中药复方治疗缓慢性心律失常的机制与药效研究详解.ppt

1、中药复方治疗缓慢性心律失常的机制与药效研究,研究背景 技术路线 研究成果 创新点 社会经济效益,汇报提纲,研究背景,我国目前已进入老龄化社会。缓慢性心律失常作为心脏传导系统退行性改变，随着老龄化的进展，成为老年人群中的常见病、多发病。占心脏性猝死总数的17%-20%。 缓慢性心律失常的治疗在心血管药物药物研发中是一个迟后的领域。目前尚无治疗缓慢性心律失常长期应用的口服西药。 心脏起搏治疗因其有创及高额费用使很多患者难以接受。 中药,技术路线,检索文献778篇 建立数据库,关联规则,数据挖掘,中药-证型聚类分析,中药-证型聚类分析结果三维示意图,数据挖掘,脉象-中药关联,数据挖掘,舌苔-中药关联

2、,数据挖掘,证型-中药关联,数据挖掘,数据挖掘,证型频数分布,症状频数分布,中药频数分布,舌苔频数分布,数据挖掘,脉象频数分布,数据挖掘,频数最高排列 症状：心悸 脉象：迟脉 证型：心肾阳虚 方剂：麻黄附子细辛汤 中药：附子,研究依据,麻黄附子 细辛汤,参仙升脉 口服液,药效 机制,实验研究,与空白组相比,模型组大鼠心率降低(P0.01)； 与模型组相比,参仙升脉组大鼠心率明显升高(P0.01,药效研究,与空白对照组相比，模型组大鼠心率降低（p0.01），左室射血分数明显增加（p0.01）； 与模型组比较，参仙升脉组心率升高（p0.01），射血分数没有明显变化，心输出量增加,药效研究,实验研究

3、,临床研究,药效研究,总体健康,情感职能,临床研究,药效研究,大鼠Na+-K+-ATP酶的活性,与空白对照组相比，模型组大鼠Na+-K+-ATP酶的活性明显降低（p0.01）； 与模型组相比，参仙升脉组大鼠Na+-K+-ATP酶的活性明显升高（p0.05,机制研究,大鼠cAMP/cGMP变化,与空白对照组相比，模型组大鼠cAMP含量降低（p0.01），cGMP含量升高（p0.01，cAMP/cGMP比值降低（p0.01）； 与模型组相比，参仙升脉组大鼠cAMP含量升高（p0.05），cGMP含量降低（p0.01），cAMP/cGMP比值升高（p0.01,机制研究,大鼠心肌组织中Cx45蛋白的表

4、达,与空白组相比,模型组缝隙连接蛋白Cx45表达降低(P0.01); 与模型组相比,参仙升脉组缝隙连接蛋白Cx45表达升高(P0.01,机制研究,免疫组化照片,大鼠心肌组织中Cx45蛋白的表达,机制研究,大鼠左室功能变化,与空白对照组相比，模型组大鼠心率降低（p0.01），左室射血分数明显增加（p0.01）； 与模型组比较，参仙升脉组心率升高（p0.01），射血分数没有明显变化，心输出量增加,机制研究,急性单离大鼠心肌细胞Ca2+i变化。 注：*，与给药前相比，t-检验P0.01,麻黄碱、-细辛醚和去甲乌药碱对细胞内钙离子浓度的影响 表所示，Fluo-3/AM荧光探针法表明，2M麻黄碱使单离大

5、鼠心肌细胞Ca2+i升高，达给药前浓度的122.996.93%，有统计学意义。而2M细辛醚和2M去甲乌药碱则使Ca2+i下降约17%和11%，与给药前相比有显著差异性。-细辛醚使心肌细胞Ca2+i降低作用与其在皮质神经元的作用基本相同,机制研究,钙离子浓度,麻黄碱、-细辛醚和去甲乌药碱对细胞内钙离子浓度的影响 细胞内钙离子浓度的升高来源有细胞内钙释放和外钙内流两途径。当细胞外液钙浓度降为零时，细胞内钙离子浓度升高与外钙内流无关。因此，2 M 麻黄碱使Ca2+i升高的钙离子来源可通过细胞外液钙离子浓度为零确定。实验结果见下表，在细胞外钙为零时，2 M 麻黄碱不再使Ca2+i升高，说明麻黄碱可使细

6、胞外钙离子通过通道流入而使Ca2+i升高,细胞外液钙浓度变化对2 M 麻黄碱在单离大鼠心肌细胞引起Ca2+i变化的影响,注：*， P0.01，与给药前相比，经t-检验呈显著性差异,机制研究,钙离子浓度,麻黄碱、细辛醚和去甲乌药碱对高电压依赖性钙离子通道的影响 全细胞电压钳法测定心肌细胞高电压依赖性钙离子电流。设定保持电位-40mV，指令电压为-50 +50mV，步阶电压10mV，刺激频率为2Hz，刺激间隔为6s，记录ICa。为消除细胞间误差，电流值以电流密度（pA/pF）表示。2M麻黄碱显著提高了心肌细胞约30%ICa峰电流密度，由给药前的1.650.08 pA/pF升高至2.150.27 p

7、A/pF，与Ca2+i变化呈相同趋势，说明麻黄碱对于钙离子流动的影响在于可使细胞膜电压依赖性的钙通道开放，钙离子大量流入细胞内，从而使Ca2+i升高。而2M-细辛醚和2M去甲乌药碱并未提高心肌细胞ICa峰电流密度，相反有下降趋势，也与其对Ca2+i的影响呈同向，但尚未有统计学意义,设定保持电位-40mV，指令电压为-50 +50mV，步阶电压10mV，刺激频率为2Hz，刺激间隔为6s，记录ICa。与给药前相比，麻黄碱给药后的高电压依赖性钙通道电流密度显著性提高。*，P0.05，与给药前相比，配对t-检验有显著性差异,机制研究,钙离子通道,麻黄碱、细辛醚和去甲乌药碱各单体给药前后 钙离子峰电流密

8、度变化比较 2M麻黄碱显著性提高了峰电流密度，而2M 细辛醚或2M去甲乌药碱没有提高钙通道峰电流密度，反呈下降趋势，但尚未呈显著性差异。与给药前相比，*P0.05,机制研究,钙离子峰电流密度,细辛醚给药前后钠离子电流变化 给药前钠电流基础值约为29.93.4 pA/pF，而110-5 M细辛醚使电流降低至18.42.3 pA/pF （n = 4）。根据Students t-test统计P 0.05，有统计学意义,机制研究,钠离子电流,机制与靶点,本研究中应用关联规则、聚类分析、频数统计等数据挖掘手段总结缓慢性心律失常中医心肾阳虚为其发病之本，血脉瘀阻为发病之标的证治规律,创新点,将中药复方制剂

9、与心脏起搏治疗在提高心率与生活质量改善方面做了头对头的比较研究，为中药在临床治疗缓慢性心律失常的应用提供了循证依据,创新点,在治疗机制研究中发现中药复方制剂对大鼠心肌细胞离子泵、缝隙连接蛋白、离子通道的影响，证实了中药复方可以从多途径、多环节、多靶点来治疗缓慢性心律失常。研究中采用了目前最前沿的分子生物学研究方法膜片钳技术,创新点,每例患者起搏治疗总费用平均在5万元左右，使用寿命约6-8年左右，平均费用达6500元/年,推广应用,应用价值,接受药物治疗的患者治疗费用平均约1500元/年，按此计算，应用中药复方治疗每延缓起搏治疗1年，可减少年医疗费用5000元左右,目前在我省三所医院统计年均治疗病人3000例，平均降低医疗支出1500万元,推广应用,应用价值,预计推广应用后全省每年可减少医疗支出2亿元,推广应用,应用贡献,缓慢性心律失常但未达到起搏器治疗标，中药治疗可延缓部分患者起搏治疗的时间,达到起搏器治疗标准，没有经济能力或者主观不愿意接受起搏器治疗的患者,不具备起搏器安装技术的偏远地区的患者,部分植入