实验植物组织水势的测定小液流法

1、植物生物学实验,实验二,植物组织水势,的测定（小液流法）,1.,了解测定植物组织水势的方法及其优缺点,2.,学习用小液流法测定植物组织水势的方法,目的要求,:,植物组织水势的测定,水势表示水分的化学势，象电流,由高电位处流向低电位处一样，水从水,势高处流向低处。,植物体细胞之间，组织之间以及植,物和环境之间的水分移动方向都由水势,差决定。,植物组织水势的测定,液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法,压力平衡法：压力室法,气相平衡法：露点法,植物组织水势和渗透势的测定方法：,水,势,测,定,冰点降低法,渗,透,势,蒸气压渗透压计法,植物组织水势的测定,一、液体交换法测定植物组织水势,小液流法,

2、小液流法测定植物组织水势的原理？,问题,：,植物组织水势的测定,（一）原理,1,、当植物组织与外液接触时发生水分交换：,植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质,势），组织吸水，,外液浓度变大；,植物,S,植物组织的水势高于外液的渗透势（溶质,势），组织失水，,外液浓度变小；,植物,S,若两者相等，则水分交换保持动态平衡，,外液浓度保持不变；,植物,S,植物组织水势的测定,2,、同一种物质浓度不同时其比重不一样，,浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放,到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。,3,、根据外液浓度的变化情况即可确定与,植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式,计算出溶液的渗透势，

3、即为植物组织的水势。,植物组织水势的测定,【实验原理】,植物材料浸入,不同浓度溶液中,植物材料水势,低于溶液水势,植物材料水势,等于溶液水势,植物材料水势,高于溶液水势,材料吸水,外界溶液浓度变大,比重变大,外界溶液浓度不变,比重不变,材料失水,外界溶液浓度变小,比重变小,植物组织水势的测定,浸过材料,的溶液,滴回,同一浓度而未浸过材料,的溶液中,比重小的液流上浮,比重不变的液流静止,比重大的液流下沉,此溶液的水势即等于所测材料的水势,溶液渗透势的计算：,S,=,iCRT,式中,S,溶液的渗透势，以,MPa,为单位；,R,0.008314MPa,L,mol,1,K,1,T,绝对温度，即,273

4、+t,；,C,溶液的摩尔浓度，以,mol,kg,1,为单位,i,溶液的等渗系数，蔗糖,=1,。,植物组织水势的测定,（二）实验材料,植物组织水势的测定,【用具】,试管架；试管,;,打孔器,;,毛细管；镊子,;,青霉素,瓶,【试剂】,蔗糖溶液,甲烯蓝粉末,植物组织水势的测定,（三）操作步骤,1.,配制不同浓度的蔗糖溶液,2.,用打孔器在绣球花的不同部位打,100-200,片，混匀，每个青霉素瓶各放,入,15-20,片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片）,3.,从配制好的试管中各取,2ml,（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中,（,用一只移液管由低,高，不要润洗）,。放置,20,3

5、0min,，期间摇,动数次，以加速水分平衡。,植物组织水势的测定,试管,1,2,3,4,5,6,7,8,1mol,L,-1,蔗糖溶液（,ml,）,20,40,60,80,100,120,140,160,蒸馏水（,ml,）,180,160,140,120,100,80,60,40,浓度,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,4.,染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶,中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，,加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）,5.,观察液滴升降：,用毛细吸管取青霉素瓶有色液,插入相应试,管中部,缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴,蓝

6、色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移,动方向并记录,。,（用白纸划一直线置于试管背面，方,便观察）,植物组织水势的测定,毛细管放置稳定,挤出小液滴,取出毛细管,观察液滴升降,静止不动,液滴,植物材料,溶液浓度变大,溶液浓度变小,溶液浓度不变,w,S,w,S,w,=,S,6.,分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找,出与组织水分势相当的浓度，根据原理公,式计算出组织的水势,。,植物组织水势的测定,试管号,1,2,3,4,5,6,7,8,溶液浓度,（,mol/l,液滴移动的,方向,植物组织细,胞,w,与,的,比较,溶液浓度,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,液滴移动方向,具有平衡浓

7、度结果,植物组织水势的测定,溶液浓度,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,液滴移动方向,无平衡浓度结果,植物组织水势的测定,溶液浓度,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,液滴移动方向,错误结果,植物组织水势的测定,溶液浓度,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,液滴移动方向,结果是否正确，为什么？,植物组织水势的测定,结果是否正确，为什么？,溶液浓度,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,液滴移动方向,植物组织水势的测定,注意事项：,所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。,试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低,浓度到高浓度依次吸取溶液。,甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组,各管中溶液的比重均加大。,蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结,果。,叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。,释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影