第一课显微观察类.

1、第一课显微观察类一、重、难点技能归类、整理（一）显微镜使用显微镜的使用：置镜（装镜头）T对光T置片T调焦T观察1. 安放。显微镜放置在桌前略偏左，距桌缘8 10cm处，装好物镜和目镜（目镜 5X物镜10X）2 对光。转动转换器，使低倍镜对准通光孔，选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜，同时把反光镜 转向光源，直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜；光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜T选较大的光圈T选反光镜（左眼观察）3观察。将切片或装片放在载物台上，标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近

2、切片（约0.5cm），左眼观察目镜，（反时针）旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，看到物像时轻微来回旋转细准焦，直到物像清晰。（找不到物像时，可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。观察时两眼都要睁开，便于左眼观察，右眼看着画图。侧面观察降镜筒-左眼观察找物像T细准焦螺旋调清晰4高倍镜的转换。找到物像后，把要观察的物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜，只准用细 准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到物像清楚为止。顺序：移装片T转动镜头转换器T调反光镜或光圈T调细准焦螺旋注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。（1）低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的

3、像，可能原因？ （ABCA、物像不在视野中B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜（2）放大倍数与视野的关系：视野范围1细胞数目视野明暗度细胞结构物镜与玻片距离高倍镜比低倍镜小少暗清晰小5 装片的制作和移动：制作：滴清水-放材料-盖片移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反）6 污点判断：（1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；（2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜；（3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。7完毕工作。使用完毕后，取下装片，转动镜头转换器，逆时针旋

4、岀物镜，旋进镜头盒；取岀目镜，插 进镜头盒，盖上。把显微镜放正。（二）临时装片制作取清洁载玻片-向载玻片中央滴一滴清水或生理盐水-取材并置于液滴中-加盖盖玻片（注意防止气泡 产生）-显微观察。（三）几个显微观察实验的材料选择I 观察叶绿体和细胞质流动一般选择藓类小叶或新鲜的蚕豆叶下表皮（稍带叶肉）等叶绿体较大且丰富的材料。n 质壁分离复原实验选择紫色洋葱表皮（成熟的植物表皮细胞）。山观察有丝分裂实验洋葱根尖或马蛔虫受精卵（分裂旺盛的组织或细胞）植物细胞有丝分裂：解离-漂洗-染色-制片（特别：压片）-观察 IV 观察减数分裂选择蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片二、实验案例：用显微镜观察多种多样的细

5、胞一. 实验目的：|_1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点2）运用制作临时装片的方法二. 实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、 线粒体等细胞器，从而能够区别不同的细胞。三方法步骤：第一步：转动反光镜使视野明亮第二步：在低倍镜下观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央第三步：用转换器转过高倍物镜问（1）是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？提示：低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。问（2）为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 提示：

6、如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜 观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。问（3）用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？提示：不行。用高倍镜观察，只需微调即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。 第四步：观察并用细胞准焦螺旋调焦。四：讨论：1. 使用高倍镜观察的步骤和要点是什么？答：（1）首先用低倍镜观察，找到要观察的物像，移到视野的中央。（2）转动转换器，用高倍镜观察，并轻轻转动细准焦螺旋，直到看清楚材料为止。2. 试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能的原因： 答：这些细胞在

7、结构上的共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是：这些细胞的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这 是个体发育过程中细胞分化产生的差异。3. 大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别？答：从模式图中可以看出，大肠杆菌没有明显的细胞核，没有核膜，细胞外有鞭毛，等等。 用高倍镜观察线粒体和叶绿体一实验目的：使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二.实验原理：叶绿体的辨认依据：叶绿体是 绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活

8、细胞中线粒体呈现蓝绿色。三实验材料：观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。四方法步骤:步骤一注意问题|分析1 制片。用镊子取一片黑藻的小 叶，放入载玻片的水滴中，盖上制片和镜检时，临时装片中的叶片 不能放干了，要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩， 将影响对叶绿体形态和分布的盖玻片。观察。2低倍镜下找到叶片细胞3.高倍镜下观察叶绿体的形态和 分布4.制作人的口腔上皮细胞临时装 片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染 液T用牙签取

9、碎屑T盖盖玻片5.观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无 J色。讨论：1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶 绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又 如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。观察细胞的有丝分裂一实验目的：1 制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片2观察植物细胞有丝分裂的过程，识另U有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时

10、期的时间长短。3绘制植物细胞有丝分裂简图。二.实验原理：1 在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因 此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2. 染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或 染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。三实验材料：洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。三实验步骤：步骤注意问题分析一、根尖的培养实验前34天，让洋葱放在广口瓶上，底置于温暖处，常换水。一|因

11、为细胞分裂和生长需要水分、适|部接触清水。根长约 5cm时可用。宜的温度和氧气。二、装片的制作（解离T漂洗T染色T制片）解离时间要保证，细胞才目的：溶解细胞间质，使组织中的 细胞相互分离开来。此时，细胞已 被盐酸杀死。1 解离：上午10时至下午2时，剪取洋 葱根尖23mm，立即放入盛有质量分数为能分散开来。|15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精溶液解离时间也不宜过长。J否则，根尖过于酥软，无法取出。J的混合液（1： 1 ）的玻璃皿中，室温下解 离 35min。2漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放 入盛有清水的玻璃皿中漂洗约 10 min。漂洗要充分，可换水12 次。目的：洗去解离液，便于染色

12、。3.染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃染色时间不宜过长，否则 显微镜下一片紫色，无法龙胆紫等为碱性染料，可使染色体 着色。皿中染色35min。观察。醋酸洋红溶液也能使染色体着色4制片：用镊子将这段洋葱根尖取岀来， 放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖 把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片 上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地 压载玻片，使细胞分散开来。要弄碎根尖，再垂直向下 均匀用力压片，不可移动目的：使细胞分散，避免细胞重叠， 便于观察。做得成功的装片，标本盖玻片，被压成云雾状。三、观察1 .低倍镜观察：把装片放在低倍镜 下，慢慢移动装片

13、，找到分生区细胞。一定要找到分生区。分生区细胞特点是：细胞呈正方 形，排列紧密，有的细胞正处于分裂期。2.高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，在一个视野里，往往不容用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，易找全有丝分裂过程中仔细观察，找出处于细胞分裂期中期的细各个时期的细胞。如果是胞，再找出前期、后期、末期的细胞。这样，可以慢慢地移动装 片，从邻近的分生区细胞 中寻找。讨论：制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？答：制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点：（1）剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间；（2）解离时，要将根尖细胞杀死，细胞间质被溶解，使细胞容易分离；（3

14、）压片时，用力的大小要适当，要使根尖被压平，细胞分散开。观察细胞的减数分裂一. 实验目的：|_通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。二. 实验原理：蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂：减数 第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化， 因而可据此识别减数分裂的各个时期。三方法步骤：E.精子第二课时检测与验证类一、重、难点技能归类、整理1、 比色法（如还原糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定）比色法是利用生物组织中的有机物与某些化学试剂

15、相互作用，能产生颜色反应的原理，可以根据颜 色反应鉴定生物组织中某些有机物的存在。2、 研磨、过滤技术（如叶绿体中色素的提取和分离，DNA的粗提取）|研磨过程中加入 SiO2提为了研磨充分。色素的提取时加 CaC03是为了避免色素被破坏，其原因是叶 绿体基质呈弱碱性，细胞液呈弱酸性，加入 CaCO3是为了让弱碱性的 CaCO3中和细胞液的弱酸性，使色 素分子在叶绿体破裂后仍处于弱碱性环境中，使色素的结构和性质维持稳定。3、纸层析法（如叶绿体中色素的提取和分离 ）具体方法：制样液；制备滤纸条；点样液；层析，观察实验结果。4、同位素示踪技术：用示踪元素标记化合物，根据这种化合物的放射性，对有关的一

16、系列化学反应或变化进行追踪的科 学研究方法叫同位素标记法。如噬菌体侵染细菌的实验、用18O2和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子的转移途径等。5、化学物质的检测方法： 淀粉一一碘液还原性糖一一斐林试剂、班氏糖定性试剂CO2 Ca（0H）2溶液或酸碱指示剂乳酸一一PH试纸02余烬复燃蛋白质被蛋白酶分解、双缩脲试剂二、实验案例1 检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质实验原理：还原糖斐林试剂 砖红色脂肪苏丹山染液* 橘黄色 I 苏丹W染液红色 红色蛋白质方法步骤：双缩脲试剂紫色紫色可溶性糖的鉴定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧

17、化酶含量高，组 织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2.取1支试管，向试管内注入 2mL组织样液。3.向试管内注入1mL新制的斐 林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分 别配制、储存，使用前才将甲、乙 液等量混匀成斐林试剂；斐林试剂很不稳定，甲、乙液 混合保存时，生成的Cu（0H）2在70900C下分解成黑色CuO 和水；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组 织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会与 组织样液发生反应，无Cu（OH）2生成。|4.试管放在盛有50-65C温水的 大烧杯中，加热约 2分钟，观察 到溶液颜色：浅蓝色t棕色t最好用试管夹夹住试管上部，使试 管底部不触及烧杯底部

18、，试管口不 朝向实验者。防止试管内的溶液冲岀试管， 造成烫伤；_|砖红色（沉淀）也可用酒精灯对试管直接加热。缩短实验时间。脂肪的鉴定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄 片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸 水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡34小 时，新花生的浸泡时 间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间 过长，组织较软，切下的薄片不易成形。 切片要尽可能薄些，便于观察。在子叶薄片上滴23滴苏丹山或苏丹W染色时间不宜过长。J染液，染色1分钟。用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶

19、性溶剂，可将花生细胞中的脂肪 颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上12滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇中。可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形 小颗粒。蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。（浸泡、去皮研磨、过滤。）黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可 购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约 2ml于试管中， 加入双缩脲试剂 A，摇匀；再加 入双缩脲试剂B液34滴，摇匀， 溶液变紫色。A液和B液也要分开配 制，储存。鉴定时先加 A 液后加B液。先加NaOH溶液，为Cif与蛋白质反

20、应提供 一个碱性的环境。AB液混装或同时加入， 会导致。+变成Cu（OH）2沉淀，而失效。 否则CuSQ的蓝色会遮盖反应的真实颜CuSO4溶液不能多加。色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内 壁上，使反应不容易彻底， 并且试管也不 易洗干净。附：淀粉的检测和观察碘液不要滴太多以免影响颜色观察用试管取2ml待测组织样液，向 试管内滴加2滴碘液，观察颜色 变化。2. DNA的粗提取与鉴定 实验原理：鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。利用DNA在 0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，而蛋白质此时的

21、溶解度高的特点，可使DNA与蛋白质分离，形成沉淀析岀，通过过滤，得到初提取的滤出物 DNA再利用DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一 步提取出含杂质较少的DNA实验方法步骤：庄旳师聆恢啊）炳”利用地胞硕出购切月慨內牛拠站释讹山ism則”桶:箱血只府偎辛帘解住內在液中力口 2mo-l/L 酌 EoCl F蜜甲夜幷曲.胖 传烧存.陆中 PHA T年曰冊好际UNjl坯分犒解-申斤出向殊斗不中nn耳倔丁艮幵樹评，fa千 口冲样f嘗解更下 阳?m丰斤出曰伴*（；豹商和DMA WMDPEIIE/Wh 在班杯什1耳4 2phj17L CM NCl“対心4F寸谴冷IMA 的 NnciJT

22、I阿馬许i寸滿*焜邱?毓妊俘 旳 口卜3 痂版中力口待第 角弟勺共17 ”页申琉媽桂枱 一ran抵t坪幵 佳趨竝林 购tZfl-lA-口冋挖药鉴走：邱t网试1&占启口 II LJ1 5nnm4的 MM1陷偎，彳幵1乱充詩皆解于H中一比督 fe*iferroJi3tifi-fluL7tfld.；良宅li#水中力口斑 口曲_门 石冷却” 可洗观 lha E CATiiJ 慝应 廈 10 喙工 JJilJi fe 3. 叶绿体中色素的提取和分离实验目的：1 尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色。 实验原理：1 叶绿

23、体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高, 随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。 实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶 实验步骤:干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角注意问题加 SiO2加 CaCO3加丙酮迅速分 析加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素 含镁，可被细胞液中的有机酸产生的氢代替，形成 去镁叶绿素，CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸, 防止叶绿体被破坏。叶绿体色素易

24、溶于丙酮等有机溶剂。减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的丙酮挥 发。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。1 .提取色素5克绿叶剪碎，放入研钵，加SiO2、CaC03和 5mL 丙酮（或10mL无水乙醇）迅速、充分 研磨。（若没有无水乙醇，也可 用体积分数为95%的乙醇，但 要加入适量的无水碳酸钠，除 去水分）2收集滤液|漏斗基部放一单层尼龙布，研 磨倒入漏斗内挤压，将滤液收 集到小试管中，用棉花塞塞住 试管口。3. 制备滤纸条将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长 10cm,宽1cm的纸条，一端剪去 二个角，并在距这一端1cm处划 一铅笔线。可吸收更多的滤液。 层析时，色素分离效果

25、好。 可使层析液同时到达滤液细线4. 划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿 铅笔线划岀细、齐、直的一条 滤液细线，干后重复三次。5. 纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中，将 滤纸条（划线一端朝下）插入 层析液中，用培养皿盖盖上烧 杯。6察实验结果胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a （蓝绿色）叶绿素b （黄绿色）滤液细线越细、越 齐越好。重复三次。层析液不能没及 滤纸条。烧杯要盖培养皿 盖。扩散最快是胡萝 卜素，扩散最慢是 叶绿素b，含量最 多的是叶绿素a。防止色素带之间部分重叠。增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明显。防止色素溶解在层析液中,层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发四种色

26、素之所以能被分离，是因为四种色素随层析 液在滤纸上的扩散速度不同。实验讨论：I1 滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。2提取和分离叶绿体色素的关键是什么？答：提取叶绿体色素的关键是：叶片要新鲜、浓绿；研磨要迅速、充分；滤液收集后，要及时用棉 塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是：一是滤液细线要细且直，而且要重复划几次; 二是层析液不能没及滤液线。4. 通过模拟实验探究膜的透性 实验目的： 1说明生物膜具有选择透过性 2尝试模拟实验的方法 实验原理：某些半透膜（如动物的膀胱膜、肠衣等），

27、可以让某些物质透过，而另一些物质不能透过。或者（玻璃纸）水分子可以透过，而蔗糖分 子因为比较大，不能透过。可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开， 然后通过观察溶液液面高低的变化，来观察半透膜的选择透过特性， 进而类比分析得岀生物膜的透性。方法步骤：1 取两个长颈漏斗，分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。2 .在A漏斗中注入硫酸铜溶液， B漏斗中注入蔗糖溶液，并加入少 许红墨水，使其略呈红色。3 将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中，在两漏斗的液面处做 标记4静置一段时间后，观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化，并将观察到的结果设计表格 进行记录。讨论：1. 漏斗管内的液面为什么会升高？答：由

28、于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗岀的水分子数量，使得管 内液面升高。2如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升高吗？ 答：用纱布替代玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不会升高。3如果烧杯中不是清水，而是同样浓度的蔗糖溶液，结果会怎样？答：半透膜两侧溶液的浓度相等时，单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗岀的水分 子数量，液面也不会升高。5. 观察植物细胞的质壁分离和复原 实验目的：1 .学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2了解植物细胞发生渗透作用的原理。 实验原理：1 质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度

29、时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都岀现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。2 质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水， 外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴 细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。实验材料：紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。实验步骤：步 骤1 制作洋葱表皮的临时装片。

30、在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱 鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴 中）。盖上盖玻片。_I注意问题盖盖玻片应让盖玻 片的一侧先触及载 玻片，然后轻轻放 平。防止装片产生气泡2.观察洋葱（或水绵）细胞 可看到：液泡大，呈紫色，原生 质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞 中有带状叶绿体，原生质层呈绿 色，紧贴着细胞壁。3观察质壁分离现象。 从盖玻片的一侧滴入 0. 3g/ml的 蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸 引，重复几次。镜检。观察到： 液泡由大变小，颜色由浅变深， 原生质层与细胞壁分离。原生质 层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。4 观察细胞质壁分离的复原现 象。从盖玻片的一侧滴入清水，在另

31、一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变大， 颜色由深变浅，原生质层恢复原 状。重复几次糖液浓度不能过高发生质壁分离的装 片，不能久置，要 马上滴加清水，使 其复原。重复几次。液泡含花青素，所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照 作用。蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透 作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性 大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁 分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁分离的 复原。细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作 用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。为了使细胞完全浸入清

32、水中。实验讨论:1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象? 答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？ 答：不会。因为红细胞不具细胞壁。第三课时调查与探究类 一、重、难点技能归类、整理1.实验结果的显示方法： 光合速度一一 O2释放量或CO2吸收量或有机物产生量 呼吸速度一一02吸收量或CO2释放量或有机物减少量 物质转移途径一一同位素示踪 细胞液浓度大小质壁分离 细胞是否死亡一一细胞质流动或质壁分离 甲状腺激素作用一一动物耗氧量，发育速度等 生长激素作用一一生

33、长速度（体重、身长变化） 胰岛素作用一一动物活动状态I 菌量一一菌落数或亚甲基蓝褪色程度2实验条件的控制方法： 增加水中氧气泵入空气或吹气或放入绿色植物 减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水除去CO2 NaOH溶液 除去叶中原有淀粉一一置于黑暗环境 除去叶中叶绿素酒精加热 除去光合作用对呼吸的干扰一一给植株遮光 如何得到单色光一一棱镜色散或薄膜滤光 血液抗凝加入柠檬酸钠 线粒体提取细胞匀浆离心二、实验案例调查常见的人类遗传病实验目的：1 初步学会调查和统计人类遗传病的方法2 通过对几种人类遗传病的调查，了解这几种遗传病的发病情况3通过实际调查，培养接触社会，并从社会中直接获取资料或数据的能

34、力 实验原理：显性遗传病具有世代相传的特点，隐性遗传病隔代岀现。伴X染色体隐性遗传病的遗传特点是交叉遗传, 隔代岀现，患者男性多于女性。伴X染色体显性遗传病的遗传特点是世代相传，患者女性多于男性。方法步骤：可以以小组为单位开展调查工作。其程序是：组织问题调查小组T确定课题T制定调查计划T分头调查研究T撰写调查报告T汇报交流调查结果注意事项:1 调查时，最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病，如红绿色盲、白化病、高度近视（600度以上）等 2为保证调查的群体足够大，小组调查的数据，应在班级和年级中进行汇总3某遗传病的发病率某种遗传病的患病人数=某种遗传病的被调查人数x 100%#ltL悔堆吃*j

35、ffl整紳宰碁国理Un,妊喪书帀皇医、4 人类常见的遗传病类型概括土壤中动物类群丰富度的研究实验目的:1 初步学会动物类群丰富度的统计方法2.能对土壤中部分常见的动物进行分类3 学会设计表格进行观察和统计。实验原理：土壤不仅为植物提供水分和矿质元素，也是一些动物的良好栖息场所。研究土壤中动物类群的丰富 度，操作简便，有助于理解群落的基本特征与结构。方法步骤：1. 提岀问题：女吐壤中有哪些小动物？它们的种群密度是多少?2. 制定计划3.实施计划本研究包括：准 备、选择样地、取样、 观察和分类、统计和分 析。1）准备：查阅有关资料4点力s騷2SIT厝益婁啊干聲匕迟議亭2）选择样地：采集大型土壤动物

36、选择林下或落叶等腐殖质较为丰富的地方。3） 取样：在采集地随机选取35个样点（50cmX 50cmK 15cm）,采集样点内的落叶和土壤，将其中的大 型土壤动物用镊子或手检的方法。也可以在野外用取样器取样的方法进行采集、即：用一定规格的捕捉 器（如采集缺罐、吸虫器等进行取样）。一般不适合用标志重捕法取样。4）观察和分类：“观察和分类”需要借助动物分类的专业知识。5）统计和分析：“统计和分析”，要求设计一个数据收集和统计表，并据此进行数据分析样也7物种类大型动物（种类）小型动物（种类）微型动物（种类）物种丰富度|_（D=S/lnA ）丰富度的统计方法：记名计算法和目测估计法。记名计算法是指在一定

37、面积的样地中，直接数岀各种群的个体数目，这一般用于个体较大，种群 数量有限的群落。|二目测估计法是按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。等级的划分和表示方法 有：“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。课后讨论：如果要调查水中小动物类群的丰富度，应如何对研究方法进行改进？答：主要是取样和采集方式要进行改进。根据调查水中小动物种类的不同，取样设备也不同，例如用网 兜、瓶子等。取样和采集时要考虑定点、定量等因素。定点就是要选取有代表性的地点取样；定量就是 每次取样的数量（例如一瓶、一网等）要相同。探究影响酶活性的因素实验目的:1探究不同温度和 PH对过氧化氢酶活性的影响。2培养实验

38、设计能力。方法步骤：提岀问题T作岀假设T设计实验T （包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）T实施实验T分析与结论T表达与交流。实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶， 过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为 3.5%的FeCb溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比，每滴 FeCb溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研 磨液中过氧化氢酶分子数的 25万倍。方法步骤：步骤注意问题解释取4支洁净试管，编号，分别加入2mLH2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在900C左右的水

39、浴 中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照向3号、4号试管内分别滴入 2不可用同一由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液，支滴管的过氧化氢酶，会影响实验准确性J观察气泡产生情况J肝脏研磨液因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用 21必须是新鲜而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低的1研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增 J肝脏在制成加酶与底物的接触面积J研磨液2-3min后，将点燃的卫生香分别放卫生香时，现象：3号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛I放入3号和4号试管内液面的上动作要快，不烈复燃，4号试管产生气泡少，冒泡时间长，

40、卫生香 _|方，观察复燃情况要插到气泡几乎无变化中避免卫生香因潮湿而熄灭实例2:温度对酶活性的影响实验目的：1. 初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2 探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈 现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注：市售a-淀粉酶的最适温度约 60C 方法步骤：操作注意问题:解释取3支试管，编上号，然后分别注 入2mL可溶性淀粉溶液另取3支试管，编上号，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分 成3组，分

41、别放入热水（约 600C）、 沸水和冰块中，维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的温度不同而 使混合后温度发生变化，反应温度不是操 作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下 的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min保持各自温度时间不 J能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液， 摇匀后观察这3支试管中溶液颜色 变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤序号加入试剂或处理方法试管|ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/厂新鲜淀粉酶溶液/ |/1mL1mL1m

42、L2保温5min600C1000C00C600C1000C00C3将a液加入到A试管，b液加入到B试管， c液加入到C试管中，摇匀4保温5min600C1000C 100C5滴入碘液，摇匀2滴2滴2滴6观察现象并记录实例3: pH值对酶活性的影响 操作步骤：用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）序号加入试剂或处理方法试管11231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mLJimL/注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶液/1mL/41注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL/?mL6600C水浴保温5min7加入斐林试剂，边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min9观察3支试管中溶液

43、颜色变化变记录探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用实验目的：1. 了解植物生长调节剂的作用2 进一步培养进行实验设计的能力 实验原理：植物插条经植物生长调节剂处理后，对植物插条的生根情况有很大的影响，而且用不同浓度、不同时间 处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度，在此浓度下植物插条的生根数量最多，生长最快。 实验材料、用具实验材料：可以用杨、加拿大杨、月季等的枝条。实验用具：天平、量筒、容量瓶、烧杯、滴管、试剂瓶、玻璃棒、木箱或塑料筐（下方带流水孔）、盛水托盘、矿泉水瓶。实验步骤：| 提岀问题T作岀假设T设计实验T （包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录 表格）

44、T实施实验T分析与结论T表达与交流。注：可先设计一组梯度比较大的预实验进行摸索，再在预实验的基础上设计细致的实验。1. 提出冋题不同浓度的生长素类似物，如2，4-D或NAA促进杨插条生根的最适浓度是多少呢？2. 作出假设匚适宜浓度的2, 4-D或NAA可以使杨或月季插条基部的薄壁细胞恢复分裂能力，产生愈伤组织，长出大量 不定根。3. 预测实验结果经过一段时间后（约 35 d ），用适宜浓度的 2，4-D或NAA处理过的插条基部和树皮皮孔处（插条下 1/3处）岀现白色根原体，此后逐渐长岀大量不定根；而用较低浓度、较高浓度或清水处理的枝条长岀极 少量的不定根或不生根。4. 实验步骤（1）制作插条。

45、（2） 分组处理：将插条分别用不同的方法处理（药物浓度、浸泡时间等可多组。如可分别在NAA中浸泡 1、2、4、8、12、24 h 等）。（3） 进行实验：将处理过的插条下端浸在清水中，注意保持温度（2530 C）o（4）小组分工，观察记录：前三天每天都要观察记录各小组实验材料的生根情况。自行设计记录表格， 记录用不同浓度生长素类似物处理后枝条生根情况，如生根条数，最长与最短根的长度等。（浓度适宜 的生长素类似物处理后，在绿色树皮的皮孔处长有白色幼根；时间长一些会在枝条下端斜面树皮与木质 部之间长有白色根原体）。每隔 23 d记录也可。（5）研究实验中岀现的问题。分析不同插条的生根情况。 不能生

46、岀不定根：有可能是 枝条上没有芽、枝条倒插 等。第13页共17页都能生岀不定根：促进扦插枝条生根是指刺激枝条的下端生岀不定根，而不是刺激根生长。不同的枝条 可能生岀的不定根的数目多少不一样，如枝条上芽多，则产生的生长素就多，就容易促使不定根的萌发。分析与本实验相关的其他因素。 A. 温度要一致；B. 设置重复组。即每组不能少于 3个枝条；C. 设置对照组。清水空白对照；设置浓度不同的几个实验组之间进行对比，目的是探究2, 4-D或a -萘乙酸促进扦插枝条生根的最适浓度。5. 分析实验结果，得岀实验结论按照小组分工认真进行观察，实事求是地对实验前、实验中（包括课内、课外）和实验后插条生根 的情况

47、进行记录，并及时整理数据，绘制成表格或图形。最后分析实验结果与实验预测是否一致，得岀 探究实验的结论。不要求实验结果都一致，但要求有分析研究。6. 表达与交流实验小组的每一个成员都要写岀自己个性化的实验报告，向小组和全班汇报探究过程和结果、经验、教 训或体会，包括在科学态度、科学方法和科学精神方面的收获。7进一步探究：进行扩展性的探究和实践，大多数需要在课外完成。探究酵母菌的呼吸方式实验目的：1 了解酵母菌的无氧呼吸和有氧呼吸情况2 学会运用对比实验的方法设计实验 实验原理：1 酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细 胞呼吸的不同方式。方程式（

48、略）2 C02可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。3橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。 方法步骤：提岀问题T作岀假设T设计实验T （包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录 表格）T实施实验T分析与结论T表达与交流。J1 .酵母菌培养液的配制取20g新鲜的食用酵母菌，分成两等份，分别放入锥形瓶A （ 500mL ）和锥形瓶B （ 500mL ）中，再分别向瓶中注入240mL质量分数为5%的葡萄糖溶液2 .检

49、测CO 2的产生a所尬Ik用锥形瓶和其他材料用 具组装好实验装置（如 图），并连通橡皮球（或 气泵），让空气间断而持 续地依次通过3个锥形 瓶（约50min）。然后将 实验装置放到25-350c的环境中培养8-10h。|3.检测洒精的产生 各取2mL酵母菌培养液 的滤液，分别注入 2支 干净的试管中。向试管中分别滴加0.5mL溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（体积分数为95%-97%）并轻轻振荡，使它们混合均匀，观察试管中溶液的颜色变化。第四课时生物技术与实践1二、重要的结论性语句：1、制备固定化酶的方法主要有吸附法、交联法、包埋法等，制备固定化细胞的方法主要是吸附法、包埋 法两大类。2、多种

50、微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。3、酸性条件下重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。4、酒精发酵是一个无氧发酵过程，果醋发酵是一个有氧发酵过程。5、 利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物如无机盐、单糖、双糖、氨基酸分离开。常用透析膜有天然的肠衣、人工合成的玻璃纸（醋酸纤维素）。三、重、难点知识归类、整理：1、常用的酶制剂的洗涤原理（1）蛋白酶可将蛋白质分解为易溶解或分散与洗涤液中的多肽或氨基酸，有助于去除血渍、奶渍以及各 种食品类的蛋白质污垢。|（2）脂肪酶可将脂肪水解为甘油和游离的脂肪酸等，有助于去除含脂肪的污渍如：食品中的油渍、人体 皮脂以及口

51、红等。（3）淀粉酶是淀粉水解为麦芽糖、葡萄糖等可溶性成分，有助于去除含淀粉的污垢如：面条、粥等的污垢。（4）纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它的作用是使纤维结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的 灰尘和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去污效果。2、影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素：酶制剂的种类、污物的类型、水温、水量、水质、衣物的质料、洗衣粉的用量、浸泡时间、洗涤时间。3、固定化酶、固定化细胞的制备方法：固定化酶有物理法和化学法两大类：物理方法包括物理吸附法、包埋法等，化学法包括交联法等。物理法固定酶的优点在于酶不参加化学反应，整体结构保持不变，酶的催化活性得到很好保留。但是，由于包埋物或

52、半透膜具有一定的空间或立体阻碍作用，因此对一些反应不适用。化学法是将酶通过化学键连 接到天然的或合成的高分子载体上，使用偶联剂通过酶表面的基团将酶交联起来，而形成相对分子量更大、不溶性的固定化酶的方法。固定化细胞的制备方式是多种多样的，主要是吸附法、包埋法。吸附法，又叫载体结合法，是依据带电的微生物细胞和载体之间的静电、表面张力和粘附力的作用， 使微生物细胞固定在载体表面和内部形成生物膜。吸附法可分为物理吸附法和离子吸附法两种。该法操 作简单，固定化过程对细胞活性 影响小。包埋法，是将微生物包埋在凝胶的微小格子或微胶囊等有限空间内，微生物被包裹在该空间内不能 离开，而底物和产物能自由地进岀这个空间，常用的有凝胶包埋法