分光光度法测细菌浓度11月18日(最新整理)

1、用分光光度法粗测金黄色葡萄球菌菌悬液的浓度实验目的：通过对同一菌液同时测吸光度值与平板菌落计数，将两个结果做标准曲线。标准曲线做出后，通过测吸光度值间接反应菌悬液的浓度，用于指导菌悬液的制备。实验设备： u-2900型分光光度计波长为 600nm比色皿厚度：cm实验材料：空白对照液：0.9%无菌氯化钠溶液稀释液：0.9%无菌氯化钠溶液营养肉汤培养基实验菌种：金黄色葡萄球菌（新鲜培养物） 实验步骤：1. 将金黄色葡萄球菌的新鲜培养物接种至营养肉汤培养基中，在3035恒温培养箱中培养 1824h。2. 在无菌阳性室按无菌操作将培养后的金黄色葡萄球菌用 0.9%无菌氯化钠溶液稀释成不同浓度的菌悬液

2、。具体为分别吸取营养肉汤培养液 0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml,0.5ml，0.6ml，0.7ml 到 10ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，稀释成 7 种不同浓度的原始菌悬液。序号分别为 1- 7 号。2.1 平板菌落计数法测活菌浓度取 14 个营养琼脂培养基平板，分别从每个原始菌液中，取 0.2 ml 的菌悬液，用平板涂布法，涂于平板中，标明序号，每个稀释度涂 2 块平板. 37培养箱培养 72 h 后，可见菌落形成，选取菌落数在 30300 间的平板进行计数，每组稀释度相同的平板取平均值作为菌落数. 计算出原菌液细菌浓度，作为细菌菌液的标准浓度。2.2 分光光度法测菌悬液吸

3、收值同时将以上 5 种原始菌液在波长为 600nm 下测定吸光度。用序号吸取原培养液的量（ml）-原始菌液加样到平板上的量（ml）稀释倍数平板计数菌落数（cfu）吸光度值原始菌液的含菌量（cfu）10.10.25 倍0.01820.20.25 倍0.02930.30.25 倍0.04940.40.25 倍0.05850.50.25 倍0.07660.60.25 倍0.08270.70.25 倍0.1020.9%无菌氯化钠溶液作为空白对照，记录各原始菌液的吸光度值。表一：平板菌落计数与吸光度值对比记录3 结果计算对同一菌液同时测吸光度值与进行平板菌落计数，将平板菌落计数所得菌液浓度作为细菌标准浓

4、度 c.根据所测出 a 值以及相对应的标准浓度 c 值，作出标准曲线。“”“”at the end, xiao bian gives you a passage. minand once said, people who learn to learn are very happy people. in every wonderful life, learning is an eternal theme. as a professional clerical and teaching position, i understand the importance of continuous lear

5、ning, life is diligent, nothing can be gained, only continuous learning can achieve better self. only by constantly learning and mastering the latest relevant knowledge, can employees from all walks of life keep up with the pace of enterprise development and innovate to meet the needs of the market. this document is also edited by my studio professionals, th