测定四藤片中绿原酸含量的测定

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减测定四藤片中绿原酸含量的测定(作者：单位：邮编：)【摘要】目的采用高效液相色谱法测定四藤片中绿原酸的含量，以控制该制剂的质量。方法精密称定不同批次的四藤片， 经超声提取、过滤，用高效液相色谱测定。结果绿原酸在6.8434.2 呃ml-1内呈良好的线性关系 r=0.999 9，平均加样回收率为 101.2%(RSD为1.5%,n=9)。结论该法测定四藤片中绿原酸的含量, 结果准确,重复性好。【关键词】四藤片；绿原酸；高效液相色谱法四藤片是根据中医理论和长期临床经验，经反复筛选验证总结 出的具有祛风利湿、消炎镇痛等作用的中成药。临床上用于治疗风湿 性关节炎。该药

2、由忍冬藤、异型南五味子、春根藤、石蒲藤等中药组 成。忍冬藤为该制剂的君药，绿原酸是忍冬藤的主要成分。四藤片标 准收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十三册 1，标准中没有定 性分析及含量测定方法，不能有效地控制药品质量。对该制剂的研究 文献报道极少，对其含量测定未见文献报道。笔者参考有关文献2， 3资料，采用高效液相色谱法对四藤片中绿原酸进行了含量测定， 为控制四藤片的内在质量提供依据。1仪器、药品与试剂smartline 1000高效液相色谱仪（德国诺尔）；四藤片（汕头制药厂 061012、060818、061025）;绿原酸对照品（中国生物制品检定所提 供，批号：0753-9910）;甲醇为

3、色谱纯，水为双蒸水，其余均为分析 纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:Kromosil C18（4.6 mm 200 mm）,天津奥 特公司;流动相为甲醇：0.3%磷酸（25 : 75）;流速1.0 ml min-1 ;柱 温:室温；检测波长324 nm ;进样量20讥2.2对照品溶液、供试品溶液与阴性对照液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品3.42 mg，置于50 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，制成68.4 g ml-1的标准溶液。取3.0 ml置10 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀， 即为对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备取四藤片20片，精密称定，研细

4、，精 密称取细粉1.0 g，置入50 ml量瓶中，加50 ml甲醇超声30 min， 取出，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤液用0.45 gm微孔滤膜过滤，即为供试品溶液。2.2.3阴性对照液的制备取按处方量除去忍冬藤的阴性样品0.4g,同法制成阴性供试品溶液2.3系统适用性实验分别取对照品溶液、供试品溶液、 阴性对照液20 “注入色谱仪,记录色谱图，见图1,阴性对照色谱图 在绿原酸峰位置无色谱峰，表明其它组分对测定无干扰。绿原酸峰与 相邻组分峰的分离度为6.6，理论塔板数以绿原酸峰计算为 6 520。2.4线性关系考察分别精密量取对照品溶液 1, 2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.

5、0 ml置10 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取20卩 l，注入HPLC，记录色谱图，分别进样，依法测定 ，得回归方程：Y=-610.43+51 204.7X , r=0.999 9。绿原酸在 6.84 34.2ml-1之间呈良好的线性。2.5精密度实验取上述对照品溶液19.72ml-1连续进样5次，记录色谱图量取峰面积：其峰面积平均值为1 016 135 ,RSD=0.16%。2.6稳定性实验取上述供试品溶液分别于 0, 1 , 6, 12 , 24 h 取20 4，注入HPLC ,记录色谱图，结果表明该样品在24 h内稳定。 峰面积平均值为102 8437,RSD=0.39%

6、。2.7回收率实验采用加样回收法，取已知含量批号为061012的 样品适量,精密称定，再准确加入绿原酸对照品适量，依法操作，计算。结 果见表1。表1回收率测定结果(略)2.8重复性实验取同一四藤片样品5份，按供试液制备方法制备, 分别依法测定，测得绿原酸含量的 RSD为1.9%(n=5),表明本法重复 性好。2.9样品测定取对照品溶液1 972ml-1和样品溶液用0.45 g微孔滤膜滤过，各进样20山读取峰面积值，按外标法计算含量。结 果见表2。表2样品测定结果(略)3小结笔者采用两种不同提取方法对样品中提取完全进行了比较， 结果表 明该提取方法简便快速，测定结果基本稳定，说明本文采用的提取方 法是合适的。文献报道2绿原酸有两个最大吸收波长，经过实验测定在324nm 处，绿原酸的吸收强度最大。因此选择 324nm为测定波长。【参考文献】:1中华人民共和国卫生部药政局中药成方制剂，第十 三册S .WS3-B-1909