的样品量（mg），C1一记录纸移动速度（cmmin-1,在实际工作中，我们常常从色谱图上测量峰的面积来计算检测器的灵敏度。根据灵敏度的定义，可得浓度型检测

22、器灵敏度计算公式,同样，对于气体样品，进样量以体积cm3表示时，则灵敏度Sc的单位为mVcm3cm-3。质量型检测器灵敏度计算公式为,式中：Sm一灵敏度（mVsg-1），wi一进入检测器 的样品量（g,解: wi0.510-3cm30.88103mgcm-3=0.44mg C210mV/25cm=0.4mVcm-1 Ai1.065hW1/21.0656.25cm0.25cm 1.0656.250.25cm2 将以上各式代人灵敏度公式，得 S1.0656.250.25cm20.4mVcm- 1 30cm3min-1/(0.44mg0.5cmmin-1) 908mVcm3mg-l,例 20-1进样

23、0.5L纯苯，得色谱峰高h=6.25cm.半峰宽W1/2=0.25cm苯的密度为0.88gcm-3，记录纸走速C1=0.5cmmin-1，检测器入口处载气流速Fc=30cm3.min-1,记录仪满量程为10mV，满量程宽度25cm，求热导检测器的灵敏度,2检出限（敏感度,当检测器输出信号放大时，电子线路中固有的噪声同时也被放大，使基线波动，如图19-12所示。取基线起伏的平均值为噪声的平均值，用符号RN表示。由于噪声会影响测量试样色谱峰的认辨，所以在评价检测器的质量时提出了检出限这一指标,对于浓度型检测器，捡出限Dc表示为,Dc=2RN/Sc,检出限定义为：检测器恰能产生二倍于噪声信号时的单位

24、时间（单位：S）引入检测器的样品量（单位：g），或单位体积（单位：cm3）载气中需含的样品量,Dc的物理意义指每毫升载气中含有恰好能产生二倍于噪声信号的溶质毫克数,质量型检测器的检出限为,Dm=2RN/Sm,Dm的物理意义指每秒通过的溶质克数，恰好产生二倍于噪声的信号,3最小检测量,在实际工作中，检测器不可能单独使用，它总是与柱、气化室、记录器及连接管道等组成一个色谱体系。最小检测量指产生二倍噪声峰高时，色谱体系（即色谱仪）所需的进样量。 对于浓度型检测器组成的色谱仪，最小检测量（单位：mg）为,质量型检测器的最小检测量（单位：g）为,4线性范围,检测器的线性范围定义为在检测器呈线性时最大和最

25、小进样量之比，或叫最大允许进样量（浓度）与最小检测量（浓度）之比,不同的组分的线性范围不同。不同类型检测器的线性范围差别也很大。如氢焰检测器的线性范围可达107，热导检测器则在105左右,5. 响应时间,响应时间指进入检测器的某一组分的输出信号达到其真值的63所需的时间。 死体积小，电路系统的滞后现象小，响应速度就快。一般都小于1s,12.4 色谱分离操作条件的选择,根据基本色谱分离方程式及范氏理论，可指导选择色谱分离的操作条件,固然增加柱长可使理论塔板数增大，但同时使峰宽加大，分析时间延长。一般情况下，柱长选择以使组分能完全分离，分离度达到所期望的值为准,1柱长的选择,具体方法是选择一根极性

26、适宜，任意长度的色谱柱，测定两组分的分离度，然后根据基本色谱分离方程式，确定柱长是否适宜,例 12.3在一根1m长的色谱柱上测得两组分的分离度为0.68，要使它们完全分离以(R=1.5)，则柱长应为多少？解根据式（18-43），有,即在其他操作条件不变的条件下，色谱柱长要选择5m左右才能使分离度达R=1.5，组分达到完全分离,2. 载气及其流速的选择,曲线的最低点，塔板高度H最小，柱效最高，其相应的流速是最佳流速,当u较小时，分子扩散项B/u是影响板高的主要因素，此时，宜选择相对分子质量较大的载气（N2，Ar），以使组分在载气中有较小的扩散系数。当u较大时，传质阻力项Cu起主导作用，宜选择相对分子质量小的载气(H2,He)，使组分有较大的扩散系数，减小