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文档简介
1、新生儿溶血病血清学检查新生儿溶血病血清学检查 ABO新生儿溶血病 ABO新生儿溶血病血(新生儿溶血病血(HDN)是由于母婴)是由于母婴 ABO血型不合,母体的 IgG抗A 或抗B经过胎盘 进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。此病 多见于O型母亲所生A型或B型婴儿,与O型母 亲血清中所含IgG抗A(B)抗体有关。新生儿 溶血病血清学检查主要是进行三项试验:溶血病血清学检查主要是进行三项试验: 直抗直抗 试验、游离试验和释放试验 。 试剂 抗人球蛋白血清 患儿5%红细胞悬液 患儿血清 A型、B型、O型红细胞悬液 酶处理A型、B型、O型试剂红细胞悬液 抗人球蛋白的原理 一 直接抗人球蛋白试验 本试验
2、用于检测受检者红细胞上是否存在不完全抗体。 1.取小试管2支,按下表标记及加样 试剂 被检管 阴性对照管 患儿5%红细胞悬液 1滴 1滴 0.9%生理盐水 1滴 抗球蛋白血清 1滴 2. 混匀,3400 rpm,离心15s,轻轻摇动,观察结果。 二 游离试验 本试验用于检查新生儿血清中是否有游离的IgG型抗体 1.取小试管3支 ,按下表标记及加样 试剂 Ac管 Bc管 Oc管 患儿血清 1滴 1滴 1滴 A型试剂红细胞悬液 1滴 B型试剂红细胞悬液 1滴 O型试剂红细胞悬液 1滴 2.混匀后37水浴30min,用生理盐水洗涤3次,最后一 次吸尽盐水,然后向各管中加1滴抗球蛋白试剂,3400 r
3、pm/ 分,离心15s,轻轻摇动,观察结果。 三 释放试验 本试验和直抗试验相同,也是检测新生儿红细胞 上的致敏的血型抗体,只是方法有所不同。释放试验 首先利用特殊的方法将致敏在新生儿红细胞上的抗体 放散下来,然后再检测放散液中的抗体。 1、取洗涤后的压积红细胞,加等量盐水。 2、混匀后,置于56水浴中不停摇动7-10min。 3、取出后立即高速离心,3000 rpm/ 分2-3min,如果 有可能,则使用预先加热过的离心杯。 4、离心后马上吸出上清液置于小试管中再次离心3000 rpm/ 分 1min。取上清液分成3等份于 3个小试管中 ,分别标记上“A”、“B”、“O”。按下表标记及加样
4、试剂 A管 B管 O管 酶处理A型红细胞悬液 1滴 酶处理B型红细胞悬液 1滴 酶处理O型红细胞悬液 1滴 5、混匀后、混匀后37水浴水浴30min ,用生理盐水洗涤,用生理盐水洗涤 3次次 ,最后 一次吸尽盐水,然后向各管中加 1滴抗人 球蛋白试剂,球蛋白试剂,3400 rpm/ 分,离心分,离心15s,轻轻摇,轻轻摇 动,观察结果。动,观察结果。 注意事项 1 、离心后要轻摇观察结果,摇动时不要使劲地甩试管, 要轻摇或用手指轻弹。 2、加抗球蛋白之前要3次洗涤,最后一次在倒掉上清后 不要再倒转试管,而是直接置于吸水纸上吸尽盐水。 3 、热放散时应严格注意温度和时间,温度过高,细胞易 溶解,过
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