罗氏中文说明书：降钙素检测试剂盒(电化学发光法)说明书

1、降钙素检测试剂盒(电化学发光法)说明书Calcitonin06445853190 V.1.0 5/5【产品名称】通用名称：降钙素检测试剂盒(电化学发光 法)英文名称：Calcitonin【包装规格】100测试/盒【预期用途】主要用途该产品适用于体外定量测定人血浆和血清中的人降钙素(甲状腺降钙素)。降钙素测定主要是结合其它临床和实验室检测结果用于辅助诊断和治疗一些涉及甲状腺和甲状旁腺的疾病，包括甲状旁腺功能亢进以及其他的临床和实验室检查发现。Elecsys和cobas e免疫检测分析仪的检测原理是电化学发光法。概要人降钙素(hCT)是由32个氨基酸构成的肽激素，分子量为3418道尔顿，主要是由甲

2、状腺的滤泡旁C细胞分泌。1 它是在肝脏和肾脏中代谢，受到血清钙水平调节。生理性CT对钙、磷代谢有影响。它是骨吸收作用抑制剂，防止钙应激(例如妊娠、哺乳和生长)时的骨丢失。2, 3, 4婴儿中血清CT水平相机对较高，而极低出生体重婴儿中更高。5 从儿童时期到成年过程中CT水平会迅速降低，且保持着相对稳定。一般而言，男性血清降钙素水平高于女性，而吸烟会导致血清降钙素水平进一步升高。6,7CT水平升高可见于各种病理学状况下。 8, 9,10,11 CT水平的进一步升高还可见于甲状旁腺功能亢进、高胃泌素血症、肾衰和慢性炎性疾病相关状况。12,13与CT分泌过多性疾病有关的最为突出的临床综合症是甲状腺相

3、关疾病。这种疾病可能为散发或以表现为常染色体显性遗传特征的家族形式出现。这些疾病通常产生具有诊断意义的血清降钙素浓度升高，因此通过免疫检测方法测量血清降钙素水平可获得异常精确且具有极高特异性的诊断。此外，降钙素测量值还可用于监测产降钙素患者中治疗的有效性。14,15 然而，在小部分但却是越来越多的患者中，基础激素水平与正常水平不同。其中一些受试者处于C-细胞形成或增生的早期，适合接受手术治疗，在临床经验中几乎可治愈。为了在疾病早期鉴别出这些患者，有必要针对CT分泌进行激发试验，以排除假阴性患者。使用钙或五肽胃泌素或同时使用两者后，大部分患者都会出现CT水平增加的反应。16,17Elecsys

4、降钙素检测使用针对人降钙素的特异性单克隆抗体。钌复合物标记的抗体中包括了小鼠特异性成分。a) Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌【检验原理】夹心法原理。总检测时间:18 分钟。 第1次孵育：50L标本、一份生物素化的hCT特异性单克隆抗体和钌复合物标记的hCT特异性 单克隆抗体一起孵育，反应形成一“三明治”样抗原-抗体复合物。 第2次孵育：加入链霉亲合素包被的磁珠微粒后,该复合物通过生物素与链霉亲合素的相互作用与固相结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell/Pr

5、oCell M除去。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2点定标和试剂条形码上获得的主曲线生成的。【主要组成成份】提供的物品包括工作溶液。工作溶液的组成如下：M 链霉亲合素包被的磁珠微粒(透明瓶盖)，1瓶，6.5 mL： 链酶亲合素包被的磁珠微粒：0.72 mg/mL;防腐剂。R1 生物素化的抗人降钙素抗体(灰盖),1瓶,8mL：生物素化的单克隆抗人降钙素抗体(小鼠)1.50 mg/L；磷酸盐缓冲液100 mmol/L，pH7.2；防腐剂。R2 钌复合物标记的抗人降钙素抗体(黑盖)，1瓶，8 mL：钌复合

6、物(Ru(bpy)标记的抗人降钙素单克隆抗体(小鼠)1.0 mg/L；磷酸盐缓冲液 100mmol/L，pH7.2；防腐剂。需要的物品(未提供) 06445861-190，Calcitonin CalSet，41.0mL 05618860-190，PreciControl Varia，规格23 mL，分别为PreciControl Varia 1和2 03609987190，Diluent MultiAssay，规格216 mL样本稀释液 实验室基础设备 Elecsys 2010，MODULAR ANALYTICS E170，或cobas e分析仪Elecsys 2010和cobas e 41

7、1分析仪所需材料: 11662988122，ProCell，6380 mL系统缓冲液 11662970122，CleanCell，6380 mL测量池清洗液 11930346122，Elecsys SysWash，1500 mL附加洗液 11933159001，SysClean适配器 11706802001，Elecsys 2010 AssayCup，6060反应管 11706799001，Elecsys 2010 AssayTip，30120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E170，cobas e 601和cobas e 602分析仪所需材料： 04880340190，ProC

8、ell M，22 L系统缓冲液 04880293190，CleanCell M，22 L检测池清洗液 03023141001，PC/CC-Cups，12杯用于在测定前预热ProCell M和CleanCell M 03005712190，ProbeWash M，1270 mL清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。 03004899190，PreClean M，5600 mL检测清洗溶液 12102137001，AssayTip/AssayCup Combimagazine M，48盒84反应杯或移液管吸头，废物袋 03023150001，WasteLiner，废物袋 03027651

9、001，SysClean Adapter M所有分析仪需要材料： 11298500316，Elecsys SysClean，5100 mL系统清洗液【储存条件及有效期】储存在2-8，效期为15个月。请垂直摆放Elecsys降钙素试剂盒，以确保使用前自动混合过程中微粒完全有效。稳定性：未开封试剂，2-8有效期内均可使用开封试剂，2-884天(12周)置于分析仪上28天(4周)【适用仪器】罗氏全自动电化学发光免疫分析系统：Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601cobas e 602【样本要求】样本采集和制备只有以下类型的样本

10、可用于检测。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂，K2-EDTA和K3-EDTA血浆以及含有分离凝胶的肝素锂血浆试管。判断标准：浓度20 pg/mL。手动稀释后，结果要乘上稀释因子。分析仪稀释后MODULARANALYTICS E170，Elecsys 2010和cobas e软件会自动计算结果。【参考值(参考范围)】预期值参考范围上限是以第97.5百分位数给出各实验室应研究参考值对于各自患者人群的适用性，必要时建立各自的参考范围。【产品性能指标】特殊性能指标分析仪的代表性性能指标如下所示。各个试验室获得的数据可能不同。精密度根据CLSI(临床实验室标准委员会)的改良方案(EP5

11、-A2)，使用Elecsys试剂、混合人血清和质控品进行重复性测定：每天2次重复检测，共21天(n=84)。获得如下结果：Elecsys 2010和cobase 411分析仪：可重复性b中间精密度样本平均值SDCVSDCVpg/mLpg/mL%pg/mL%人血清 11.010.0343.40.0525.2人血清 211.50.3453.00.4133.6人血清 31.713.5人血清 448213.82.919.24.0人血清 5191042.62.265.03.4PreciControl Varia 18.880.1912.10.2612.9PreciControl V

12、aria 297.71.441.52.512.6b)可重复性 = 批内精密度MODULAR ANALYTICS E170，cobas e 601和cobas e 602分析仪： 可重复性中间精密度样本平均值SDCV%1.4SDCVpg/mLpg/mL%pg/mL%人血清 14.190.0601.40.0822.0人血清 245.40.7941.81.022.3人血清 34561.9人血清 490714.01.519.82.2人血清 5161325.91.634.72.2PreciControl Varia 18.870.1281.40.1461.6PreciControl

13、 Varia 293.71.671.81.872.0方法学比较使用临床标本比较Elecsys Calcitonin检测(y)和商用方法(x)，相关性数据如下：测量的样本数：247Passing/Bablok 18 线性回归y=0.970x - 0.133 y=1.12x 1.92 = 0.911 r=0.977样本浓度在0.600和1866 pg/mL之间。群组样本含量N第97.5百分位数95%可信区间下限95%可信区间上限表观健康女性1936.40 pg/mL5.17 pg/mL9.82 pg/mL表观健康男性162 9.52 pg/mL8.31 pg/mL14.3 pg/mL分析特异性以9

14、.11和468 pg/mL的降钙素浓度检测时发现了下列交叉反应： 交叉反应物检测浓度 g/L交叉反应性%鲑鱼降钙素1000.017猪降钙素5000.007鸡降钙素5000.005ACTH(1-39)人源1000.037C-肽400000.000降钙素基因相关肽10000.002PTH(1-84)人源1500.013TSH1000 mIU/mL0.009胰岛素(Insulin)试剂盒说明书335000.000催乳素10000.001促胃液素I20000.001依降钙素1000000.000钙抑肽400000.055限值和范围0.5-2000 pg/mL(通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定)

15、。低于检测下限的值报告为2000 pg/mL(或100倍稀释结果可报告至200000 pg/mL)。测量值下限空白限值(LoB)，检出限(LoD)和定量检出限(LoQ)空白限=0.3 pg/mL空白限=0.5 pg/mL定量检出限=1.0 pg/mL，总容许误差30%空白限值和定量检出限均是按照CLSI(临床和实验室标准学会)EP17-A的要求确定。空白限值来自于几次独立测量序列中对几份无分析物样本60次测量所得数值的第95百分位数。空白限相当于低于无分析物样本检测值的浓度，其可能性为95 %。检出限是根据空白限以及低浓度样本的标准差来确定。检出限相当于可被检测出来的最低分析物浓度(数值有95

16、%的可能性高于空白限)。检出限是指样本中可精确定量检出的分析物最低量，总容许误差30 %。限制性-干扰因素检测结果不受黄疸(胆红素1128 mol/L或66 mg/dL),溶血(血红蛋白0.124 mmol/L或0.2 g/dL)，脂血(脂肪乳剂2000 mg/dL)和生物素(40 ng/mL或163 nmol/L)，IgG4g/dL以及IgM 0.7 g/dL和IgM 1,6 g/dL的影响。判断标准：10 pg/mL的样本在初始值10 %的范围内回收，或5 mg/天)，必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。类风湿因子浓度低于1200IU/mL时无明显干扰。降钙素浓度最高达到1 g/mL时无

17、高剂量钩状效应。体外对17种常用和12种特殊药物进行试验未发现会影响检测结果。未发现有药物影响检测结果。采用下表中给出的浓度监测特甲状腺药物。未发现有药物影响检测结果。判断标准：在初始值10 %范围内重现。药物浓度(g/mL)碘化物0,2左甲状腺素0,25卡比马唑30Thiamazol80丙硫氧嘧啶300Perchlorat2000普萘洛尔240胺碘达隆200泼尼松龙100氢化可的松200Fluocortolon100Octreotid0.3少数病例中极高浓度的检测特异性抗体、链霉亲合素或钌抗体会影响检测结果。通过适当的实验设计可将影响因素降到最低。用作诊断用途时，应始终结合病人病历、临床检查

18、和其他检测结果评估结果。【注意事项】注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必须按照当地法规进行处置。专业人员可索取安全数据报告。避免试剂和样本(样本、定标液和质控品)产生泡沫。【参考文献】1. Zaidi M, Moonga BS, Bevis PJR, Alam ASMT, Legon S, Wimalawamsa S, MacIntyre I, Breimer LH:Expression and function of the calcitonin gene products.Vit Horm 46:87-164, 1993.2. Inze

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