米粉中菌落总数的不确定度评估报告

1、关于编号为 2011-QW504 米粉中菌落总数不确定度评估报告1 目的评估编号为2011-QW504米粉中菌落总数的不确定度。2 依据GB 4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数的测定3 适用范围食品中菌落总数的测定4 方法概要4.1 样品制备在无菌环境下称取25g样品，加入225mL生理盐水（0.85%）无菌稀释液， 8000r/min均质12min,制成1： 10样品匀液。4.2 样品稀释用无菌移液管吸取1mL上述稀释液于事先加有9mL无菌生理盐水的无菌试管 中，摇匀，制成 1： 100的样品匀液。按同样的方法制成 1： 1000的样品匀液， 每个稀释度各取1mL稀释液加入无

2、菌空培养皿中，并作两个平行。4.3 培养及时将1520 mL46C琼脂倒入培养皿中，旋转摇匀。琼脂凝固后放于36 1C 培养箱中培养 48 2h。4.4 菌落计数手工计数培养所得菌落数或菌落计数器记录菌落数量。5 数学模型Y=x6 不确定度识别及计算6.1 不确定度来源分析按照上述数学模型及方法概要，其不确定度主要来源有以下3方面： 稀释过程引入的标准不确定度 u1； 加样体积的标准不确定度 u2； 测量结果重复性的标准不确定度 u3。6.2 稀释过程引入的标准不确定度 u11 mL移液管（A级）最大允许误差MPE0.008 mL，按矩形分布，k=31/2，其 标准不确定度Uiv=0.008/

3、3 1/2=0.0046mL;无菌室温度控制在20 5C,查相关手册 得知水的体积膨胀系数为2.1 X 10-4/ C，按矩形分布，k二31/2，则温度对移液管 的不确定度分量U1t = 1X 5X2.1 X 10T/32 = 0.00061mL。一次稀释过程引入的不 确定度m=（ U1+ u1t2）2 = 0.0046mL，本实验最多有3次稀释过程，则U1 =31/2 Xui/1=0.0080。6.3加样体积引入的标准不确定度U2同6.2 计算 U2rel = Ui/1=0.00466.4测量结果重复性引入的标准不确定度U3本实验对该米粉样品进行了 15次测量，其结果见表1。鉴于微生物测量结

4、果分 散性较大，其最大值和最小值之间可相差 23个数量级，因此不能直接利用测量 数据作不确定度评估，而需要对数据做以下处理。6.4.1对Xi取对数lgxi，然后分别计算Igxi平均值、残差、残差平方和并列入表1 中。表1米粉菌落总数15次重复测量数据及相关计算值序号测量值Xi对数值lgx i残差lgx i-lg x残差平方和(lgx i-lg x)124003.3802-0.00200.0000213003.1139-0.26830.07197357003.75590.37370.1396418003.2553-0.12690.01611537003.56820.18600.034596150

5、03.1761-0.20610.04249738003.57980.19760.03903814003.1461-0.23610.05574926003.41500.03280.0010731012003.0792-0.30300.091831141003.61280.23060.053161232003.50510.12290.015111316003.2041-0.17810.031721419003.2788-0.10350.010701546003.66280.28050.07870和值4080050.73320.6819均值27203.38226.4.2计算对数值的标准偏差s(lgx

6、 i)即分散性u(lg x)u3=u(lgx )= s(lgx )=-2 1/2lgx, lg x /n (n 1)0.6819/(15 14)1/20.056987扩展不确定度U的计算由于U1、U2是测量值x的不确定度，而U3是测量值的对数值lgx的不确定度，因 而U3不能和Ui , u计算合成不确定度。下面分两种情况讨论不确定度分量对菌落 总数不确定度的影响。7.1 u i和比对测量结果的影响U1和U2的合成不确定度Ui,2=(0.0046 2+0.00802)1/2 =0.0092，取包含因子k=2，即 扩展不确定度U=0.018，在不考虑测量重复性的情况下，该样品的菌落总数范围 为27

7、20X( 1 0.018 )，即菌落总数在2671与2769之间。7.2 u 3对测量结果的影响由6.4 可知 U3=u(lgx ) =0.05698，取置信概率 p=95% 自由度 v=15-1=14,查t 分布表得包含因子k=k95( 15) =2.13，得扩展不确定度U=2.13X 0.05698=0.1214， 即 lgx 的置信区间为3.3822-0.1214,3.3822+0.1214，即3.2608,3.5036，因 此x的置信区间为1 0 3.2608,10 3.5036，即菌落总数在1823与3189之间。7.3不确定度分量的取舍由7.1和7.2可见，稀释过程引入的标准不确定度U1和加样体积的标准不确定 度U2对测量结果不确定度的影响远远小于测量结果重复