油红O染色具体操作方法

1、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于 水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯 有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使 用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹川，苏丹W,苏丹黑及油红0等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或 半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度(37C-60C )对组织切片染色效

2、果是有好处的。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。一、苏丹川(Sudan川)染色法：操作方法：(1) 固定于10%甲醛的组织。(2) 水洗后采用冰冻或石蜡切片。(3) 经蒸馏水后，浸染于Harris苏木素 或明矶苏木素中淡染1-2分钟。(4) 自来水冲洗。(5) 水洗后，移入70%酉精5秒钟。（6）投入苏丹川染液中约30分钟或更长时间，置于56C温箱中。（7）在70%酒精中洗涤5-10秒钟。（8）洗于蒸馏水中，然后将切片移于载玻片上。（9）切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。（10）甘油明胶封固。结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪

3、酸不着色，细胞核呈蓝色。试剂配制：1. 苏丹川染液配法：将0.15克苏丹川溶解于100ml70%酒精或纯丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。2. 甘油明胶配制：明胶40g蒸馏水 210ml甘油250ml石碳酸结晶5ml先将明胶浸入蒸馏水中2小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热 15分钟，摇搅直至混合液均匀为止。二、苏丹W (Sudan IV)染色法：苏丹W又名猩红，是苏丹川的衍生物，作为脂肪染剂，经各地实验证明，其结果优于苏丹IHo其染色步骤与苏丹川染法完全相同，从略。试剂配制：将1-2克猩红染剂

4、加纯酒精70ml, 10凉氧化钠20ml，蒸馏水10ml，制成混合液，以微火加热，置37C温箱中1小时，取出冷却后过滤，12小时后即可使用。注：此液5天内失效，如此看来，浪费较大，建议配制 70%酉精饱和液，或纯丙酮和70%酉精饱 和液，它们使用方便，且不易失效。结果：脂肪呈猩红色，比苏丹川更为清晰。三、油红染色法：油红作为脂肪染色剂，其染色步骤简便，染色结果肯定，并且优于苏丹V。试剂配制：油红00.5g异丙醇(含量98%100ml此为油红饱和液，可长期保存备用 染色步骤：(1) 冻切片(2) 蒸馏水充分洗涤。 油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：(4)取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用60%乙醇镜下分化至间质清晰。水洗。Marry氏苏木素复染核。(8) 水洗。(9) 甘油或甘油明胶封片。结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。