第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析

1、第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第二十五章第二十五章 肿瘤免疫及其免疫检测肿瘤免疫及其免疫检测 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 什么是肿瘤？为什么会发生肿瘤？什么是肿瘤？为什么会发生肿瘤？ 肿瘤是正常组织异常增生所形成的赘生物。按肿瘤是正常组织异常增生所形成的赘生物。按 其所引起的后果不同可分为恶性和良性两种。其所引起的后果不同可分为恶性和良性两种。 实践表明，内在的遗传因素、免疫状态和外部实践表明，内在的遗传因素、免疫状态和外部 的诱变因子，是构成肿瘤发生发展的基础和条件。的诱变因子，是构成肿瘤发生发展的基础和条件。 其中，机体的免疫状态，尤其是细胞免疫功能其中，机体的免疫状态，尤其是细

2、胞免疫功能 的强弱，已被视为是否发生肿瘤的重要内在因素。的强弱，已被视为是否发生肿瘤的重要内在因素。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 肿瘤发病率和死亡率 WHO：每年肿瘤死亡人数为：每年肿瘤死亡人数为630万，至万，至2020年，年， 全世界肿瘤患者将达全世界肿瘤患者将达1500万。万。 我国：恶性肿瘤死亡率为我国：恶性肿瘤死亡率为108.39/10万，占死亡万，占死亡 人数人数17.94%。 肿瘤的早期发现和早期治疗可明显提高患者生肿瘤的早期发现和早期治疗可明显提高患者生 存率。存率。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 临床：病史、体症临床：病史、体症 物理检查：物理检查：X光、光、CT、

3、磁共振、磁共振、B超、超、 红外、核医学红外、核医学 术前：穿刺、刮片、拉网术前：穿刺、刮片、拉网 术后：组织切片术后：组织切片 免疫：肿瘤抗原和代谢物测定免疫：肿瘤抗原和代谢物测定 分子生物：肿瘤相关基因分析分子生物：肿瘤相关基因分析 肿肿 瘤瘤 诊诊 断断 辅助 病理病理 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 正常 间变 恶性 可见前期 不可见前期 物质分析 影像诊断 肿瘤的发展及诊断期肿瘤的发展及诊断期 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 肿瘤免疫学肿瘤免疫学( tumor immunology)是研是研 究肿瘤抗原性质、机体对肿瘤的免疫应答、究肿瘤抗原性质、机体对肿瘤的免疫应答、 机体免疫功

4、能与肿瘤发生、发展的相互关机体免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关 系以及肿瘤免疫学诊断和免疫学防治的科系以及肿瘤免疫学诊断和免疫学防治的科 学。学。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第第一节一节 肿瘤抗原分类肿瘤抗原分类 肿瘤抗原（肿瘤抗原（tumor antigen）是指在肿瘤发）是指在肿瘤发 生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物 质，在肿瘤的发生发展及诱导机体产生抗肿瘤质，在肿瘤的发生发展及诱导机体产生抗肿瘤 免疫应答中具有重要作用，是肿瘤免疫诊断和免疫应答中具有重要作用，是肿瘤免疫诊断和 免疫防治的分子基础。免疫防治的分子基础。 第25章肿瘤免

5、疫及其免疫检测剖析 1肿瘤特异性抗原（肿瘤特异性抗原（tumor specific antigen, TSA） 是肿瘤细胞所特有的新抗原，它只表达于肿瘤细胞，是肿瘤细胞所特有的新抗原，它只表达于肿瘤细胞， 而不存在于正常组织细胞。而不存在于正常组织细胞。(黑色素瘤相关排斥抗原黑色素瘤相关排斥抗原) 2肿瘤相关性抗原肿瘤相关性抗原 ( tumor associated antigen, TAA) 是指非肿瘤细胞所特有的，正常组织或细是指非肿瘤细胞所特有的，正常组织或细 胞也可表达的抗原物质，但此类抗原在癌变细胞胞也可表达的抗原物质，但此类抗原在癌变细胞 的表达水平远远超过正常细胞。的表达水平远远

6、超过正常细胞。 一、根据肿瘤抗原的特异性分类一、根据肿瘤抗原的特异性分类 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 二、根据肿瘤抗原产生机制分类二、根据肿瘤抗原产生机制分类 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 机体产生肿瘤抗原的可能机制为：机体产生肿瘤抗原的可能机制为： 基因突变；基因突变； 细胞癌变过程使原本不表达的某些基因被激活；细胞癌变过程使原本不表达的某些基因被激活； 抗原合成过程的某些环节发生异常，如糖基化异常；抗原合成过程的某些环节发生异常，如糖基化异常； 胚胎时期抗原或分化抗原的异常、异位表达；胚胎时期抗原或分化抗原的异常、异位表达； 某些基因产物尤其是信号转导分子的过度表达；某些基因产物

7、尤其是信号转导分子的过度表达； 外源性基因（如病毒基因）的表达外源性基因（如病毒基因）的表达 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 1.1.理化因素诱发的肿瘤抗原理化因素诱发的肿瘤抗原 化学致癌剂（如甲基胆蒽、氨基偶氮染料等）化学致癌剂（如甲基胆蒽、氨基偶氮染料等） 或物理辐射（如紫外线、或物理辐射（如紫外线、X-射射线等）等可致某些线等）等可致某些 基因发生突变或使潜伏的致癌病毒激活，由此诱基因发生突变或使潜伏的致癌病毒激活，由此诱 发肿瘤并表达新抗原。发肿瘤并表达新抗原。 此类肿瘤抗原的特点是：免疫原性弱、特异此类肿瘤抗原的特点是：免疫原性弱、特异 性强、高度异质性。性强、高度异质性。 第25

8、章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 同一种化学致癌剂或物理辐射诱发的肿瘤，同一种化学致癌剂或物理辐射诱发的肿瘤， 在不同种系、同种系的不同个体、甚至同一在不同种系、同种系的不同个体、甚至同一 个体的不同部位，其肿瘤抗原特异性和免疫个体的不同部位，其肿瘤抗原特异性和免疫 原性各异。原性各异。 由于不同或相同理化因素诱导的肿瘤抗原间由于不同或相同理化因素诱导的肿瘤抗原间 很少有交叉成分，故用免疫学技术难以诊断。很少有交叉成分，故用免疫学技术难以诊断。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 2 病毒诱发的肿瘤抗原病毒诱发的肿瘤抗原 多种肿瘤的发生与病毒感染有密切关系。多种肿瘤的发生与病毒感染有密切关系。 此类肿

9、瘤抗原与理化因素诱发的肿瘤抗原不同，其无此类肿瘤抗原与理化因素诱发的肿瘤抗原不同，其无 种系、个体和器官特异性，但具有病毒特异性。种系、个体和器官特异性，但具有病毒特异性。 由同一病毒诱发的肿瘤均表达相同的肿瘤抗原，且具由同一病毒诱发的肿瘤均表达相同的肿瘤抗原，且具 有较强的免疫原性；有较强的免疫原性； 由不同由不同DNA病毒或病毒或RNA病毒诱导的肿瘤抗原，其分病毒诱导的肿瘤抗原，其分 子结构和生物学特性各异。子结构和生物学特性各异。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 3 自发性肿瘤抗原自发性肿瘤抗原 自发性肿瘤是指迄今尚未阐明其发生机制的肿自发性肿瘤是指迄今尚未阐明其发生机制的肿 瘤，人类

10、大部分肿瘤属于此类。瘤，人类大部分肿瘤属于此类。 自发性肿瘤表达的抗原大部分可能为突变基因自发性肿瘤表达的抗原大部分可能为突变基因 的产物，包括癌基因（如的产物，包括癌基因（如ras等）、抑癌基因（如等）、抑癌基因（如 p53等）的突变产物以及融合蛋白（如等）的突变产物以及融合蛋白（如bcl-abl等）。等）。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 4 异常表达的正常成分异常表达的正常成分 分化抗原分化抗原 胚胎抗原胚胎抗原 甲胎蛋白（甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（癌胚抗原（CEA） 过度表达的抗原过度表达的抗原 独特型抗原独特型抗原 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第二节第二节 机体抗肿瘤的免疫

11、学效应机制机体抗肿瘤的免疫学效应机制 机体抗肿瘤的免疫学效应十分复杂，机体抗肿瘤的免疫学效应十分复杂， 涉及特异性和非特异性抗肿瘤机制相互交涉及特异性和非特异性抗肿瘤机制相互交 错，体液免疫与细胞免疫机制相互协调和错，体液免疫与细胞免疫机制相互协调和 补充，从而共同执行免疫监视功能。补充，从而共同执行免疫监视功能。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 T细胞细胞 生物学效应包括生物学效应包括T细胞的直接杀伤细胞的直接杀伤 和对免疫系统其它成分的活化。和对免疫系统其它成分的活化。 1. CD4+T细胞细胞 2. CD8+T细胞细胞(在抗肿瘤效应中起关键作用在抗肿瘤效应中起关键作用) 通过释放毒性物

12、质直接溶解靶细胞，或通过分泌通过释放毒性物质直接溶解靶细胞，或通过分泌 IFN- 间接杀伤肿瘤细胞，在机体发挥免疫监视的作用。间接杀伤肿瘤细胞，在机体发挥免疫监视的作用。 一、抗肿瘤的细胞免疫机制一、抗肿瘤的细胞免疫机制 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 NK细胞细胞 NK细胞是宿主固有免疫或一线防御机制的一细胞是宿主固有免疫或一线防御机制的一 部分，对肿瘤细胞和病毒感染细胞比对大多部分，对肿瘤细胞和病毒感染细胞比对大多 数正常细胞更具有毒性作用。其作用机制类数正常细胞更具有毒性作用。其作用机制类 似于似于CTL，还可分泌大量的细胞因子以调节，还可分泌大量的细胞因子以调节 机体免疫反应。机体免

13、疫反应。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 巨噬细胞巨噬细胞 活化的巨噬细胞与肿瘤细胞的结合可触发细活化的巨噬细胞与肿瘤细胞的结合可触发细 胞毒活性，细胞毒性介质有细胞溶解蛋白酶、胞毒活性，细胞毒性介质有细胞溶解蛋白酶、 TNF-及其相关的因子、及其相关的因子、IFN- 和和IFN-、IL-1， 氧化反应的中介物如过氧化氢，氮化反应的中介氧化反应的中介物如过氧化氢，氮化反应的中介 物如物如NO、精氨酸酶等也可能属于此列。、精氨酸酶等也可能属于此列。 它是参与抗肿瘤、抗感染的主要效应细胞。它是参与抗肿瘤、抗感染的主要效应细胞。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （四）（四） 树突状细胞树突状细胞

14、 是一类专职抗原呈递细胞，辅佐T、B细 胞参与特异性杀伤肿瘤的过程。 可利用制备肿瘤特异性树突状细胞以进行 肿瘤的生物疗法。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 1补体的溶细胞效应补体的溶细胞效应 2抗体依赖细胞介导的细胞毒效应抗体依赖细胞介导的细胞毒效应 3抗体的免疫调理作用抗体的免疫调理作用 4抗体封闭肿瘤细胞表面某些受体抗体封闭肿瘤细胞表面某些受体 5抗体干扰肿瘤细胞粘附作用抗体干扰肿瘤细胞粘附作用 6其他机制其他机制 二、抗肿瘤的体液免疫机制二、抗肿瘤的体液免疫机制 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第三节第三节 常见恶性肿瘤疾病与相关肿瘤标志物常见恶性肿瘤疾病与相关肿瘤标志物 近年来随

15、着现代科技的不断发展，免疫学，近年来随着现代科技的不断发展，免疫学， 分子生物学，细胞生物学，生物化学的深入研分子生物学，细胞生物学，生物化学的深入研 究，发现了许多特异性较强，有一定临床价值究，发现了许多特异性较强，有一定临床价值 的肿瘤标志物的肿瘤标志物100100多种，受到国内外学者的高多种，受到国内外学者的高 度重视。度重视。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 肿瘤标志物（肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指在肿瘤的）是指在肿瘤的 发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是 由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生由机

16、体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生 长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、 多胺及癌基因产物等。多胺及癌基因产物等。 （一）肿瘤标志物的慨述（一）肿瘤标志物的慨述 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 特异性强特异性强 与肿瘤类型与肿瘤类型 ( (大小大小/ /分期分期) ) 有关有关 灵敏度高，能在灵敏度高，能在 肿瘤早期发现。肿瘤早期发现。 具有器官特异性具有器官特异性 监测肿瘤监测肿瘤 治疗效果治疗效果 监测肿瘤监测肿瘤 的复发的复发 理想的肿瘤标志物理想的肿瘤标志物 预测肿瘤预测肿瘤 的预后的预后 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖

17、析 体液肿瘤标志物的分类和命名尚未完全统一，一般分为：体液肿瘤标志物的分类和命名尚未完全统一，一般分为： 胚胎抗原类：如胚胎抗原类：如AFP，CEA等，等， 糖链抗原类：如糖链抗原类：如CA125，CA15-3，CA19-9等。等。 激素类：如患甲状腺髓样癌时降钙素升高，患绒毛膜激素类：如患甲状腺髓样癌时降钙素升高，患绒毛膜 细胞癌时细胞癌时hCG明显升高。明显升高。 酶和同工酶类：酶和同工酶类：GT，PAP等。等。 蛋白质类：蛋白质类：2微球蛋白，铁蛋白，本周蛋白等微球蛋白，铁蛋白，本周蛋白等 癌基因产物类如癌基因产物类如ras基因蛋白，基因蛋白，myc基因蛋白，基因蛋白，p53抑抑 癌基因

18、蛋白等。癌基因蛋白等。 二二 肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 1. 1. 胚胎抗原类肿瘤标志物胚胎抗原类肿瘤标志物 甲胎蛋白（甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP） AFP是胎儿发育早期合成的一种糖蛋是胎儿发育早期合成的一种糖蛋 白白(1球蛋白球蛋白)，分子量，分子量70kD，胎儿出生，胎儿出生 后不久即逐渐消失。后不久即逐渐消失。 参考值：血清参考值：血清AFP 300g/L，但有部，但有部 分患者分患者AFP始终不升高；始终不升高； 病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中AFP可有不同可有不同 程度的增高，但一般在程度的增高，

19、但一般在300g/L以下；以下； 生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤；生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤； 妊娠三个月后，血清妊娠三个月后，血清AFP含量开始升高，分娩后含量开始升高，分娩后 三周恢复正常。若孕妇血清中三周恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高，应异常升高，应 考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 癌胚抗原（癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA） 1965年年CEA发现于成人结肠癌组织中，分子量发现于成人结肠癌组织中，分子量 约为约为

20、200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人，可溶性糖蛋白，主要存在于成人 癌组织以及胎儿的胃肠管组织中，故名癌胚抗癌组织以及胎儿的胃肠管组织中，故名癌胚抗 原，是一种广谱肿瘤标志物。原，是一种广谱肿瘤标志物。 参考值：血清参考值：血清CEA 5.0g/L 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、 胃癌，转移性恶性肿瘤也有不同程度的阳性率；胃癌，转移性恶性肿瘤也有不同程度的阳性率； 在恶性肿瘤的随访，病情监测，疗效评价等方在恶性肿瘤的随访，病情监测，疗效评价等方 面有重要价值。面有重要价值。 肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝

21、炎、肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、 胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高；胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高； 吸烟者中约有吸烟者中约有33%的人的人CEA5g/L。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 2. 糖链抗原类肿瘤标志物糖链抗原类肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （1）糖链抗原）糖链抗原15-3 ( CA 15-3) CA15-3是一种乳腺癌相关抗原，属是一种乳腺癌相关抗原，属 糖蛋白，分子量超过糖蛋白，分子量超过400kD，可用一，可用一 对单克隆抗体（对单克隆抗体（MAb115D8和和 MAbDF3）进行双抗体夹心法来识别。

22、）进行双抗体夹心法来识别。 与与CA15-3同类的多态性上皮粘蛋白同类的多态性上皮粘蛋白 抗原还有抗原还有CA27-29，CA549等。等。 参考值：血清参考值：血清CA15-328kU/L 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 乳腺癌，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为乳腺癌，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为30%， 转移性乳腺癌阳性率可达转移性乳腺癌阳性率可达80%； 其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢 癌，子宫颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的癌，子宫颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的 阳性率；阳性率； 肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤肝脏

23、，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤 疾病，阳性疾病，阳性 率一般低于率一般低于10%。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （2）糖链抗原）糖链抗原125 ( CA 125) CA125是很重要的卵巢癌相关抗是很重要的卵巢癌相关抗 原，原，1981年年Bast发现。发现。CA125是一是一 种大分子多聚糖蛋白。种大分子多聚糖蛋白。 参考值参考值 ：血清：血清CA 125 35kU/L 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 卵巢癌，阳性率约为卵巢癌，阳性率约为61.4%。手术和化疗有效者。手术和化疗有效者 CA 125水平很快下降，若有复发，水平很快下降，若有复发，CA 125升高可升高可 先于临床

24、症状出现之前。先于临床症状出现之前。 其他恶性肿瘤，如乳腺癌其他恶性肿瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌，胰腺癌50%， 胃癌胃癌47%，肺癌，肺癌41.4%，结肠直肠癌，结肠直肠癌34.2%， 其他妇科肿瘤其他妇科肿瘤43%。 非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎， 卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也 有不同程度升高。有不同程度升高。 妊娠早期，妊娠早期，CA 125有升高。有升高。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （3）糖链抗原）糖链抗原19-9 (CA19-9) CA19-9是一种与胰腺癌，胆囊是一种与胰腺癌，胆囊

25、 癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标 志物，又称胃肠癌相关抗原。志物，又称胃肠癌相关抗原。 参考值：血清参考值：血清CA199 37 kU/L 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 胰腺癌，胆囊癌，胆管壶腹癌时，血清胰腺癌，胆囊癌，胆管壶腹癌时，血清CA 19-9 水平明显升高，阳性率约为水平明显升高，阳性率约为74.9%，尤其是胰腺癌，尤其是胰腺癌 晚期病人，血清晚期病人，血清CA 19-9浓度可达浓度可达40万万kU/L，是重，是重 要的辅助诊断指标；要的辅助诊断指标； 胃癌，阳性率约为胃癌，阳性率约为50%，结肠癌，阳性率约为，结肠癌，阳性率约为60%； 急性胰腺炎，胆

26、囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化， 肝炎等疾病，肝炎等疾病，CA 19-9也有不同程度的升高，注意与也有不同程度的升高，注意与 恶性肿瘤的鉴别。恶性肿瘤的鉴别。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 3. 酶类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 前列腺特异性抗原前列腺特异性抗原 (PSA) PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶。在血清是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶。在血清 中中PSA以两种生化形式存在以两种生化形式存在： 一部分一部分(5%40%)是以低分子量是以低分子量(33kD)的游离的游离PSA （f-PSA）形式存

27、在；）形式存在； 大部分大部分(60%90%)是以是以PSA和和1抗糜蛋白酶、抗糜蛋白酶、 2-巨球蛋白等结合的形式存在，称复合巨球蛋白等结合的形式存在，称复合PSA(c-PSA)。 总总PSA（t-PSA）,包括血清中包括血清中f-PSA和和c-PSA。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 PSA的两种主要形式 游离PSA 结合PSA (PSA-ACT) -1-antichymotrypsin 抗原结合部位抗原结合部位 PSA PSA ACT 1抗糜蛋白酶抗糜蛋白酶 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 参考值：血清参考值：血清 t-PSA 4.0 g/L， f-PSA 25 第25章肿瘤免疫及其

28、免疫检测剖析 【注意事项注意事项】在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩，在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩， 导尿等，将会导致血清导尿等，将会导致血清PSAPSA升高，应注意避免。升高，应注意避免。 血清血清PSA升高升高 前列腺癌患者升高，但大约前列腺癌患者升高，但大约25%患者，其患者，其PSA水平正常；水平正常； 而大约有而大约有50%的良性前列腺疾病患者的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。为增加水平增高。为增加 PSA对前列腺癌检测的敏感性和特异性，可使用对前列腺癌检测的敏感性和特异性，可使用PSA年龄特年龄特 异性参考范围，异性参考范围，PSA密度、密度、PSA速率

29、、速率、f-PSA/t-PSA比值等；比值等； 前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见 血清血清PSA水平升高，故当水平升高，故当PSA在在4.0g/L10.0g/L的灰区时，的灰区时， 须进行须进行f-PSA和和 f-PSA/t-PSA比值的测定。比值的测定。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 NSE是烯醇化酶的一种同功酶，烯醇化酶同功酶根是烯醇化酶的一种同功酶，烯醇化酶同功酶根 据据，三个亚基的不同，可分为三个亚基的不同，可分为、 和和五种二聚体同功酶。五种二聚体同功酶。 亚基组成的同功酶属神经元和

30、神经内分泌细胞特亚基组成的同功酶属神经元和神经内分泌细胞特 有，故命名为神经元特异性烯醇化酶，有，故命名为神经元特异性烯醇化酶， NSE是一种酸性蛋白酶，参与糖酵解。肿瘤组织糖是一种酸性蛋白酶，参与糖酵解。肿瘤组织糖 酵解作用加强，细胞增殖周期加快，细胞内的酵解作用加强，细胞增殖周期加快，细胞内的NSE释释 放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增高。放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增高。 参考值：血清参考值：血清NSE15g/L 神经元特异性烯醇化酶（神经元特异性烯醇化酶（NSE） 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 【注意事项注意事项】NSE也存在于正常红细胞中，标本溶血也存在于正常红细胞

31、中，标本溶血 会影响测定结果，因此采血时要特别注意避免溶血。会影响测定结果，因此采血时要特别注意避免溶血。 血清血清NSE升高见于升高见于 小细胞肺癌（小细胞肺癌（SCLC）。可用于鉴别诊断，监）。可用于鉴别诊断，监 测小细胞肺癌放疗、化疗后的治疗效果。测小细胞肺癌放疗、化疗后的治疗效果。 神经母细胞瘤，患者神经母细胞瘤，患者NSE水平异常增高，因此水平异常增高，因此 测定测定NSE的水平可用于上述疾病的诊断和鉴别的水平可用于上述疾病的诊断和鉴别 诊断。诊断。 神经内分泌细胞肿瘤，如嗜铬细胞瘤，胰岛神经内分泌细胞肿瘤，如嗜铬细胞瘤，胰岛 细胞瘤，甲状腺髓样癌，黑色素瘤，视网膜细胞瘤，甲状腺髓样

32、癌，黑色素瘤，视网膜 母细胞瘤等血清母细胞瘤等血清NSE也可增高。也可增高。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 AFU是一种溶酶体酸性水解酶，以往主要用于遗是一种溶酶体酸性水解酶，以往主要用于遗 传性传性AFU缺乏引起的岩藻糖贮积病的诊断。缺乏引起的岩藻糖贮积病的诊断。 Deugnier等（等（1984）首先发现原发性肝癌患者血清）首先发现原发性肝癌患者血清 中中AFU活性升高。活性升高。 参考值参考值 ：血清：血清 420 mol/L -L-岩藻糖苷酶测定（岩藻糖苷酶测定（AFU） 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 原发性肝癌，患者血清中原发性肝癌，患者血清中AFU活性明显升高，活性明显升高

33、， AFP阴性的肝癌患者中阴性的肝癌患者中AFU也可见升高，因此，也可见升高，因此， 两者联合检测有较好的互补作用。两者联合检测有较好的互补作用。 其他恶性肿瘤，如肺癌、结肠癌、乳腺癌、子其他恶性肿瘤，如肺癌、结肠癌、乳腺癌、子 宫癌等也可有部分病例升高。宫癌等也可有部分病例升高。 慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，升高， 随病情好转随病情好转AFU下降，动态监测有助于与肝癌下降，动态监测有助于与肝癌 的鉴别。的鉴别。 妊娠期间，妊娠期间，AFU升高，分娩后迅速下降。升高，分娩后迅速下降。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 4. 4. 激素类肿瘤标志物激素

34、类肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 hCG是胎盘滋养层细胞分泌的一是胎盘滋养层细胞分泌的一 种糖蛋白类激素，是监测早孕的重要种糖蛋白类激素，是监测早孕的重要 指标。在异常情况下，恶性肿瘤也可指标。在异常情况下，恶性肿瘤也可 产生产生hCG。 参考值上限为参考值上限为: 5 IU/L 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 hCG Epitopes 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 Free -hCG Assay 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤hCG升高，如绒毛膜细胞癌、升高，如绒毛膜细胞

35、癌、 葡萄胎、精原细胞睾丸癌等葡萄胎、精原细胞睾丸癌等 其他肿瘤如乳腺癌、胃肠道癌、肺癌等也可见升高。其他肿瘤如乳腺癌、胃肠道癌、肺癌等也可见升高。 良性疾病如卵巢囊肿、子宫内膜异位症、肝硬化等良性疾病如卵巢囊肿、子宫内膜异位症、肝硬化等hCG 也可见增高。也可见增高。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 CT是由甲状腺滤泡旁细胞即是由甲状腺滤泡旁细胞即C细胞分泌的多肽激细胞分泌的多肽激 素，主要生理作用是降低血钙。素，主要生理作用是降低血钙。 参考值参考值100 ng/L 降钙素（降钙素（calcitonin, CT） 甲状腺髓样癌血清降钙素升高，其他肿瘤如肺癌、甲状腺髓样癌血清降钙素升高，其

36、他肿瘤如肺癌、 乳腺癌、胰腺癌等也见增高。乳腺癌、胰腺癌等也见增高。 肾功能衰竭患者降钙素常升高。肾功能衰竭患者降钙素常升高。 【注意事项注意事项】由于降钙素在血液中的半寿期短约为由于降钙素在血液中的半寿期短约为 10min 10min，样本收集后应及时处理，冷冻保存。，样本收集后应及时处理，冷冻保存。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 5. 蛋白质类肿瘤标志物蛋白质类肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 2M是一种低分子蛋白，人体除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞是一种低分子蛋白，人体除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞 以外，所有的有核细胞都有以外，所有的有核细胞都有2M。因为。因为2M分子量小

37、，易于由肾分子量小，易于由肾 小球滤过，但几乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中小球滤过，但几乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中 2M含量很低。含量很低。 参考值：血清参考值：血清 2.4mg/L；尿；尿 320g/L 2-微球蛋白微球蛋白( 2M ) 2M 2M升高见于升高见于: : 恶性肿瘤，慢性淋巴细胞白血病等。恶性肿瘤，慢性淋巴细胞白血病等。 肾脏疾病：急慢性肾盂肾炎，肾小管药物性损害等肾脏疾病：急慢性肾盂肾炎，肾小管药物性损害等 肾移植排斥反应时。肾移植排斥反应时。 免疫性疾病：系统性红斑性狼疮，艾滋病等。免疫性疾病：系统性红斑性狼疮，艾滋病等。 【注意事项注意事项】尿

38、标本采集后，为避免尿标本采集后，为避免2M2M分解，应加适当的分解，应加适当的 NaOHNaOH缓冲液调缓冲液调PHPH至至7.07.0左右，然后置左右，然后置44保存，保存，2 2天内测定。天内测定。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 铁蛋白是判断体内是否缺铁的敏感指标。铁蛋白是判断体内是否缺铁的敏感指标。 Fer升高还与肿瘤有关，癌细胞具有较强合成铁升高还与肿瘤有关，癌细胞具有较强合成铁 蛋白的能力，因此也是一种肿瘤标志物。蛋白的能力，因此也是一种肿瘤标志物。 血清参考值：男性血清参考值：男性 15200 g/L 女性女性 12150 g/L 铁蛋白（铁蛋白（ ferritin , Fer

39、) 各种恶性肿瘤和白血病可见血清铁蛋白升高。各种恶性肿瘤和白血病可见血清铁蛋白升高。 各种炎症感染、急性心肌梗死、反复输血等，见铁蛋白升高。各种炎症感染、急性心肌梗死、反复输血等，见铁蛋白升高。 铁蛋白铁蛋白 12 g/L 时即可诊断为缺铁。是诊断隐性缺铁性贫时即可诊断为缺铁。是诊断隐性缺铁性贫 血的可靠指标。血的可靠指标。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 肿瘤标志物肿瘤标志物 参考值参考值 相关肿瘤相关肿瘤 CA 50 24 kU/L 胰腺癌、结肠癌、胃癌等胰腺癌、结肠癌、胃癌等 CA 72-4 6 kU /L 胃癌、粘液性卵巢癌等胃癌、粘液性卵巢癌等 CA 242 20 kU /L 胰腺

40、癌、结肠癌、胃癌等胰腺癌、结肠癌、胃癌等 前列腺酸性磷酸酶（前列腺酸性磷酸酶（PAP） 2.0g /L 前列腺癌前列腺癌 鳞状上皮细胞癌抗原（鳞状上皮细胞癌抗原（SCCSCC） 1.5g /L 宫颈癌、肺和头颈部鳞癌等宫颈癌、肺和头颈部鳞癌等 组织多肽抗原（组织多肽抗原（TPATPA） 80U/L 膀胱癌、前列腺癌、消化道膀胱癌、前列腺癌、消化道 恶性肿瘤恶性肿瘤 细胞角蛋白细胞角蛋白1919片段片段 3.3g /L 非小细胞肺癌（非小细胞肺癌（NSCLCNSCLC） （CYFRA21-1CYFRA21-1） 唾液酸唾液酸 1.8 mmol/L 肺癌、胃癌、黑色素瘤等肺癌、胃癌、黑色素瘤等 6

41、. 6. 其它常用肿瘤标志物其它常用肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 恶性肿瘤是除心血管之外最常见的死因，恶性肿瘤是除心血管之外最常见的死因， 严重威胁人类健康。我国以肺癌、肝癌、胃癌、严重威胁人类健康。我国以肺癌、肝癌、胃癌、 结肠癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌等最为多结肠癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌等最为多 见，占全部恶性肿瘤的见，占全部恶性肿瘤的70%-80%。 三、三、 常见恶性肿瘤与相关肿瘤标志物常见恶性肿瘤与相关肿瘤标志物 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人 群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近 50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡

42、 率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均 占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第 二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚 不完全明确，大量资料表明，长期大量吸烟 与肺癌的发生有非常密切的关系。 （一）肺癌（一）肺癌 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 1、神经特异性烯醇化酶、神经特异性烯醇化酶(NSE) 为小细胞肺癌的标志物 2.细胞角蛋白细胞角蛋白19片段片段(CYFRA21-1) 为非小细胞肺癌标志物。 两者只有在中、晚期肺癌才有明显的改变， 因此常难于达到早期诊断的目的，但是与 肿瘤生长趋势有关，可结合临床判断疗效 和监视复发。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 3、鳞状上皮细胞癌抗原、鳞

43、状上皮细胞癌抗原(SCC) 作为鳞癌的标记，特异性高，但敏感性 较低。1977年建立了多克隆抗体，现已 用单克隆抗体测定，有所改进，可用于 监视宫颈、肺及头颈上皮细胞癌的进展。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 第四节第四节 肿瘤标志物的检测与临床应用肿瘤标志物的检测与临床应用 肿瘤标志物的检测已经从细胞水平深入到分肿瘤标志物的检测已经从细胞水平深入到分 子基因水平，并整合了生物化学、细胞学、病理子基因水平，并整合了生物化学、细胞学、病理 学、分子生物学和免疫学等多个学科，检测敏感学、分子生物学和免疫学等多个学科，检测敏感 性和特异性不断提高。性和特异性不断提高。 免疫检测法是目前肿瘤标志物的

44、主要检测方法，免疫检测法是目前肿瘤标志物的主要检测方法， 包括放射免疫分析和包括放射免疫分析和ELASA以及荧光免疫测定。以及荧光免疫测定。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 一一 肿瘤标志物检测的影响因素肿瘤标志物检测的影响因素 （一）分析前影响因素（一）分析前影响因素 标本采集和保存的影响标本采集和保存的影响 血清是测定血清是测定TM的最常用标本，由于血液的稀释作的最常用标本，由于血液的稀释作 用，检测阳性率受到一定的影响。用，检测阳性率受到一定的影响。 前列腺按摩、前列腺穿刺、导尿和直肠指检后，血前列腺按摩、前列腺穿刺、导尿和直肠指检后，血 液中液中PSA和和PAP可升高。可升高。 1.

45、保存温度：保存温度：4保存保存 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 2. 某些药物浓度的影响某些药物浓度的影响 抗雄激素治疗前列素时可抑制抗雄激素治疗前列素时可抑制PSA产生，产生， 5-氟尿嘧啶可使氟尿嘧啶可使CEA升高升高 被测者自身状况的影响被测者自身状况的影响 肝功能异常、胆道排泄不畅等均可造成肝功能异常、胆道排泄不畅等均可造成CEA等增高等增高 4. 生物学因素的影响生物学因素的影响 PSA可随年龄增高可随年龄增高 部分妇女在月经期部分妇女在月经期CA125和和CA19-9可升高可升高 妊娠期妊娠期CA125和和AFP明显升高明显升高 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （二）分析中影响

46、因素（二）分析中影响因素 1. 1. 检测方法和试剂检测方法和试剂： 方法学的差异方法学的差异 试剂盒的差异试剂盒的差异 测定标准化的问题测定标准化的问题 因此，在工作中要尽量使用同一种方法，因此，在工作中要尽量使用同一种方法， 同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 2.“钩状效应钩状效应”（hook effect） 3. 携带污染携带污染 (carry-over) （交叉污染）（交叉污染） 4. 嗜异性抗体：可导致在无抗原的情况下，出现肿瘤嗜异性抗体：可导致在无抗原的情况下，出现肿瘤 标志物浓度增高的假象。嗜异性抗体可出现在曾被标志物浓度增高的假象。嗜异性抗体可出现在曾被 鼠或宠物咬过的人，以及使用过动物免疫剂（如单鼠或宠物咬过的人，以及使用过动物免疫剂（如单 克隆抗体）治疗过的人。克隆抗体）治疗过的人。 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 （三）分析后影响因素（三）分析后影响因素 参考区间参考区间 结果报告与解释结果报告与解释 第25章肿瘤免疫及其免疫检测剖析 二、肿瘤标志物的临床应用二、肿瘤标志物的临床应用 （1）高危人群的筛查）高危人群的筛查 （2）肿瘤的鉴别诊断和临床分期）肿瘤的鉴别诊断和临床分期 （